UNIVERSIDAD SAN ANGEL

INHIBIDORES ENZIMATICOS
BIOQUIMICA I

OTOÑO 2022
ENZIMAS

• Un metabolismo eficaz esta controlado por unas vías metabólicas ordenadas, secuenciales
y ramificadas.
• Aceleran reacciones a 37 oC y a pH neutro
• No alteran el equilibrio de una reacción
• Aceleran la velocidad de la reacción por disminución de la energía de activación
• Algunas enzimas moléculas de acido ribonucleico (ribozimas) presentan también actividad
catalítica.
• Una cuarta parte de los genes humanos codifican enzimas que catalizan reacciones
metabólicas.
 REACCIONES ENZIMÁTICAS

Factores que afectan a las reacciones enzimáticas.

• Efecto de la temperatura
Catalizador inorgánico
La velocidad de reacción aumenta
con la temperatura del sistema y la
temperatura.
las enzimas normalmente funcionan
como catalizadores a una
temperatura constante (ambiente o
corporal).

En ensayos en vitro , la actividad enzimática aumenta con la temperatura, pero luego disminuye con una
temperatura mas alta.
Esto sucede porqué las enzimas igual que todas las proteínas , se desnaturalizan a temperatura alta y
pierden actividad.
 EFECTO DEL PH
Enzimas pH optimo

Enzimas citosolicas 7-8

Pepsina secretada por las células 1.5-2.0
gástricas, y actúa en el jugo gástrico.
Tripsina y quimiotripsina Alcalino compatible con su Especificidad de sustrato mas
actividad digestiva en el jugo amplia ( serina proteasas. Enzimas
pancreático alcalino. pancreáticas, elastasa.
En el centro catalítico contienen un
residuo de serina activo.
Enzimas lisosomales Acido
Catalasa y ureasa enzimas altamente Catalizan únicamente una reacción
especificas, degradan peróxido y urea. especifica

La sensibilidad al pH de las enzimas se debe al efecto del pH sobre la carga iónica de las cadenas laterales de aminoácidos de las enzimas.

Solutos, sustratos, productos, iones metálicos, y moléculas reguladoras. También afectan a la velocidad de las reacciones enzimáticas.
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

• Actividad de una enzima se mide bajo condiciones estándar de

temperatura, pH, concentración de tampón, sustrato y
coenzima.
• La tasa o velocidad v de una reacción enzimática
• Se define como la velocidad de conversión del sustrato en
producto por unidad de tiempo.

Enzimas para la síntesis del
colesterol tienen una actividad
especifica (UI/mg de tejido)
mas elevada en el hígado que
en el musculo , coincide con
el papel del hígado en la
biosíntesis del colesterol.
Unidad internacional (UI)
• Cantidad que cataliza la conversión de un micromol de sustrato en
producto por minuto (1 UI=1 µmol/ min.
• Katal unidad internacional para la cantidad de enzima que cataliza la
conversión de 1 mol de sustrato en 1 mol de producto por segundo
• 1 kat = 1 mol/s
• Actividad especifica de una enzima, una medida de la actividad por
cantidad de proteína se expresa en µmol/min/mg de proteína o UI/mg
• Actividad especifica es muy variable entre los tejidos y depende de su
función metabólica
• La actividad especifica de una enzima es útil para calcular su pureza, a
mayor actividad especifica mayor su pureza u homogeneidad

El katal es una cifra muy pequeña , como unidad estándar de actividad ,

utilizados por tanto UI una cifra mayor.
ESPECIFICIDAD DE REACCIÓN Y LA ESPECIFICIDAD DE
SUSTRATO DETERMINADAS POR EL CENTRO ACTIVO.

Enzimas Para el tipo de reacción que catalizan y para el tipo de sustrato.

son Especificidad de reacción determinada químicamente por los residuos de

especificas a.a. que se encuentran en el centro catalítico de la enzima,
El centro activo de la enzima esta formado por el lugar de fijación del
sustrato y por el centro catalítico.
La especificidad del sustrato está determinada por el tamaño, la estructura.
Las cargas, la polaridad y el carácter hidrófobo de su lugar de fijación.
Esto se debe a que como primer paso, de la reacción , el sustrato debe
fijarse al centro activo y preparar así la catálisis
ISOENZIMAS

• Isoenzimas , enzimas que catalizan la misma reacción, pero tienen una estructuras
primaria y/o composición diferente.
• En el suero se determinan para diagnostico las concentraciones de algunas enzimas e
isoenzimas, especificas de tejidos.
o La velocidad de la reacción va aumentando a medida que
aumenta la concentración de sustrato hasta que la
enzima se satura.
o La reacción catalizada por una enzima utiliza la misma
cantidad de sustrato y genera la misma cantidad de
producto que una reacción no catalizada.
o A mayor cantidad de sustrato, mayor número de
centros catalíticos estarán ocupados, lo que
incrementará la eficiencia de la reacción, hasta el
momento en que todos los sitios posibles estén
ocupados.

o En ese momento se habrá alcanzado el punto de

saturación de la enzima y, aunque se añada más
sustrato, no aumentará más la eficiencia.

