Valeria Sarahi Solis Eguiza

GENÉTICA MICROBIANA

CUESTIONARIO.

1. Defina los siguientes términos:

a. Gen: Es la unidad básica de la herencia, se trata de una secuencia lineal de nucleótidos
de ADN que está formada por cuatro tipos de bases nitrogenadas (Adenia, Guanina,
Citosina y Timina).
Los genes están organizados en tripeltes que son tres bases nitrogenadas (codones)
que codifican para un aminoácido, poseen una región promotora y un codón de
terminación. Cada gen tiene la función de codificar para un polipétido.
Los genes a su vez se encuentran dispuestos en cromosomas dentro de un
organismo.
Es la forma en la que se organiza toda la información necesaria para precisar los
rasgos de los organismos y la vida, además cuentan con función biológica.
b. Genoma bacteriano
El genoma bacteriano es todo el conjunto de genes que tiene la bacteria, tanto en su
cromosoma como en sus elementos genéticos extracromosómicos, si existen.
Toda la información genética esencial para la vida de la célula bacteriana, está
contenida en una única molécula de ADN de doble cadena, circular y covalentemente
cerrado, a la que podemos referirnos como “cromosoma bacteriano”. Muchas
bacterias, poseen además ADN extra cromosómico, también circular cerrado,
denominado ADN plasmídico, por estar contenido en estructuras llamadas
“plásmidos”
c. Haploide
Son organismos que suelen tener solo una copia de sus cromosomas y se reproducen
de manera asexual por ejemplo las bacterias.
d. Diploide
Son organismos que suelen tener dos copias distintas de cada cromosoma y se
reproducen de manera sexual por ejemplo las eucariotas
2. Describa las diferencias entre el cromosoma bacteriano y el humano.
El genoma humano consta de 23 pares de cromosomas lineares. Dado el hecho de que
están dispuestos por pares se les considera diploides. Su cromosoma es mucho más
grande que el de las bacterias
En cambio las bacterias cuentan con un único cromosoma consistente en una molécula de
ADN doble hélice circular. Y estas son consideradas haploides.
3. Describa el proceso de replicación del ADN.
La replicación es hacer de una cadena de ADN una nueva. En la replicación, una de las
cadenas de ADN sirve de cadena molde. La nueva hebra es exactamente igual a la cadena
original.
La replicación inicia en una secuencia específica del cromosoma denominada oriC. El
proceso de replicación exige la participación de una enzima (helicasa) capaz de desenrollar
el ADN y exponerlo, otra enzima (primasa) capaz de sintetizar los cebadores que inician el
proceso y una enzima o enzimas (ADN polimerasas dependientes de ADN) que únicamente
 sintetizan una copia del ADN en presencia de una secuencia cebadora a la que añadir
nucleótidos y tan sólo trabajan en dirección 59 a 39.El ADN nuevo se sintetiza de forma
semiconservadora y utilizando como plantillas ambas cadenas del ADN de la célula
progenitora. La síntesis del nuevo ADN tiene lugar en una horquilla de crecimiento y sigue
un curso bidireccional. Mientras una de las cadenas (cadena adelantada o leading strand)
se copia de manera continua en la dirección 59-39, la otra cadena (cadena rezagada o
lagging strand) ha de sintetizarse en forma de numerosas piezas de ADN a partir de
cebadores de ARN (fragmentos de Okazaki). A medida que se expone su estructura, el
ADN de la cadena rezagada ha de extenderse en la dirección 59-39. A continuación, la
enzima ADN ligasa se encarga de unir las piezas.

