VALIDACIÓN DE

MEDIOS DE
CULTIVO
• Norma ISO/TS 11133-2:2000. Part I. General Guidelines on quality assurance for the preparation of culture
media in the laboratory
• Norma ISO 17025. Requisitos generales para la competencia de los laboratorios de ensayo y calibración
 “Un medio de cultivo es una
formulación de sustancias en forma
líquida, semisólida o sólida, que
contienen constituyentes naturales y/o
sintéticos destinados a facilitar la
multiplicación o a mantener la viabilidad
de los microorganismos”

Norma ISO/TS 11133-2:2000

Los medios de
cultivo por si
mismos y su uso
ya se encuentran
validados no solo
por los fabricantes
sino avalados por
la farmacopea
QUÉ DEBEMOS
VALIDAR?
PREPARACIÓN
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO
La validación se debe hacer
para cada medio de cultivo
preparado en el laboratorio.
Los medios de cultivo
comprados preparados no
requieren validación.
 OBJETIVO

Demostrar que la preparación de los medios de

cultivo es adecuada y que el almacenamiento de los
medios de cultivo preparados se permite por un
período definido de tiempo, sin que pierdan sus
características de recuperación microbiana
 ALCANCE

Se refiere a los medios o la condición sobre la cual

se va a aplicar el protocolo.

RESPONSABILIDAD

Debe existir un encargado de elaborar, revisar y

aprobar tanto el protocolo como el informe.
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

MATERIALES Y MÉTODOS
Medios de cultivo
Cepas de prueba

Recuento en placa
Turbidez
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE
CULTIVO

Se basa en la aplicación de las pruebas de promoción de

crecimiento

Prueba de INICIO DEL TIEMPO DE

Preparación Dilución de promoción PREPARACION Y
de las cepas trabajo de FINALIZADO EL TIEMPO
DE ALMACENAMIENTO
crecimiento
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE
CULTIVO

Prueba de promoción de
crecimiento en tiempo cero

Medios de cultivo

Almacenamiento en las Prueba de

condiciones promoción de
establecidas por el crecimiento en
tiempo determinado tiempo final

Medios de cultivo
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
Siembra por
Menos de 100 ufc duplicado en
profundidad

Medios de cultivo
Cepa de prueba Condiciones de
incubación tal como
se indica para cada
medio
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

INICIO FINAL
VALIDACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

} En los medios de cultivo líquidos no es posible

hacer recuento por lo tanto el criterio de
aceptación será:

El medio de cultivo cumple si se observa un

crecimiento claramente visible y comparable con
el del control positivo
LOS MEDIOS DE CULTIVO SON LA BASE DE
TODOS LOS ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS