VALIDACIÓN DE

NEUTRALIZANTES

<1227> Validación de recuperación microbiana en artículos farmacopéicos

VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

Los neutralizantes son sustancias que

se agregan a los medios de cultivo con
el fin de eliminar la acción
microbicida de ciertas sustancias o
superficies sujeto de análisis
 VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

BISULFATO LECITINA

POLISORBATO GLICINA

TIOGLICOLATO TIOSULFATO

<1227> Validación de recuperación microbiana en artículos farmacopéicos

VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
u OBJETIVO
u ALCANCE
u RESPONSABLES
u PARAMETROS A EVALUAR
u CRITERIOS DE ACEPTACIÓN
u MATERIALES
u MÉTODO
u CONLUSIONES
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

u El objetivo es demostrar que los

neutralizantes empleados en los
análisis no están modificando ni
positiva ni negativamente en el
análisis.
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
u El alcance corresponde a las
pruebas o medios que van a ser
sujeto de la validación

u Puede ser la sustancia que se va a

evaluar como neutralizante
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

u Sedebe definir el responsable de la

ejecución del análisis, el
responsable de revisar el protocolo
e informe, el responsable de la
aprobación y en algunos casos
quien autoriza
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

u Definir los parámetros a evaluar:

v Porcentaje de recuperación
v Turbidez
v Repetibilidad
v Exactitud
v Precisión
v Especificidad
v Robustez
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
u Definir los criterios de aceptación
de acuerdo a cada parámetro que
se va a evaluar
v Especificidad Los medios son adecuados si se produce un
crecimiento claramente visible de los microorganismos. Esto se
observa visualmente por la turbidez generada.

v Repetibilidad El método es 100% reproducible, arrojando los

mismos resultados cuando es realizado repetitivamente por el
mismo analista

v Robustez El método no es afectado por variaciones pequeñas,

arrojando los mismos resultados
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

u Materiales
u Cepas
u Medios de
cultivo
u Neutralizantes
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

Medio de cultivo

Método Neutralizante

Microorganismos
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

u En caso de que los

neutralizantes no puedan ser
esterilizados se debe
demostrar previamente la
esterilidad de cada uno.

u Deben ser adicionados bajo

cabina de flujo laminar.
CEPAS DE PRUEBA
u Indicadasen la USP para pruebas de
promoción de los medios
seleccionados

v Staphylococcus aureus
v Escherichia coli
v Pseudomonas aeruginosa
v Bacillus subtilis
v Candidad albicans
v Aspergillus brasiliensis
PREPARACIÓN DE DILUCIONES

1 mL 0.1 mL 0.1 mL 1 mL 1 mL

10 mL 9 mL 9.9 mL 9.9 mL 9 mL 9 mL
s.s. s.s. s.s. s.s. s.s. s.s.
(0)

(8) (7) (5) (3) (2) (1)

dilución dilución dilución dilución dilución dilución
8
10 107 105 103 102 101
(Tubo 8)
0.1 mL 0.1 mL 0.1 mL

CONTEO EN PLACA
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
Siembra por
duplicado en
Menos de 100 ufc profundidad

Medios de cultivo
con el
Cepa de prueba Condiciones de
neutralizante
incubación tal
como se indica para
cada medio
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
Siembra por
duplicado en
Menos de 100 ufc profundidad

Medios de cultivo
SIN el
Cepa de prueba Condiciones de
neutralizante
incubación tal
como se indica para
cada medio
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

Medio de cultivo

Control positivo

Microorganismos
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES

Medio de
cultivo
Control
negativo
Neutralizante
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
Recuento Recuento % de Control Control
inicial de la recuperación positivo negativo
prueba
85 70 82,3% 80 0

No debe existir diferencia estadísticamente

significativa entre la recuperación de los medios con
neutralizante y sin neutralizante

En los medios de cultivo líquidos no debe existir unas

diferencia claramente visible entre los medios con el
neutralizante y los medios sin el neutralizante
VALIDACIÓN DE
NEUTRALIZANTES
u Sepueden evaluar más parámetros
de validación
vVariación de la concentración del
neutralizante
Variación de neutralizante para los
v
mismos medios
vPrueba del medio con el
neuralizante para diferentes
sustancias
 ESTA VALIDACIÓN DA
SOPORTE A LOS
RESULTADOS DE MUESTREO
DE SUPERFICIES Y ES LA
BASE PARA LA
VALIDACIÓN/VERIFICACIÓN
DE PRODUCTOS NO
ESTERILES