Las dos propiedades cinéticas más importantes

 TEORÍA DEL ESTADO DE TRANSICIÓN

CAMBIO EN LA ENERGÍA LIBRE DE UNA REACCIÓN CATALIZADA ENZIMÁTICAMENTE (LÍNEA

CONTINUA) Y LA MISMA NO CATALIZADA (LÍNEA PUNTEADA).
 PRINCIPIOS
FUNDAMENTALES DE LA
CATÁLISIS

1) CHOCAN EN LA ORIENTACIÓN ESPACIAL ÓPTIMA

2) ADQUIRIERON SUFICIENTE ENERGÍA PARA ALCANZAR UN ESTADO DE TRANSICIÓN

3)LA ACT. DE CATALIZADORES AUMENTA LA VEL. DE REACCIONES QUÍMICAS.

4) SE ALCANZA CON MAYOR FRECUENCIA EL ESTADO DE TRANSICIÓN

5) LA ENERGÍA ACTIVACIÓN DISMINUYE EN PRESENCIA DE UN CATALIZADOR , ENERGÍA NETA

NO SUFRE CAMBIOS
5.3 Bohinskin
 INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
Antibióticos venenos infecciones virales insecticidas
Medicamentos que combaten el dolor cáncer herbicidas inflamación

• EL efecto de MUCHAS DE ESTAS SUSTANCIAS SE DEBE A SU CAPACIDAD PARA

INTERFERIR EL FUNCIONAMIENTO DE LAS PROTEÍNAS CELULARES
• OCURRE EN FORMA NATURAL, FORMA PARTE DE LOS PATRONES NORMALES DE
BIORREGULACIÓN.
• ES UTIL EN EL DESARROLLO DE MEDICAMENTOS MÁS EFICACES AL INVESTIGAR EL
USO DE LOS INHIBIDORES ENZIMÁTICOS
• LA ACCIÓN DE UN INHIBIDOR IMPLICA LA FIJACIÓN DE ÉSTE A ALGUNA FORMA DE
LA ENZIMA.

DA COMO RESULTADO UNA PERDIDA TOTAL O PARCIAL DE LA ACTIVIDAD

DE LA ENZIMA PARA TRANSFORMAR SUSTRATOS EN PRODUCTOS.
 INHIBICIÓN Y REGULACIÓN DE LA
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

• COMPETITIVA
• NO COMPETITIVA
• POR EFECTORES HOMÓTROPOS
• POR EFECTORES HETERÓTROPOS
• MODIFICACIÓN COVALENTE
• INDCCIÓNY REPRESIÓN DE LA SÍNTESIS ENZIMÁTICA
 INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

• SE LE LLAMA INHIBIDOR A CUALQUIER SUSTANCIA QUE

PUEDA DISMINUIR LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN
CATALIZADA POR UNA ENZIMA
• LOS INHIBIDORES PUEDEN SER REVERSIBLES O
IRREVERSIBLES
• LOS ENLACES IRREVERSIBLES SUELEN SER COVALENTES (EL
PLOMO CON EL SULFHIDRILO DE LA CISTEÍNA O CON LOS
AMINOÁCIDOS DE LA FERROQUELATASA, ENZIMA QUE
INTERVIENE EN LA SÍNTESIS DEL GRUPO HEM )
 INHIBIDORES COMPETITIVOS

• Se parecen estructuralmente al sustrato ( análogos

de hormonas, antimetabólicos, análogos de
metabolitos)
• Se asocian al sitio activo
• Son desplazados por un exceso de sustrato
• Cambian afinidad
• No cambian velocidad máxima
• Reversible
 INHIBIDORES NO COMPETITIVOS

• Cambian velocidad máxima

• No se parecen al sustrato
• Modifican la estructura de la enzima
• Son irreversibles por concentración de sustrato
• Como los mercuriales, tiourea, fluoruro, etc.
EJEMPLO DE INHIBICIÓN NO
COMPETITIVA