4. Describa la estructura y función biológica de los diferentes tipos de genes:

a. Ostrones: son genes estructurales de tipo proteico
b. Promotores: es una secuencia de ADN necesaria para convertir un gen en activado o
desactivado. Por lo tanto es un elemento de control. esta secuencia que es
reconocida por la ARN polimerasa para comenzar la transcripción.
Generalmente se encuentran cerca del comienzo de un gen y se encuentra
inmediatamente antes de los genes estructurales. El promotor tiene un sitio de unión
para la enzima que se utiliza para hacer una molécula ARN mensajero (ARNm).
c. Operadores: se trata de otro elemento de control que es una región del ADN con una
secuencia que es reconocida por la proteína reguladora. El operador se sitúa entre la
región promotora y los genes estructurales y permite la activación/desactivación del
promotor a modo de "interruptor génico" por medio de su interacción con un
compuesto inductor.
5. Describa que es un operón y sus funciones.
Una unidad genética funcional formada por un grupo o complejo de genes capaces de
ejercer una regulación de su propia expresión por medio de los sustratos con los que
interaccionan las proteínas codificadas por sus genes. Este complejo está formado por
genes estructurales que codifican para la síntesis de proteínas (generalmente enzimas),
que participan en vías metabólicas cuya expresión generalmente está regulada por otros 2
factores de control, llamados:
* Promotor
*Operador
6. Defina que es una mutación y describa los tipos de mutaciones.
Una mutación se define como cualquier modificación de la secuencia de bases de ADN. es
un cambio hereditario en la secuencia de bases del ácido nucleico genómico del
organismo. La mayor parte de estas mutaciones tienen escaso efecto sobre las bacterias o
resultan negativas, pero algunas mutaciones pueden proporcionar una ventaja selectiva
para la supervivencia de las bacterias cuando se ven amenazadas por el entorno, el
hospedador o el tratamiento.
Las mutaciones espontáneas ocurren por consecuencia de radiación natural o durante la
replicación.
Las mutaciones puntuales son el resultado de sustitución de dos pares de bases en el ADN
o la inserción o deleción de un par de pares de bases.
 Una mutación silenciosa es una modificación del ADN que no provoca cambios en la
secuencia de aminoácidos de la proteína codificada. Este tipo de mutación se debe a que
un aminoácido puede estar codificado en más de un codón. Entonces puede haber un
cambio en un codón, pero este sigue codificando para el mismo aminoácido.
Mutaciones con sentido erróneo cuando el polipéptido formado posee características
químicas diferentes. Da la inserción de un aminoácido diferente en la proteína
Nutación conservadora cuando hay una modificación y se da la inmersión de un nuevo
aminoácido pero este posees características y propiedades semejantes
Mutaciones sin sentido Son mutaciones en las que la sustitución de un par de bases
codifica a un codón de terminación y la proteína queda incompleta.

