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D N

L A
D E
Ó N
CI
C A
LI
U P
D
PROCESO DE DUPLICACIÓN
Todas las células del cuerpo de un organismo,
originadas por divisiones sucesivas de una única
célula progenitora, poseen igual cantidad de
ADN, con idéntica secuencia de nucleótidos.
Por lo que se deduce que la información
contenida en el ADN se trasmite de generación a
generación sin modificación, gracias al proceso
de duplicación o replicación.
En el proceso de duplicación las dos hebras de
polinucleótidos de una molécula de ADN se separan y
sirven de molde o guía para la síntesis de una nueva hebra
polinucleotídica complementaria. Se forman así dos nuevas
moléculas de ADN (2 dobles hélices) idénticas a la
original.
En este proceso se elabora solo una cadena de
polinucleótidos y se retiene la mitad recibida de la
molécula progenitora. Por lo tanto el proceso de duplicación
es SEMICONSERVADOR. Una de las hebras de cada una
de las moléculas de ADN recién sintetizadas es de la
molécula original.
En la célula eucariota, la duplicación empieza
simultáneamente en todos los cromosomas y en muchos
puntos de la molécula de ADN y de cada cromosoma. Como
resultado se producen al mismo tiempo, en múltiples sitios
de la doble hélice “bubones” o “burbujas” (replicones), que
corresponden a lugares donde se esta produciendo la
separación de la doble hebra para realizar la síntesis. La
replicación es BIDIRECCIONAL, es decir se inicia hacia
ambos sentidos
PROTEÍNAS QUE INTERVIENEN EN LA
DUPLICACIÓN
1. Separación de las dos Cadenas:
Participa la Helicasa ( enzima de desenrrollamiento), que
cataliza la separación de las cadenas. El desenrrollamiento de
la doble hebra crea tensiones por torsión excesiva en otros
lugares de la molécula. Esto se evita produciendo cortes o
ruptura transitorios (corte de una hebra, rotación y reparación)
a distinto niveles de una de las cadenas. Esto es llevado a cabo
por otra enzima denominadas Topoisomerasas.
A medida que que la hebra se separan se unen a ellas Proteínas
estabilizadoras del ADN monocatenario.
ADN polimerasa: Es responsable de catalizar la síntesis de la
nueva cadena, que se hace por ensamble de
desorribonucleótidos.(ver siguiente diapositiva).

Primasa: Es una ARN polimerasa encargada de catalizar la


síntesis de un trozo de ARN que actúa como primer cebador.
Esta síntesis se realiza tomando como molde una porción de
ADN.

ADN ligasa: Une los extremos adyacentes de dos trozos


contiguos de monocadena de ADN

Se denomina REPLISOMA a todas las proteínas comprometidas


en la duplicación del ADN.
Las características de la ADN polimerasa, son las siguientes:
1) Esta proteína requiere la presencia de una cadena de ADN simple que ella copia
según la regla de complementariedad clásica.
2) Requiere la presencia de una fragmento (de ADN o de ARN) ya asociado a la
matriz mediante puentes de hidrógeno; este cebo presenta un extremo 3`OH
libre, nivel en el cual se inicia la replicación. Es incapaz de unir nucleótidos
libres e iniciar una nueva hebra (solo pueden elongar una hebra
preexistente:denominada cebador)
3) Tiene como sustratos exclusivos los cuatro dNTP que aportan la energía
necesaria para la reacción de enlace en forma de enlaces ricos en fosfodiésteres.
4) La enzima polimeriza una cadena de nucleótidos a partir del pedazo inicial (cebo)
únicamente en el sentido 5’ 3’, porque los nuevos nucleótidos se unen siempre
sobre el grupo3’OH libre del último nucleótido que entra; de este modo se trata
de un proceso orientado.
5) Leen la cadena molde en sentido 3’ a 5’
U

U
MECANISMO DE DUPLICACIÓN
Como la ADN polimerasa necesita una cadena preexistente, el proceso
comienza con la formación del primer o cebador por acción de la
primasa. La primasa agrega nucleótidos en el sentido 5’ a 3’ para
formar un segmento complementario del ADN molde.
Las dos cadenas de ADN original son replicadas simultáneamente,
aunque en sentido opuesto. Las dos hebras de una moléculas de ADN
son antiparalelas, marchan en dirección contraria, y la ADN
polimerasa realiza la síntesis sólo desde el extremo 5’ a 3’ de la
cadena en formación, lo cual será a su vez antiparalela y
complementaria de la hebra guía.
A partir del sitio inicial de separación de las dos cadenas, una de las
hebras tendrá la dirección 3’ a 5’ apropiada para la lectura de la ADN
polimerasa. Sobre esta cadena la síntesis de la nueva hebra prosigue
sin interrupción en la dirección del replisoma, a esta hebra se la
conoce como cadena líder o directora. La otra cadena no puede ser
sintetizada en forma continua pues la dirección de la cadena molde es
contraria a la de la ADN polimerasa, esta hebra se sintetiza en trozos.
La síntesis de trozos requiere, como para la hebra lider, la formación
previa del cebador o del primer. Estos segmentos o trozos se los
denomina Fragmentos de OKASAKI. La cadena que se sintetiza en
trozos recibe el nombre de retardada o rezagada.
Los segmentos de primer tanto de la cadena adelantada como de
la cadena retrasada, son removidos y se sintetiza ADN para
cubrir la brecha y los extremos 3’ y 5’ de los extremos
adyacentes son unidos por la acción de la ADN ligasa (gasta
ATP).
En su avance, dos sitios (horquillas) de replicación iniciadas en
distintos puntos de la molécula se aproximan uno a otro y
terminan por reunirse y se confunden con una sola.
En una célula eucariota se obtienen luego de la duplicación, por
cada cromosoma, dos hélices de ADN, cada una corresponde a
una Cromátide.
Replicación en procariota
https://www.youtube.com/watch?v=WtRA-NsERKY

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