• LOS ANTIBIÓTICOS BETA LACTÁMICOS INHIBEN DE

MANERA NO COMPETITIVA LA ENZIMA QUE
INTERVIENE EN LA SÍNTESIS DE LA PARED
BACTERIANA
• INHIBIDORES DE LA ENZIMA CONVERTIDORA DE
ANGIOTENSINA I A ANGIOTENSINA II (INHIBIDORES
DE LA ECA: CAPTOPRIL, ENALAPRIL) (DISMINUYEN LA
TENSIÓN ARTERIAL)
• LA ASPIRINA ES UN FÁRMACO QUE INHIBE LA ENZIMA
(COX-1 Y COX-2) QUE PARTICIPA EN LA PRODUCCIÓN
DE TROMBOXANO Y PROSTAGLANDINA A PARTIR DE
ÁCIDO ARAQUIDÓNICO
 INHIBICIÓN ACOMPETITIVA

a) Complejo ternario no productivo EIS

b) Exclusivamente como resultado de la fijación
de I a un complejo ES
c) Se asocia a los decrementos de Km con un
activador de la acción enzimática
d) Se necesita menos S para lograr una
saturación del 50 %

Constante disminuye Km y Vmax.

REGULACIÓN DE ENZIMAS ALOSTÉRICAS
REGULACIÓN DE ENZIMAS ALOSTÉRICAS
REGULACIÓN DE ENZIMAS ALOSTÉRICAS
EFECTORES HOMOTROPOS

EL PROPIO SUSTRATO ACTUA COMO EFECTOR

FUNCIONA COMO EFECTOR POSITIVO
LA PRESENCIA DE UNA MOLÉCULA DE SUSTRATO EN UN LUGAR
DE LA ENZIMA INTENSIFICA LAS PROPIEDADES CATALITICAS DE
LOS OTROS LUGARES DE UNIÓN DEL SUSTRATO.

LOS SITIOS DE UNIÓN MUESTRAN COOPERATIVIDAD

 Regulación de enzimas alostericas
- EFECTORES HETERÓTROPOS-

REGULACIÓN ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA

MECANISMOS DE
RETROALIMENTACIÓN

UNA ENZIMA ACTÚA SOBRE UN

PASO DETERMINADO.

MODIFICACIÓN COVALENTE

FORMACIÓN O ROMPIMIENTO DE
UN ENLACE COVALENTE
 REGULACIÓN DE LAS ENZIMAS POR
MODIFICACIÓN COVALENTE

Fosforilación y
desfosforilación
 INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA

COMPETITIVA

• EL INHIBIDOR SE UNE DE MANERA REVERSIBLE CON EL SITIO ACTIVO DE LA ENZIMA,

COMPITIENDO CON EL SUSTRATO (EJEMPLO: ESTATINAS)
• EL EFECTO INHIBIDOR SE ATENÚA AUMENTANDO LA CONCENTRACIÓN DEL
SUSTRATO
• DE ACUERDO CON LA ECUACIÓN DE MICHAELIS – MENTEN, LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO SE MANTIENE CONSTANTE, POR LO QUE NO SE MODIFICA LA VELOCIDAD
DE REACCIÓN, PERO SÍ DISMINUYE LA SÍNTESIS DE PRODUCTO
EJEMPLO DE INHIBICIÓN COMPETITIVA
SÍNTESIS DEL COLESTEROL

HMG
HIDROXIMETIL
GLUTARATO

HARVEY R.A. BIOQUÍMICA

 INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA

NO COMPETITIVA

• EL INHIBIDOR SE UNE A UN SITIO DIFERENTE AL DE LA

ENZIMA O A UN SITIO DEL COMPLEJO ENZIMA-SUSTRATO,
LO QUE IMPIDE LA FORMACIÓN DEL PRODUCTO
• POR LA DISMINUCIÓN DE LA CANTIDAD DE SUSTRATO
DISPONIBLE, LA VELOCIDAD DE REACCIÓN DISMINUYE
MIENTRA QUE LA KM PERMANECE CONSTANTE
 REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

• MOLÉCULAS DENOMINADAS EFECTORES SE UNEN A LA ENZIMA

MEDIANTE ENLACES NO COVALENTES (REVERSIBLES) EN UN LUGAR
QUE NO ES EL SITIO ACTIVO
• UN EFECTOR NEGATIVO INHIBE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
• UN EFECTOR POSITIVO ESTIMULA LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
• AUMENTAN O DISMINUYEN LA AFINIDAD DE LA ENZIMA POR EL
SUSTRATO Y /O LA VELOCIDAD DE REACCIÓN
REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

EFECTORES

• HOMÓTROPO
• EL SUSTRATO ACTÚA COMO EFECTOR

• HETERÓTROPO
• EL EFECTOR ES UN PRODUCTO DE LA MISMA REACCIÓN
CATALIZADA POR LA ENZIMA
 REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA

