TEMA 12: BASE MOLECULAR Y CONSERVACIÓN

1. CONSERVACIÓN DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA. LA REPLICACIÓN.

La estructura de doble hélice del ADN explica la replicación exacta de las dos cadenas de la
molécula. Cada cadena sirve de molde a la nueva complementaria, así se forman dobles
hélices con la misma secuencia que la parental, y se logra transmitir la info genética de
generación en generación.

Replicación: se sintetizan a partir de una molécula inicial, dos idénticas entre sí. Es la base de
la conservación de la ifo genética de una generación a otra y permite a las células hijas
contener el mismo ADN que la madre. En células eucariotas se da en la fase S de la interfase.

2. CARACTERÍSTICAS.
Este mecanismo fue propuesto por Watson y Crick, y según esta hipótesis las dos cadenas
de la doble hélice se separan para replicarse y cada una sirve de molde para fabricar una
nueva cadena, según la complementariedad de bases, así la secuencia de nucleótidos se
duplica con exactitud y la info permanece constante.

Esta no es la única hipótesis, se pueden plantear tres:

Conservativa:La doble hélice original permanece y se origina otra totalmente nueva.

Semiconservativa: W y C, cada nueva molécula de ADN tiene una cadena vieja y otra recién
sintetizada.

Dispersiva: Las cadenas de las moléculas de ADN tienen fragmentos de la molécula madre y
fragmentos nuevos.

2.1 PRINCIPALES CARACTERÍSTICAS.

- Es semiconservativa: Cada molécula de ADN está formada por una cadena de ADN
original y una recién formada.

- Se da por acción de mononucleótidos en sentido 5’->3’, la nueva cadena crece al unirse a

su extremo hidroxilo 3’ el grupo fosfato del nucleótido complementario ffde.
- Es bidireccional: Se forman dos horquillas de replicación que avanzan en sentidos opuestos,
una a la izquierda del punto de inicio y otra a la derecha. Cada una está constituida por las
dos cadenas abiertas del ADN molde y por la cadena de nueva síntesis. Según avanza la
replicación hay dos horquillas moviéndose a lo largo del ADN, en sentidos opuestos
formando burbujas de replicación.

- En virus y bacterias hay un solo punto de inicio, en procariotas se forma ADN en ambos
sentidos a partir de un único punto de inicio de la replicación, hasta que el ADN está
duplicado por completo. En eucariotas la replicación comienza en varios puntos. Se
denomina replicón a cada fragmento de ADN que se replica a partir de un único punto de
origen. La síntesis avanza hasta que los replicones se unen y todo el ADN está replicado.

- Es semidiscontinua: En una cadena, la conductora, se sintetizan fragmentos grandes de

forma continua, en la retardada la síntesis es discontinua, se sintetizan pequeños
fragmentos de forma separada y después se unen, estos son los fragmentos de Okazaki. Se
debe a que las cadenas son antiparalelas y a que la síntesis siempre es en sentido 5’->3’. Al
avanzar la horquilla la síntesis ocurre en sentidos opuestos en ambas cadenas y solo una de
ellas sirve de molde para la síntesis continua, en la otra se necesitan muchos puntos de
iniciación y esto da lugar a la síntesis de pequeños fragmentos formados por 50 nucle de
ARN y unos 1000 o 2000 de AND.

La iniciación de la síntesis de cada fragmento necesita un extremo hidroxilo libre,

proporcionado por un ARN cebador, que es sintetizado por la ARN polimerasa. Después la
ADN polimerasa sintetiza el fragmento de ADN y por último se elimina el fragmento de ARN,
se sintetiza ADN en su lugar y mediante una ligasa se unen todos los fragmentos.

3. ENZIMAS DE LA REPLICACIÓN.
1. Helicasas: desenrollan las hélices de ADN rompiendo los puentes de hidrógeno entre las
dos cadenas complementarias y las separan para que sirvan de molde.