7. Mencione los principales agentes mutantes.

Mutágenos químicos
Análogos de bases
 5-bromuracilo
 2-aminopurina
Compuestos que reaccionan con el ADN
 Acido nitroso (HNO2)
 Hidroxilamina (NH20H)
Agentes alquilantes
 Monofuncionales (etil metano sulfonato)
 Bifuncionales (gas mostaza, mitomicina, nitrosoguanidina)
 Colorantes intercalantes (acridinas, bromuto de etidio)
Mutágenos físicos
Radiación
 Ultravioleta
 Radiación ionizante
8. Describa los mecanismos de reparación del ADN.
Con el propósito de minimizar los daños al ADN, las células bacterianas han desarrollado
diversos mecanismos de reparación y se pueden dividir en cinco grupos:
1. La reparación directa del ADN consiste en la eliminación enzimática del daño (p. ej.,
dímeros de pirimidina y bases alquiladas).
2. La reparación por escisión se basa en la eliminación del segmento de ADN que contiene
las lesiones, seguida de la síntesis de una nueva hebra de ADN. Existen dos tipos de
mecanismos de reparación por escisión: generalizada y especializada.
3. La reparación posreplicación o por recombinación consiste en la recuperación de la
información que falta mediante procesos de recombinación genética cuando están
dañadas ambas hebras de ADN.
4. La llamada respuesta SOS se caracteriza por la inducción de numerosos genes
(aproximadamente 15) tras la aparición de daño al ADN, o bien por la interrupción de su
replicación.
5. La reparación propensa a error (error-prone repair) es el último recurso con que cuenta
la célula bacteriana antes de morir. Se utiliza para rellenar los espacios con una secuencia
 aleatoria cuando no se dispone de una plantilla de ADN que pueda orientar con precisión
el proceso de reparación.
9. Describa los mecanismos de transferencia genética entre bacterias:
a. Conjugación: Es un proceso de transferencia genética que requiere contacto célula a
célula. (Donador macho con receptor hembra) a través del llamado pilus sexual.El
elemento transformante es un plásmido y pasa una copia de si mismo a otra célula.
b. Transformación: La transformación es el proceso mediante el cual las bacterias captan
fragmentos de ADN desnudo o libre y los incorporan a sus genomas. La
transformación fue el primer mecanismo de transferencia genética que se descubrió
en las bacterias. Cuando ingresa la cadena de ADN esta es transformada a su forma
monocantenaria y estabilizada por proteínas RecA. Hace recombinacion con regiones
homólogas del cromosoma. La célula incorpora a su genoma el nuevo grupo de genes.
c. Transducción: La transferencia genética por transducción está mediada por virus
bacterianos (bacteriófagos) que captan fragmentos de ADN de una célula y los
almacenan en el interior de partículas de bacteriófago.
Después al infectar otra célula le suministran el ADN y luego se incorpora al genoma
bacteriano. La transducción puede clasificarse como especializada si los fagos en
cuestión transfieren genes específicos (habitualmente los adyacentes a sus lugares de
integración en el genoma) o generalizada si la incorporación de las secuencias es
aleatoria debido al almacenamiento accidental del ADN de la célula hospedadora en el
interior de la cápside del fago.
d. Recombinación: es la incorporación del ADN extracromosómico (extraño) Existen dos
tipos de recombinación: homóloga y no homóloga.
La recombinación homóloga (legítima) es la que tiene lugar entre secuencias de ADN
estrechamente relacionadas y habitualmente sustituye una secuencia por otra. El
proceso requiere la presencia de un conjunto de enzimas producidas por los llamados
genes rec.
La recombinación no homóloga (ilegítima) es la que tiene lugar entre secuencias
distintas de ADN y, por regla general, produce inserciones, deleciones o ambas.
Habitualmente este proceso precisa de la intervención de enzimas de recombinación
especializadas (algunas veces, incluso específicas para un sitio determinado), como las
producidas por muchos transposones y bacteriófagos lisogénicos.
10. Describa algunas de las aplicaciones de la ingeniería genética:
a. Aplicaciones médicas de la biotecnología molecular, incluyendo contribuciones y
usos para el diagnóstico.
El objeto de la ingeniería genética purificar, amplificar, modificar y expresar
secuencias genéticas específicas.
La aplicación de las técnicas utilizadas por la Ingeniería Genética ha permitido elevar la
calidad de vida del ser humano. Los organismos transgénicos han pasado a ocupar una
posición central en la biotecnología moderna, porque permiten hacer modificaciones
muy específicas del genoma.
La ingeniería genética se ha utilizado para aislar y expresar distintos genes con el
propósito de obtener proteínas útiles en bacterias, levaduras o, incluso, en células de
insecto (p. ej., insulina, interferón, hormonas del crecimiento e interleucina). De modo
similar, se pueden preparar grandes cantidades de un inmunógeno puro destinado a
una vacuna sin necesidad de emplear los microorganismos patógenos intactos. La
vacuna contra el virus de la hepatitis B constituye el primer empleo con éxito de la
tecnología de ADN para fabricar una vacuna aprobada para su empleo en humanos A
contribuido a la obtención de proteínas de interés médico y económico como
Antibióticos
Enzimas
Hormonas: insulina, hormona del crecimiento, eritropoyetina…
Vacunas
Proteínas sanguíneas: seroalbúmina, factores de coagulación
La tecnología del ADN recombinante resulta también esencial en el diagnóstico de
laboratorio, las técnicas forenses, la agricultura y muchas otras disciplinas.
La ingeniería genética es hoy una de las herramientas fundamentales para el
mejoramiento de los cultivos vegetales.
¿Describa la técnica molecular de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) y
cuáles son sus aplicaciones en la microbiología médica?
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) amplifica copias simples de ADN vírico
varios millones de veces y constituye una de las técnicas más modernas de análisis
genético. Se incuba la muestra con dos oligómeros cortos de ADN, denominados
primers, los cuales contienen unas secuencias complementarias a las de los extremos
de una secuencia genética conocida del ADN completo, una polimerasa de ADN
dotada de estabilidad térmica (Taq u otra polimerasa obtenida a partir de bacterias
termofílicas), nucleótidos y tampones. Los oligómeros se hibridan con la secuencia
apropiada de ADN y actúan como primers para la polimerasa, la cual copia ese
segmento de ADN. Posteriormente se calienta la muestra con el propósito de
desnaturalizar el ADN (separar las cadenas de la doble hélice) y se enfría para permitir
la hibridación de los primers con el nuevo ADN formado en el ciclo anterior. Cada
copia de ADN se convierte en una nueva plantilla para la síntesis de nuevas moléculas.
El proceso se repite un gran número de veces (de 20 a 40) con el fin de amplificar la
secuencia del ADN original de manera exponencial. Una secuencia diana se puede
amplificar 1.000.000 de veces en unas pocas horas con este método. Esta técnica es
especialmente útil para detectar secuencias de virus latentes e integrados, como es el
caso de los retrovirus, los virus del herpes, los virus del papiloma y otros virus de ADN.