MODIFICACIÓN COVALENTE

• POR ADICIÓN O EXTRACCIÓN DE GRUPOS FOSFATO

(FOSFORILACIÓN O DESFOSFORILACIÓN) UNIDOS A AMINOÁCIDOS
DE SU CADENA PROTEICA (SERINA,TREONINA,TIROSINA)
• FOSFORILACIÓN: PROTEÍNA CINASAS
• DESFOSFORILACIÓN: FOSFOPROTEINFOSFATASAS
REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

INDUCCIÓN Y REPRESIÓN DE LA SÍNTESIS ENZIMÁTICA

• AUMENTO EN LA SÍNTESIS DE LA ENZIMA (INDUCCIÓN)

• DISMINUCIÓN DE LA SÍNTESIS DE LA ENZIMA (REPRESIÓN)
VELOCIDAD DE PRODUCCIÓN
ENZIMÁTICA

HARVEY R.A. BIOQUÍMICA

ENZIMAS EN EL DIAGNÓSTICO CLÍNICO

• ALGUNAS ENZIMAS COMPARTEN DISTINTOS TEJIDOS (TRANSFERASAS, FOSFATASAS,

DESHIDROGENASAS, CREATINFOSFOCINASAS, ETC.)
• EL AUMENTO DE SU CONCENTRACIÓN EN PLASMA NO ES ESPECÍFICA DE UNA
PATOLOGÍA ORGÁNICA PARTICULAR. SÓLO PUEDE INTERPRETARSE COMO DAÑO
TISULAR
• EN AUSENCIA DE UN CUADRO CLÍNICO ESPECÍFICO, NIVEL ELEVADO DE LDH PUEDE
SIGNIFICAR PROLIFERACIÓN CELULAR AUMENTADA (PROCESO CANCEROSO)
• EL MANEJO INDECUADO DE LOS ESPECÍMENES BIOLÓGICOS (HEMÓLISIS) PRODUCE
LIBERACIÓN DE ENZIMAS DEL INTERIOR DE LOS ERITROCITOS, LO QUE SE TRADUCE EN
UNA FALSA ELEVACIÓN ENZIMÁTICA (TRANSFERASAS, DESHIDROGENASAS)
ENZIMAS DE INTERÉS CLÍNICO
APLICACIONES CLÍNICAS DE LAS
DETERMINACIONES ENZIMÁTICAS. AMILASA
APLICACIONES CLÍNICAS DE LAS
DETERMINACIONES ENZIMÁTICAS.
DESHIDROGENASA LÁCTICA TOTAL
 MARCADORES BIOQUIMICOS ENZIMÁTICOS Y
NO ENZIMÁTICOS EN INFARTO DE
MIOCARDIO
Mg – mioglobina
CC – creatincinasa
DHL – deshidrogenasa de lactato
Tn - troponina

FUENTE: RUIZ REYES G. FUNDAMENTOS DE INTREPRETACIÓN CLÍNICA

 ACTIVIDAD
CONTESTE LOS SIGUIENTES REACTIVOS
• 1. CONCEPTO DE ENZIMA
• 2. IMPORTANCIA DE LAS ENZIMAS EN LOS SISTEMAS BIOLÓGICOS
• 3. MECANISMO DE PRODUCCIÓN DE ENFERMEDAD POR DEFICIENCIA
ENZIMÁTICA
• 4. EJEMPLO(S) DONDE LA MEDICIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA EL SUERO
HUMANO APOYA EN EL DIAGNÓSTICO Y SEGUIMIENTO DE LA EVOLUCIÓN DE
UNA ENFERMEDAD (FUNDAMENTO BIOQUÍMICO)
• 5.AL REVERSO DE LA HOJA DIBUJE SUS MANOS
• IZQUIERDA. EN CADA DEDO ESCRIBA UNA CUALIDAD PERSONAL O DEL MEDIO
QUE LE RODEA, QUE LE AYUDA O MOTIVA EN SU FORMACIÓN MÉDICA
• DERECHA. EN CADA DEDO ESCRIBA UN DEFECTO PERSONAL O DEL MEDIO QUE
LE RODEA, QUE NO LE AYUDA O LE DESMOTIVA EN SU FORMACIÓN MÉDICA
• entender que cada etapa en una vía metabólica es catalizada por la enzima;
•explicar que las enzimas son catalizadores biológicos;
•entender que la estructura de la enzima se ve afectada por el cambio en la temperatura y el pH;
•explicar que el sitio activo es el área de la enzima donde se produce la reacción, y que la molécula
de sustrato encaja en el sitio activo;
•describir los diferentes mecanismos que regulan la actividad de la enzima (inhibición competitiva,
inhibición no competitiva, el control de alostérica, modificación covalente y la inhibición de
retroalimentación).