2. Topoisomerasas: Elimina las tensiones generadas en la doble hélice por el

desenrollamiento producid por la helicasa, cortando una cadena del ADN (topo I), o las dos
(topo II). Una vez eliminadas las tensiones las unen de nuevo.
3. Proteínas SSB: Se unen a las cadenas sencillas en sitios en los que se ha desenrollado la
hélice mole, que no ha sido duplicada, estabilizando mientras dura la replicación. Impiden
que se enrolle el ADN dejando el molde listo para ser copiado.

4. ARN polimerasas dependientes del ADN: Sintetiza el ARN cebador usando como molde
una cadena de ADN.

5. ADN polimerasas: Catalizan la formación de enlaces ffde entre nucleótidos.

6. Nucleasas: Van separando nucleótidos de uno en uno empezando por el extremo 3’ libre
(exonucleasa 3’->5’) o por el 5’ (exonucleasa 5’->3’). Rompen una de las hélices y dan lugar al
origen de replicación (crean un ADN primer), escinden los ARN cebadores, y reparan lesiones
del ADN.

7. Ligasas: Unen los fragmentos de ADN adyacentes con enlaces ffde, así pj sellan el hueco
entre los fragmentos de Okazaki.

Las ADN polimerasas catalizan la formación de los enlaces ffde entre los nucleótidos y van
añadiendo uno complementario al de la cadena molde. Utilizan dNTP que aporta energía
para la reacción además de desprender pirofosfato inorgánico.
Estas requieren:
-Un ADN molde que es complementario de la nueva cadena.
-Un segmento polinucleótido 3’ libre (ARN cebador) al que se van a añadir dN.

Unen el nucleótido correcto gracias a la geometría de su centro activo y de los nucleótidos.

Si no es correcto la catálisis se hace más lenta.
Después de añadir un nucleótido la polimerasa o se disocia o se traslada a lo largo del
molde y coloca otro nucleótido, así sin disociarse el proceso es más rápido. El nº medio de
nucleótidos que añade antes de disociarse define su procesividad.

En procariotas son 5:
- AND polimerasa I: Escinde el ARN cebador y rellena el hueco con dNTP, repara errores de
la síntesis de ADN.
- ADN poli II: Repara roturas en una cadena de ADN.
- ADN poli III: Es la principal de la replicación en procariotas. Polimeriza el ADN.
- ADN poli IV y V: Intervienen en la reparación de errores.

En eucariotas hay otras 5, unas sintetizan la cadena conductora y otras la retardada.

- ADN polimerasa α: Es la polimerasa iniciadora, participa en la replicación, del ADN nuclear.
Sintetiza la cadena retardada. Sintetiza los cebadores y empieza a elongar las dos cadenas.

- ADN poli 𝛽: Función reparadora en el núcleo, une los fragmentos de Okazaki.

- ADN poli 𝛾: Replicación del ADN mitocondrial.

- ADN poli 𝛿: Sintetiza la cadena conductora, es la enzima principal de la replicación del ADN
nuclear. Continúa la síntesis.
- ADN poli 𝜀: Polimeriza los fragmentos de Okazaki.

4.MECANISMO DE LA REPLICACIÓN, INICIO, ELONGACIÓN Y TERMINACIÓN.

Con la replicación se obtienen dos nuevas dobles hélices a partir de una doble hélice de ADN
parental. Cada una de las nuevas está formada por una cadena hija y otra parental. Así con
esta síntesis semiconservativa obtenemos dos dobles hélices nuevas idénticas entre sí e
iguales a la parental y la info genética se mantiene invariable. Este mecanismo, en el
cromosoma de la E.coli se conoce bien y tiene tres etapas.

1) INICIO: La replicación comienza en un · del ADN donde abundan secuencias de GATC

(origen de la replicación), donde se separan las dos cadenas de ADN por la acción de las
helicasas, las topoisomerasas y las SSB. Como el proceso es bidireccional hay una helicasa
actuando en un sentido y otra en el opuesto, formandose una burbuja de replicación, en la
que hay dos horquillas de replicación, donde se sintetizan las nuevas cadenas de ADN.

