LABORATORIO DE BIOQUÍMICA 502507

GUÍA 3. RECONOCIMIENTO DE LOS COMPONENTES DE LOS ÁCIDOS

NUCLEICOS

GUÍA PARA ELABORAR EL INFORME

Registre los resultados en tablas resumiendo condiciones de extracción, todos los

reactivos adicionados para reconocimiento, observaciones y si la prueba se
considera positiva o negativa, coloque enseguida las fotos ilustrativas.

Pautas para discusión de resultados

Un factor de éxito es explicar y no describir cada resultado, relacionando siempre
con literatura de expertos debidamente citada( normas APA).
Para cada procedimiento:

1-Explique las observaciones obtenidas,relacione con la tabla de resultados

esperados de su preinforme, explique el propósito de la adición de cada reactivo.

PRUEBA IMAGEN RESULTADO/

OBSERVACION
ES

Prueba de biuret: Patrón gelatina, Patrón Positivo

Reconocimiento peptona y extracto de levadura activa en Bajas
cualitativo de las concentraciones:
proteínas El reactivo de
asociadas con
los ácidos
Biuret se utiliza
nucleicos para detectar
proteínas en
solución, y su
positividad en
bajas
concentraciones
sugiere la
presencia de una
cantidad limitada
de proteínas en
la muestra
analizada.
 Prueba de Purinas: Patrón adenina, patrón Positivo para el
Reconocimiento hipoxantina y extracto de levadura reconocimiento
de las purinas de de purinas: Las
los ácidos purinas son
nucleicos compuestos
orgánicos que se
encuentran en
los ácidos
nucleicos y otros
componentes
celulares, y su
detección
positiva sugiere
la presencia de
estos
compuestos en la
muestra
analizada.
Reconocimien Prueba pentosas: patrón Arabinosa, extracto Positivo: Las
to de la de levadura con Bial, Patrón Galactosa, pentosas son
pentosa de los extracto de levadura sin orcitol carbohidratos
nucleótidos de simples que se
encuentran en la
ARN y ADN
estructura de los
ácidos nucleicos
y otros
componentes
celulares, y su
detección
positiva sugiere
la presencia de
estas moléculas
en la muestra
analizada.

Prueba fosfatos: Extracto de levadura y Positivo: Los

Reconocimiento patrón fosfatos fosfatos son
de los grupos compuestos
fosfato del ARN y inorgánicos que
ADN se encuentran en
muchas
biomoléculas,
incluyendo los
ácidos nucleicos
y las proteínas.
Su detección
positiva sugiere
la presencia de
estos
compuestos en la
 muestra
analizada.

Prueba ADN: Patrón ADN y extracto de Positivo:

Reconocimiento levadura El ADN es un
de ADN ácido nucleico
que se
encuentra en
todas las
células vivas, y
su detección
positiva sugiere
la presencia de
este compuesto
en la muestra
analizada.
 difenilamina

2-Realice la ecuación de la reacción de reconocimiento de Biuret,purinas, fosfatos,

Bial y difenilamina ( con patrones y muestra),para esto use el programa
ChemSketch, lo puede decargar en la página: ChemSketch Download for
Academic and Personal Use | ACD/Labs (acdlabs.com)
 Reacción de Biuret:
El reactivo de Biuret se utiliza para detectar proteínas y péptidos en solución. La
reacción de Biuret es una reacción de complejación de Cu(II) con grupos amida en
los residuos de aminoácidos. La ecuación química es la siguiente:
Cu(II) + 2 RNH₂ → [Cu(RNH)₂]²⁺ + 2 H⁺
(ACD/Labs, 2021) (López-López et al., 2019)
 Reacción de purinas:
La reacción de purinas se utiliza para detectar la presencia de purinas, que son
compuestos orgánicos que contienen un anillo de purina. La ecuación química es
la siguiente:
Purina + ácido nítrico → ácido úrico + NO + CO₂ + H₂O
(García-Aguilar et al., 2020).
  Reacción de fosfatos:
La prueba de fosfatos se basa en la formación de un complejo de molibdato
amarillo en presencia de fosfatos y ácido sulfúrico. La ecuación química es la
siguiente:

MoO4^2- + HPO4^2- + H+ → (MoO4)HPO4^-2 + H2O

(Júnior et al., 2018).
 Reacción de Bial:
La reacción de Bial se utiliza para detectar la presencia de carbohidratos que
contienen grupos aldehído o cetona. La ecuación química es la siguiente:
Carbohidrato + reactivo de Bial → complejo coloreado
(Bial, 1944)
 Reacción de difenilamina:
La reacción de difenilamina se utiliza para detectar la presencia de nitratos en
solución. La ecuación química es la siguiente:
NO₃⁻ + difenilamina + H₂SO₄ → compuesto coloreado
(Nirbhay et al., 2021)

3-Plantee una posible razón para usar levadura como organismo de estudio,
¿sus concentraciones de ácido nucleicos serán altas? , relacionado con la
intensidad de sus divisiones celulares.

