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Banda C, Bertel E, Flórez D, Franco M, Osorio L, Palomo V, Watts Á. (2023)
una fruta madura, en este caso, un resultados, luego se compararon con los
mango, y se añadió al segundo tubo de resultados del primer tubo.
ensayo que previamente había sido 4. Colesterol: En una gradilla, se dispuso un
tratado con 5 ml de reactivo de Benedict. tubo de ensayo. En un vaso precipitado,
Se calentó utilizando pinzas y un se diluyó una porción de la yema de
mechero de alcohol hasta que llegó a la huevo en 10 ml de cloroformo. Luego, se
ebullición, y se observaron los cambios tomó 1 ml de esta solución clorofórmica
en la muestra. utilizando una pipeta y se añadió a un
3. Proteínas: En una gradilla, se tubo de ensayo limpio y seco. A
dispusieron dos tubos de ensayo. En un continuación, se agregó 1 ml de
vaso precipitado, se preparó una solución anhídrido de acético al mismo tubo y se
utilizando la clara de huevo a la que se le añadieron de 3 a 4 gotas de ácido
añadieron 50 ml de agua. En el primer sulfúrico concentrado. La mezcla se
tubo de ensayo, se agregó 1 ml de la agitó suavemente y se observaron los
solución anterior, seguido de la adición cambios en la coloración.
de dos gotas de sulfato de cobre al 0.5% 5. Monosacáridos: Se dispusieron 7 tubos
y 1 ml de hidróxido de sodio, creando así de ensayo en una gradilla. En el primer
el reactivo de Biuret. Se procedió a tubo de ensayo, que estaba limpio y seco,
observar cualquier cambio en la muestra. se colocó un embudo pequeño con un
En el segundo tubo de ensayo, se papel filtro. Se procedió a masticar un
añadieron 2 ml de una solución acuosa de trozo de parafina, en la boca con suero
gelatina sin sabor y se repitió el mismo fisiológico para aumentar la producción
proceso, observando los cambios en esta de saliva. Luego, la saliva generada se
muestra. En otro juego de tubos de vertió sobre el embudo, recogiéndose la
ensayo, nuevamente en una gradilla, se saliva filtrada en el tubo. En una serie de
realizaron dos pruebas adicionales. En el 5 a 10 tubos de ensayo, se añadieron dos
primer tubo de ensayo, se añadieron 3 ml gotas de Lugol en cada uno de ellos.
de agua y una pequeña cantidad de sudan Posteriormente, en el séptimo tubo se
III, y se observaron los cambios después colocaron 10 ml de suspensión acuosa de
de agitar la mezcla. Posteriormente, en el almidón, al cual se le añadió 1 ml de
mismo tubo de ensayo, se adicionó 1 ml saliva utilizando una pipeta y se agitó.
de aceite vegetal con una pipeta, se agitó Cada 20 segundos, se agregó 1 ml a cada
nuevamente y se dejó reposar durante uno de los tubos de la serie previa de 5 a
unos minutos para observar posibles 10, hasta que se observó un cambio en la
cambios. En el segundo tubo de ensayo, coloración. La coloración se observó a lo
se colocaron 2 ml de grasa animal, en largo de la serie y, además, se calentó
este caso, cuero de pollo, al que se añadió otra muestra de saliva hasta que llegó a
una pequeña cantidad de sudan III. Si la ebullición, repitiendo el proceso al
grasa se encontraba en estado sólido, se aplicar 1 ml de la solución caliente para
calentó ligeramente para derretirla. Se verificar si había un cambio en la
agitó la mezcla y se observaron los coloración.
En la prueba de lípidos, al agregar una pizca de con un intervalo de 20 segundos, todos los tubos
Sudán III a 3 ml de agua y luego mezclar con 1 adquirieron una coloración amarillento verdosa
ml de aceite vegetal, la coloración se volvió rojo de manera uniforme. Sin embargo, al utilizar
carmín, lo que señaló la presencia de lípidos en saliva calentada en el mismo procedimiento, se
la muestra. En el caso de la grasa animal, obtuvo una coloración verde, lo que indicó la
específicamente cuero de pollo, al realizar la presencia de enzimas en la muestra y su
misma prueba, se obtuvo una coloración aún más actividad en la hidrólisis del almidón. Estos
intensa, lo que sugirió una concentración más resultados reflejaron la variabilidad en las
alta de lípidos en comparación con el aceite reacciones químicas y su dependencia de los
vegetal (Figura 4), componentes específicos de cada muestra
analizada en el laboratorio (Figura 6).
