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Palabras claves: ADN, cebolla, ácidos nucleicos, ● Extraer y purificar el ADN de células vegetales.
pruebas, bases nitrogenadas, pentosas, grupos fosfato, ● Observar la estructura fibrilar del ADN.
● Identificar la presencia de pentosas (ribosa.
ABSTRACT: In this laboratory practice, the extraction Desoxirribosa) mediante el reactivo de Bial.
and identification of onion DNA was carried out, which ● Identificar la presencia de grupo fosfato
allowed us to observe the composition of this nucleic mediante prueba específica para este grupo.
acid, identifying the presence of its nitrogenous bases,
pentoses and phosphate groups. This was done through
a series of specific tests for each group (nitrogenous 3. CONSULTA PREVIA
bases, pentoses and phosphate groups). Some of the
reagents and materials used were: funnel, a 100 ml
cylinder, pipettes, diphenylamine, ascorbic acid, Los Ácidos Nucleicos son las biomoléculas portadoras
molybdic acid and Bial reagent. de la información genética. Son biopolímeros, de
elevado peso molecular, formados por otras
Keywords: DNA, onion, nucleic acids, tests, subunidades estructurales o monómeros, denominados
nucleótidos.
nitrogenous bases, pentoses, phosphate groups,
Desde el punto de vista químico, los ácidos nucleicos
1. INTRODUCCIÓN son macromoléculas formadas por polímeros lineales de
nucleótidos, unidos por enlaces éster de fosfato, sin
periodicidad aparente.
Los ácidos nucleicos son esenciales para la vida porque son
las biomoléculas portadoras del material genético, su estructura
es polimérica, lineal y sus monómeros son los nucleótidos. Los De acuerdo a la composición química, los ácidos
nucleótidos están formados por la unión de un grupo fosfato al nucleicos se clasifican en Ácidos desoxirribonucleicos
carbono 5 de una pentosa. Hay dos ácidos nucleicos que son el (ADN) que se encuentran residiendo en el núcleo celular
ADN y el ARN. El ADN se encarga de transmitir la información y algunos organelos, y en Ácidos ribonucleicos (ARN)
genética (características morfológicas, bioquímicas y que actúan en el citoplasma.
fisiológicas de las células). El ARN por su parte se encarga de
la síntesis de proteínas para que la proteína pueda entender
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4. FUNDAMENTO TEÓRICO
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4. METODOLOGÍA
5. MATERIALES
Pipetas de 5 ml EDTA
(2), 1 ml (2), 2
ml (1), 10 ml (1)
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6. PROCEDIMIENTOS.
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Figura N°12. Precipitado blanco resultante de la mezcla Figura N°14. Tubos A y B al baño maría
entre el filtrado y etanol
6.3. Identificación de fosfatos
Después de realizar todo lo que se mencionó Para esta prueba se vuelve a filtrar 4 ml de filtrado y se
anteriormente se procedió a tomar dos tubos de ensayo. le añade 8 ml de etanol al 95% para usar el precipitado
En el tubo A se añadió 1 ml de agua destilada y 2 ml de resultante. Primero, se tomaron 2 tubos de ensayo. Al
Difenilamina. En el tubo B se añadió 1 ml del precipitado tubo A se le adiciono 0,1 ml de agua destilada, 0,5 de
y 2 ml de Difenilamina. Luego, ambos tubos de ensayo ácido molíbdico y 0,5 de ácido ascórbico. Al tubo B se le
se llevaron al baño maría por 10 minutos para después agregó 0,1 ml del precipitado, 0,5 ml de ácido molíbdico
comparar y analizar el resultado obtenido y 0,5 de ácido ascórbico, se mezclaron
correspondientemente por 15 minutos hasta que
apareció una coloración azul-verdosa
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7. RESULTADOS
Resultado expectante:
Resultado expectante :
Figura N°17. Coloración verde por la presencia de
pentosas
Resultado expectante :
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8. ANÁLISIS
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haber ocurrido porque faltaron fibras de ADN o porque al celulares que degradan la molécula del ADN como las
momento de su purificación se mezclaron partículas de nucleasas o porque entraron a los tubos de ensayo
otros componentes celulares como enzimas que partículas externas que estropearon la reacción.
degradan las moléculas del ácido desoxirribonucleico
(nucleasa, proteinasa K y otras) Diferencia de viscosidades de los tubos con
precipitado+agua
8.2 Identificación de pentosas
● ¿Cuál es la función de los componentes de la
La identificación de pentosas se llevó a cabo usando el solución de lisis?
reactivo de bial que está compuesto por orcinol, ácido
clorhídrico y cloruro férrico. Las pentosas del ADN y En el proceso de lisis celular las interacciones que
ARN se pueden ver gracias al orcinol. El ácido sulfúrico conforman la pared, la membrana celular y nuclear se
hidroliza las uniones fosfodiéster y N-glicosídicas, modifican o destruyen lo que permite la liberación de los
liberando ribosa, bases púricas, pirimidínicas y ácido ácidos nucleicos. Los componentes de la solución de
fosfórico. lisis son usualmente soluciones básicas, detergentes o
agentes caotrópicos que permiten la disolución de la
membrana celular y sus inhibidores para desactivar las
La pentosa en medio ácido se deshidrata originando
enzimas que degradan las moléculas del ADN. Además,
furfural que reacciona con el orcinol dando un producto
muchas otras soluciones de lisis pueden contener EDTA
verde que demuestra la presencia de DNA y RNA.
(ácido etilendiaminotetraacético), agente quelante que
atrapa los iones de Mg2+ de las enzimas DNAasas
usados para la degradación del ADN con el fin de evitar
que ocurra.
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9. CONCLUSIONES Cita
11. REFERENCIAS
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