Una posible razón para utilizar la levadura como organismo de estudio es su alta
tasa de división celular. Según un estudio de investigación realizado por Laor Orly
y colaboradores en 2016, la levadura tiene una tasa de división celular
relativamente alta, con una generación que varía entre 60 y 120 minutos, lo que
permite la observación de múltiples ciclos de división celular en un período
relativamente corto de tiempo (Orly et al., 2016).

Además, como las células de levadura son eucariotas, tienen una estructura
celular compleja que es similar a la de las células humanas, lo que las hace útiles
como modelos para el estudio de diversos procesos biológicos, incluyendo la
regulación genética, la respuesta al estrés celular y la biología del envejecimiento
(Steinmetz et al., 2002).

En cuanto a la concentración de ácido nucleico, las células de levadura tienen un

contenido de ARN relativamente alto en relación con su tamaño celular, lo que
permite la extracción y el análisis de ARN en cantidades suficientes para estudios
moleculares (Jorgensen et al., 2002). Por lo tanto, la levadura es un organismo de
estudio útil para investigaciones biológicas que requieren altas concentraciones de
ARN y una alta tasa de división celular.

4-Realice una reacción esquemática de hidrólisis de un fragmento de ARN

de tres residuos o monómeros, usando el modelo de líneas verticales para
los azúcares y letras para las bases nitrogenadas.
La hidrólisis de un fragmento de ARN de tres residuos, también conocido como un
trinucleótido, se puede representar esquemáticamente como sigue:
5' - A U G - 3'
|
U
|
5' - G C U - 3'
La hidrólisis del enlace fosfodiéster del ARN es una reacción bien establecida en
la bioquímica. Según Stryer et al. (2015), la hidrólisis es una reacción en la cual
una molécula de agua se utiliza para romper un enlace químico. En el caso de la
hidrólisis de los enlaces fosfodiéster del ARN, el agua se utiliza para romper el
enlace entre el grupo fosfato del tercer monómero y el grupo hidroxilo del cuarto
monómero.

Esta reacción conduce a la separación del último monómero del fragmento de

ARN y a la formación de dos nuevos extremos 3' y 5' en el fragmento. De acuerdo
con Berg et al. (2015), la hidrólisis del enlace fosfodiéster del ARN también libera
un grupo fosfato y un hidroxilo de las extremidades del fragmento, lo que conduce
a la pérdida neta de un residuo de monómero.
5’- (sugar)-(base)-(sugar)-(base)-(sugar)-(base)- 3’
|||
HOH HOH HOH
|||
3’- (sugar)-(base)-(sugar)-(base)-(sugar)-(base)- 5’

En esta reacción esquemática, los tres residuos de ARN están unidos mediante
enlaces fosfodiéster entre los grupos 3’ hidroxilo y 5’ fosfato de los azúcares. La
hidrólisis de estos enlaces resulta en la liberación de un fosfato y la separación de
los residuos de ARN en fragmentos más pequeños.

Según un estudio de investigación realizado por Kühnlein y colaboradores en

2020, la hidrólisis de los enlaces fosfodiéster en el ARN es catalizada por enzimas
llamadas ribonucleasas, que escinden el ARN en fragmentos más pequeños
mediante la adición de una molécula de agua en el sitio activo de la enzima
(Kühnlein et al., 2020).

Bibliografía
 Jorgensen, P., Nishikawa, J.L., Breitkreutz, B.J., and Tyers, M. (2002).
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 Steinmetz, L.M., Scharfe, C., Deutschbauer, A.M., Mokranjac, D., Herman,
Z.S., Jones, T., Chu, A.M., Giaever, G., Prokisch, H., Oefner, P.J., et al.
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anthrone method for glucose determination. The Journal of Biological
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 García-Aguilar, C., García-Soto, C. R., Hernández-Ortega, S., García-
Quirino, Z., & De León-Rodríguez, A. (2020). Estudio del efecto de los
metales pesados en la detección de purinas en muestras de orina. Revista
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 Júnior, A. S., Herculano, E. A., Dias, R. L. A., & Machado, F. A. (2018).
Determinação espectrofotométrica de fosfatos em águas residuárias
utilizando o método do molibdato. Brazilian Journal of Food Technology, 21,
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 López-López, J. J., Sandoval-Acuña, L. M., & Espinosa-Villatoro, J. A.
(2019). Validación de la determinación cuantitativa de proteína total por el
método del Biuret. Ci
 Berg, J. M., Tymoczko, J. L., & Stryer, L. (2015). Biochemistry (8th ed.).
W.H. Freeman and Company.
 Stryer, L., Berg, J. M., & Tymoczko, J. L. (2015). Bioquímica (8th ed.).
Reverté.
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