VII. DISCUSIÓN
Figura 4. Muestra relacionada con
determinación de lípidos (Fuente propia). Primeramente, en el caso de los monosacáridos,
en un tubo de ensayo se vierten 5ml del reactivo
En la reacción de Lieberman Burchard para el de Benedict y se calienta hasta ebullición.
colesterol, al mezclar 1 ml de yema de huevo Luego, se añadió al mismo tubo de ensayo 1ml
diluida en cloroformo con 1 ml de anhídrido de una solución de glucosa y se calienta hasta
ebullición nuevamente. Inicialmente, se aprecia
acético y cuatro gotas de ácido sulfúrico
un color azul verdoso, lo que nos indica la
concentrado, se observó una reacción de
presencia de 0.1 a 0.3 % de azúcar reductor. Al
burbujeo seguida de un cambio de color a verde,
cabo de unos segundos, se evidencia un color
lo que confirmó la presencia de colesterol en la rojo ladrillo, que nos da como señal, que más de
muestra. 1.5 % de concentración de azúcar, o presencia de
monosacáridos, también conocido como
Finalmente, en el experimento de las enzimas, se
azúcares simples, presente en glucosa.
utilizaron cinco tubos de ensayo con dos gotas
de lugol cada uno. Al agregar 1 ml de suspensión Para las proteínas, La técnica usada se basa en la
acuosa de almidón y 1 ml de saliva a cada tubo formación de un complejo de color violeta al
combinar sulfato de cobre al 0.5% e hidróxido
de sodio al 10% con la muestra de clara de huevo involucró la manipulación de diversas sustancias
diluida en suero fisiológico. La reacción química y la observación de los resultados. En primer
que tuvo lugar en el tubo de ensayo es crucial lugar, se colocaron 3 ml de agua en un tubo de
para entender los resultados. Inicialmente, la ensayo y agregó una pizca del reactivo Sudan III.
solución de clara de huevo diluida es Luego, agitamos el tubo para mezclar los
transparente y no presenta ningún cambio visual productos y en la observación se pudo evidenciar
notable. Sin embargo, cuando se añaden dos que cuando se agitó el Sudán en el agua se pudo
gotas de sulfato de cobre al 0.5% y 1 ml de observar que una parte de este se dispersó y otra
hidróxido de sodio al 10%, la solución parte quedó en la superficie del agua y por más
experimenta un cambio drástico. que se agitaba esta no se disolvía
completamente. Esta parte del procedimiento se
Este cambio se manifiesta como un intenso color
realizó sin complicaciones notables. En la
violeta que impregna la solución. Este fenómeno
segunda parte, se añadió 1 ml de aceite vegetal,
es el resultado de la interacción entre el sulfato
se agitó y se dejó la muestra en reposo durante
de cobre y las proteínas presentes en la clara de
unos minutos. Después de ese tiempo,
huevo. Las proteínas, debido a su estructura
observamos la muestra y se pudo evidenciar que
química única, reaccionan con el sulfato de
al mezclar el agua destilada con el sudan se
cobre y el hidróxido de sodio, generando este
formó una mezcla heterogénea. En la cual se
complejo de color violeta. Esta reacción se
podían notar ambos compuestos. Esta etapa
conoce como la reacción de Biuret y es una
también se llevó a cabo de manera efectiva y sin
prueba comúnmente empleada para detectar la
inconvenientes.
presencia de proteínas en soluciones. Es
importante destacar que esta reacción es Sin embargo, encontramos una complicación en
específica para las proteínas y no se produce con la siguiente parte del procedimiento cuando
otros componentes presentes en la clara de tuvimos que introducir la grasa animal en otro
huevo. Por lo tanto, podemos concluir con tubo de ensayo y agregar una pizca de Sudan III.
confianza que la clara de huevo contiene La grasa animal se tuvo que extraer directamente
proteínas, ya que la clara de huevo presenta por del cerdo, calentándolo para así derretirlo y
lo menos dos o más enlaces peptídicos, en la cual extraer lo necesario. Por lo que fue un proceso
se puede observar un color violeta bastante más demorado y sólo se obtuvo un poco de esta.
intenso, es decir, es una prueba positiva para su A pesar, del proceso tardío, se pudo proseguir
presencia. adecuadamente y se introdujo el producto en el
tubo de ensayo. A pesar de esta complicación
Este resultado concuerda con el conocimiento
inicial, se logró solventarla y se tuvieron
previo, ya que la clara de huevo es conocida por
resultados satisfactorios en los cuales se
ser una fuente rica en proteínas, La riqueza
pudieron observar cómo los compuestos se
proteica del huevo es alta (6,4 g por huevo) y sus
encontraban mezclados sin unirse
proteínas tienen gran calidad nutritiva y este
completamente y se podían diferenciar.
experimento proporciona una confirmación
visual de esta característica. Además, la En cuanto a la determinación del colesterol se
simplicidad y la rapidez de la reacción de Biuret utilizó un procedimiento que implicaba la
la convierten en una técnica valiosa para la formación de un color verde esmeralda en
detección de proteínas en diversos contextos de presencia de colesterol. Sin embargo, en el
laboratorio y análisis bioquímicos. laboratorio, el resultado fue un color verde
fuerte.