2) ELONGACIÓN (fdlncdADN): La síntesis de los nuevos fragmentos comienza con la síntesis

por la enzima primasa de un pequeño fragmento de ARN cebador, complementario del
fragmento de ADN correspondiente. La ADN polimerasa III reconoce los nucleótidos de la
cadena molde y los empareja con dNTP libres, según la complementariedad de las bases.
Por cada cadena de ADN molde se mueve una ADN polimerasa III. En la síntesis de cada
fragmento de Okazaki intervienen la primasa y la ADN polimerasa III. Las ligasas unen los
fragmentos de ADN que estaban libres.

3) TERMINACIÓN: Seda condo las dos horquillas del cromosoma circular de E.coli se
encuentran y se han formado dos cromosomas circulares completos y están ligados.

5. CORRECCIONES DE ERRORES.

La replicación se da con alto grado de fidelidad, gracias a mecanismos de corrección de

errores. Aún así se siguen dando las mutaciones que son importantes para la variabilidad
genética y por consiguiente para la evolución.

El ADN conserva la info genética a través de muchas divisiones gracias a tres procesos.

- Selección de nucleótidos realizada por la ADN poli III, que se basa en la estabilidad del
complejo formado por la ADN poli III, el ADN molde y el dNTP. La estabilidad es máxima si
el dNTP es complementario de la cadena molde. Previene.

- Corrección de pruebas que realiza la ADN poli I, con su acción exonucleasa, tiende a
eliminar cualquier dNTP recién añadido, así si hay emparejado un nucleótido incorrecto no
se añade el siguiente y la exonucleasa puede retirarlo, después la ADN poli III busca la
pareja adecuada. Previene.

- Reparación de apareamientos incorrectos: Las enzimas deben reconocer, eliminar y

sustituir el nucleótido mal emparejado por el correcto. El problema es cómo distinguir la
cadena molde de la nueva y el nucleótido correcto del erróneo. En los procariotas algunos
nucleótidos se metilan tras la síntesis de ADN,pero hay un intervalo en el que aún no se ha
añadido el grupo -CH3, en este intervalo la cadena nieva y la vieja se diferencian en el
grados de metilación. En eucariotas los nucleótidos no se metilan y no está claro cómo se
diferencian las cadenas. Corrige.

6. DIFERENCIAS ENTRE LA R EN EUCARIOTAS Y EN PROCARIOTAS.

- En los cromosomas de los eucariotas, el ADN está asociado a histonas, formando

nucleosomas. Esto dificulta la procesividad de las ADN polimerasas y requiere que la
replicación esté coordinada con la síntesis de histonas.

- La cantidad de ADN en las eucariotas es mayor que en los procariotas, así en las
eucariotas hay varios puntos de origen, y por lo tanto hay muchas unidades de replicación,
replicones cada uno con un punto de origen y dos de terminación, mientras que en las
procariotas hay solo uno.

- Los fragmentos de Okazaki son de mayor tamaño en las procariotas y más cortos en las
eucariotas.

- En las procariotas hay 5 tipos de ADN poli (I, II, III, IV, V), en estas el mismo tipo de ADN
poli sintetiza las dos cadenas. En las eucariotas hay otros 5 tipos ( α, ꞵ, ℽ, ẟ, 𝜀), que realizan
la elongación, la corrección de errores y la ℽ interviene en la replicación del ADN
mitocondrial, la cadena retardada es sintetizada por la α y la conductora por la ẟ.

- La replicación de los telómeros no puede completarse en las eucariotas, ya que al eliminar

el último ARN cebador de la cadena retardada, la ADN poli no puede rellenar el hueco por
que no puede sintetizar en sentido 3’->5’, así el telómero se va acortando a medida que las
células se dividen (envejecimiento y muerte celular). En las células que se dividen
continuamente existe la telomerasa que impide el acortamiento de los telómeros. En las
procariotas el ADN es circular, no hay telómeros y no se da el envejecimiento celular.