Universidad Nacional Autónoma de Honduras

Facultad de Ciencias

Laboratorio de Genetica para biologia

BI-223

Secciones viernes 4:00 A 7:00 Pm

Cuadro Comparativo de Electroforesis

Elaborado por:

Gracia Stephania Reyes Dormes #20151004221

Sady Gabriel Ramos Arias #20201003262

Farida Alexandra Ochoa Sanchez #20191004125

Tegucigalpa M.D.C 22 Junio 2021

 Cuadro Comparativo de Electroforesis

Electroforesis en gel de Electroforesis en gel de Electroforesis de Campos Electroforesis de Electroforesis Capilar

Agarosa Poliacrilamida Pulsados Gradiente
Desnaturalizante
Aplicación empleada Su uso más extendido es Su principal uso es la La técnica se emplea Tiene en la Ecología Es una técnica analítica que
para construir geles que separación de mezclas fundamentalmente para el Microbiana su permite la separación y
permitan separar de biopolímeros tipaje de microorganismos, principal campo de cuantificación de una amplia
moléculas de ADN especialmente de ácidos por ejemplo para la aplicación ya que los gama de analitos (iones,
mediante electroforesis, nucleicos (ADN o ARN) o determinación de cepas ecólogos microbianos péptidos, proteínas,
además de ser utilizada proteínas. patógenas. adoptaron la técnica carbohidratos, esteroides,
para fijar moléculas a su En el campo de la Seguridad para el análisis de la ácidos nucleicos, vitaminas,
estructura como Alimentaria, permite llevar estructura y dinámica fármacos, células, etcétera),
anticuerpos, antígenos y a cabo la caracterización de comunidades provenientes de las diferentes
enzimas. Igualmente se genética de aislados microbianas áreas de la biotecnología, la
utiliza para el cultivo microbianos, siendo idóneo complejas. industria farmacéutica, la
celular y en microbiología. para estudios clínica, la alimentaria y la
Otros usos menos epidemiológicos de ambiental, entre otras.
extendidos son la patógenos de origen
utilización de estos geles alimentario.
como matrices en la
reparación de tejidos
dañados.
Tipo de matriz La agarosa es un producto Gel de poliacrilamida Matriz de agarosa Urea Se hace en diferentes tipos de
utilizado natural que forma una matrices.
matriz inerte y no tóxica
Funcionamiento Los geles se comportan Los ácidos nucleicos La sistemática de El primer paso Se basa en la migración
como un tamiz molecular disponen de una carga funcionamiento de la PFGE consiste en la diferencial de moléculas (ADN,
y permiten separar eléctrica negativa y consiste en alternar el extracción de ADN proteínas, iones inorgánicos,
moléculas cargadas en cuando son separados
función de su tamaño y en el gel mediante una
forma. Así, moléculas de corriente eléctrica, se
DNA de diferente tamaño dirigirán al polo positivo.
van a emigrar de forma Se cargan mediante una
distinta en una molécula llamada SDS
electroforesis en gel de (dodecilsulfato de sodio)
agarosa. Además, si en que se incorpora a las
dicha electroforesis se proteínas, adquiriendo
aplican marcadores de una carga negativa. Al
peso molecular colocar una muestra de
(fragmentos de DNA de proteínas dentro del gel
tamaño conocido) se y someterlas a una carga
puede calcular el tamaño eléctrica, éstas migrarán
aproximado del DNA en y se moverán a través
estudio. del gel hacia el polo
positivo. Las moléculas
más pequeñas se
moverán más
rápidamente y las más
grandes quedarán cerca
del lugar de partida en el
gel.
campo eléctrico entre pares
de electrodos
espacialmente distintos, lo
que propicia que moléculas
de ADN de tamaño elevado
(Mb) se reorienten y se
trasladen a diferentes
velocidades a través del gel
de agarosa.
genómico a partir de carbohidratos, etc.) sujetas a un
la muestra a analizar. campo eléctrico (de 100 a 500
En una segunda etapa V/cm) a través de un capilar de
experimental, este menos de 50 µm de diámetro.
ADN se utiliza como El interior del capilar se
molde para la encuentra formado por grupos
amplificación por PCR silanol (Si-OH), los cuales al ser
de un fragmento desprotonados (Si-O), elevan
concreto de ADN. Así, considerablemente el pH y
se obtiene una mezcla favorecen la presencia de
de fragmentos de analitos específicos. Como en
ADN representativos toda electroforesis, los cationes
de todos los alelos fluyen hacia la terminal
presentes en la negativa, mientras que los
muestra, o bien, de aniones fluyen hacia la positiva.
todas las especies de
microorganismos
presentes, cuando se
trata del análisis de
comunidades
microbianas. Todos
estos fragmentos
tienen el mismo
tamaño, pero
diferente secuencia
de nucleótidos, por lo
que serán separados
en una DGGE,
originando un patrón
de bandas
característico.
 Esquema

Importancia y tipo de  La electroforesis  La electroforesis  Esta es importante  Es importante  Esta técnica permite
muestras empleadas en geles de en geles de para el análisis del ya que obtener resultados en
agarosa es el poliacrilamida, ADN genómico y la permite un corto tiempo, una
método estándar aunque tiene Identificación de detectar alta eficiencia de
para separar y una mayor microorganismos mutaciones separación y una alta
purificar limitación en patógenos. puntuales ya sensibilidad con un
fragmentos de cuanto al que se mínimo consumo de
ADN cuando no tamaño de los  Se utiliza pueden muestra.
requerimos un fragmentos que principalmente separar
 alto poder de podemos para el ADN fragmentos  Se utiliza para poder
resolución. separar (5-600 genómico. de ADN cuyas separar aminoácidos,
pb), posee un secuencias de ácidos orgánicos, iones
 Se utiliza para poder de nucleótidos inorgánicos,
muestras grandes resolución difieren en carbohidratos,
de ADN y ARN mucho mayor, una sola base esteroides, tioles,
permitiendo la nitrogenada. contaminantes
separación de alimenticios, material
moléculas que  Se utiliza en genético y algunos
difieren en un muestras de fármacos importantes
sólo par de ADN. en el estudio de
bases. diferentes ramas en el
área de la salud
 Se utiliza como (diagnósticos
muestra las molecular y de
proteínas. laboratorio clínico).
Bibliografía
Checa Rojas, A. (15 de Septiembre de 2020). Conogasi. Obtenido de Conogasi: http://conogasi.org/articulos/metodo-gel-de-electroforesis-agarosa/

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http://www.scielo.org.co/pdf/unsc/v18n2/v18n2a08.pdf

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Magaña, J., Arenas-Sordo, M., & Gómez, R. (2009). La electroforesis capilar como una nueva estrategia en la medicina y el diagnóstico clínico. Revista
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