En el caso de los lípidos, se llevó a cabo el
procedimiento experimental en el cual se
Finalmente, en las enzimas se observó que un métodos y reactivos que permitieron identificar
aumento excesivo de temperatura la presencia o ausencia de estos componentes
desnaturalizaba las enzimas, pero los cambios no esenciales en la materia viva. Cada uno de los
fueron notorios en los resultados, lo que podría procedimientos demostró ser una herramienta
deberse a variaciones en los procedimientos y valiosa para la identificación cualitativa de estos
materiales utilizados. Al comienzo de la compuestos, contribuyendo así a una
práctica, se realizó la recolección de 10 ml de comprensión más profunda de la composición
saliva sin ningún inconveniente. Luego, se
química de los seres vivos. Este tipo de análisis
procedió a preparar una solución que consistía
es fundamental, ya que nos ayuda a entender
en mezclar 10 ml de una sustancia acuosa de
mejor la naturaleza de la vida y cómo se
almidón con 2 ml de saliva, agitando la mezcla.
Posteriormente, se transfirieron 2 ml de esta componen los organismos vivos. El
mezcla a cada uno de los 5 tubos de ensayo conocimiento de la presencia de estos
previamente preparados con dos gotas de componentes y las reacciones químicas
solución de Lugol. Tras esperar un minuto, se involucradas es esencial para avanzar en la
observó una disminución en la intensidad de la investigación y comprender los procesos
coloración en todos los tubos de ensayo de biológicos y metabólicos que ocurren en los
manera consistente. En la segunda parte del organismos vivos.
experimento, se repitió el proceso anterior, pero
esta vez se calentó la mezcla de saliva y solución IX. CUESTIONARIO
de almidón. Durante el calentamiento, se notó la 1. ¿Qué es un azúcar reductor?
formación de una zona negra en la parte inferior
del tubo de ensayo, sin embargo, se continuó con R// Los azúcares reductores son aquellos que
el procedimiento. La mezcla caliente se agregó a poseen su grupo carbonilo (grupo funcional)
los mismos 5 tubos que contenían las dos gotas intacto entre estos tenemos glucosa, lactosa,
de Lugol. Sin embargo, en esta ocasión, después fructosa, maltosa, galactosa, manosa, y que a
de esperar un minuto, no se observó una través del mismo pueden reaccionar con otras
disminución en la intensidad de la coloración en moléculas; los azúcares no reductores al
ninguno de los tubos, a diferencia de la primera contrario no poseen su grupo carbonilo libre y
prueba. entre estos tenemos sacarosa, trehalosa. La
intolerancia a estos azúcares produce diarrea por
VIII. CONCLUSIÓN
la presencia de hidratos de carbono no
En esta práctica de laboratorio tenía como absorbidos en la luz intestinal, que aumenta la
objetivos específicos la determinación osmolaridad dentro del intestino. Los azucares
cualitativa de la presencia de carbohidratos, reductores tiene importancia clínica para
lípidos, proteínas, enzimas y ácidos nucleicos en detectar deficiencia de enzimas intestinales
muestras de materia viva, así como el como la lactosa debido a una deficiencia
reconocimiento de la composición química de congénita o daños inespecíficos a la mucosa.
los reactivos utilizados en la identificación de
2. Cite ejemplos de azucares reductores y
estos compuestos protoplasmáticos. Además, se
no reductores
buscaba investigar las reacciones que se
producen en el proceso de identificación de
dichos compuestos. A lo largo de las
experimentaciones, se utilizaron diferentes
Sulfato de Cobre (II): Este compuesto es el R// El fundamento de esta reacción radica en
reactivo principal en la solución de Benedict. que, en un medio alcalino, el ion cúprico
(otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de
El sulfato de cobre (II) es de color azul y se
reducirse por efecto del grupo aldehído del
reduce a óxido de cobre (I) de color rojo cuando
azúcar (-CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo
reacciona con azúcares reductores.
ion se observa como un precipitado rojo ladrillo
Carbonato de Sodio: El carbonato de sodio se correspondiente al óxido cuproso (Cu2O),
añade al reactivo de Benedict para mantener un también Cuando se añade el reactivo de Benedict
medio alcalino, lo que facilita la reacción con los al azúcar reductor, y se aplica calor, el color de
azúcares reductores. la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso
mientras mayor sea la abundancia de azúcares
reductores. Un cambio a color verde indica la
presencia de menos azúcares reductores como es
Citrato de Sodio: El citrato de sodio se utiliza rojo es mayor.
para estabilizar la solución y evitar la formación
de precipitados no deseados. 6. ¿Cuál es la composición química del
Lugol?
En conjunto, estos componentes permiten que el
reactivo de Benedict reaccione con los azúcares R// La solución de Lugol en concentración
reductores presentes en una muestra, dando estándar tiene la siguiente composición: 100
como resultado la formación de un precipitado mg/ml de yoduro de potasio (KI) y 50 mg/ml de
de óxido de cobre (I) de color rojo o rojo ladrillo, yodo (I 2). Variando las proporciones, es posible
lo que indica la presencia de azúcares reductores obtener soluciones de yodo de las
en la muestra. Esta reacción es ampliamente concentraciones deseadas, normalmente al 1%,
utilizada en pruebas químicas para la detección 2% o 5%.
cualitativa de azúcares reductores en alimentos y
muestras biológicas. 7. ¿A qué se debe la desaparición del color
azul violáceo de la solución de almidón
4. ¿Qué reacción se produce cuando se cuando se calienta hasta ebullición?
calienta el tubo de ensayo que contiene el
reactivo de Benedict y glucosa? R// El color azul desaparece momentáneamente
ya que, al calentarse la solución, el complejo de
R// Cuando se calienta el tubo de ensayo que Yodocon Almidón que se forma en frío se
contiene el reactivo de Benedict y glucosa, la desnaturaliza.
solución cambia de color de azul a verde,
8. ¿Por qué aparece nuevamente el color R// Es un tinte diazo del tipo lipocromo (tinte
cuando la anterior solución se enfría? soluble en grasa) usado para marcar triglicéridos
en secciones congeladas, algunos lípidos y
R// La reaparición del color azul violáceo lipoproteínas encuadernados de la proteína en
cuando la solución se enfría se debe a la secciones de la parafina. Tiene el aspecto de
reversión del proceso. A medida que la solución cristales rojizos y una absorción máxima en 507
se enfría, las cadenas de almidón vuelven a (304) nanómetros.
enrollarse en su estructura helicoidal
característica, lo que permite que el yodo forme 12. ¿Por qué es necesario incluir en el
nuevamente complejos con el almidón, experimento de ácidos nucleicos un tubo
resultando en el color azul violáceo observable. con agua?
Este fenómeno es una prueba química utilizada
para detectar la presencia de almidón en una R// Incluir un tubo con agua en el experimento
muestra. de ácidos nucleicos es necesario para establecer
un control negativo o blanco. Este tubo de agua
9. ¿En qué consiste la reacción del biuret? actúa como una referencia para determinar si los
resultados observados en los otros tubos se
R// La reacción del Biuret es una prueba para deben realmente a la presencia de ácidos
detectar proteínas en una muestra. Cuando las nucleicos y no a factores externos o
proteínas en la muestra reaccionan con una contaminantes. Al no contener ácidos nucleicos,
solución de reactivo de Biuret en un entorno el tubo de agua debería permanecer inalterado en
alcalino, forman un complejo que cambia el términos de color u otros indicadores utilizados
color de la solución de azul a violeta o violáceo, en la prueba. Cualquier cambio observado en los
indicando la presencia de proteínas. Esta prueba tubos que contienen muestras de ácidos
es comúnmente utilizada en laboratorios para nucleicos puede compararse con el control de
identificar proteínas en diversos tipos de agua para determinar si es atribuible a la
muestras. presencia de ácidos nucleicos en las muestras o
si es el resultado de alguna otra variable en el
10. ¿En qué consiste la reacción
experimento. Esto garantiza que los resultados
xantoproteica?
sean precisos y específicos para la detección de
R// La reacción xantoprotèica es un método que ácidos nucleicos.
se puede utilizar para determinar la presencia de
13. ¿Considera que las levaduras contienen
proteínas solubles en una solución, empleando
más RNA que DNA?
ácido nítrico concentrado. La prueba da
resultado positivo en aquellas proteínas con R// Las levaduras, al igual que otros organismos,
aminoácidos portadores de grupos aromáticos, contienen tanto ácido ribonucleico (ARN o
especialmente en presencia de tirosina. Si una RNA) como ácido desoxirribonucleico (ADN o
vez realizada la prueba se neutraliza con un DNA) en sus células. Sin embargo, la proporción
álcali, se torna color amarillo oscuro. entre RNA y DNA puede variar según las
necesidades y actividades metabólicas de la
11. ¿Qué es el Sudan III?
levadura en un momento dado. En general, es
más probable que las levaduras contengan una
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Banda C, Bertel E, Flórez D, Franco M, Osorio L, Palomo V, Watts Á. (2023)
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REVOLUCIÓN EN LA FORMACIÓN Y LA
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Romero Perez, M. R. (2017). CITOPLASMA.
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Saccharomyces cerevisiae y la producción de
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DNA y RNA.
P á g i n a 12 Septiembre del 2 0 2 3