TEMA 16: ACCIÓN DE LOS AGENTES FISICOS Y QUIMICOS

1. SOBRE EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS

Modifican la velocidad de crecimiento, provocando cambios que, a determinados valores de

dichos factores pueden llegar a ocasionar la muerte de los microorganismos.

Condicionan la distribución de los microorganismos en sus ecosistemas y hábitats naturales.

Permiten controlar el crecimiento microbiano, por medio de la fijación de parámetros para:

 Mutagénesis
 Esterilización y desinfección
 Quimioterapia

-Esterilización: tratamiento físico o químico que conduce a la eliminación de todo vestigio de

vida

-Inhibición: tratamiento que posibilita un crecimiento limitado de los microorganismos.

-Desinfección: tratamiento físico o químico de conduce a la eliminación de los organismos

patógenos.

-Descontaminación: tratamiento de un objeto o superficie para que su manejo sea más seguro.

2. ACCIÓN DE LOS AGENTES FÍSICOS TEMPERATURA

Afecta a la velocidad de crecimiento. Curva característica con tres temperaturas cardinales:

Las tres temperaturas cardinales de la curva:

 Mínima. Actividad metabólica mínima y

fluidez de membranas.
 Óptima. Tasa de crecimiento máxima por
reacciones metabólicas enzimáticas
máximas.
 Máxima. Desnaturalización de proteínas y
enzimas con un colapsamiento de la
membrana y lisis térmica.

Clasificación de los microorganismos según la temperatura:

 Microorganismos termosensibles: Viables dentro de un muy estrecho rango de

temperaturas (3-4ºC). Suicidas desde el punto de vista biológico. Aplicaciones en
investigación
 Por debajo de la temperatura mínima: Detención de los procesos de transporte.
Disminución de la fluidez de membrana (alteración del gradiente de protones).
Aumento de la viscosidad de citoplasma. Inactivación de proteínas con actividad
enzimática.
  Efecto letal del frío: Las bajas temperaturas no son útiles para la esterilización ya que,
aunque algunas bacterias mueren por congelación, en la mayoría de los casos tienen
un efecto bacteriostático. Enfriamiento rápido más lesivo que el lento. Descongelación
lenta más lesiva que la rápida. Aplicaciones:

-Conservación de bacterias: Se adicionan sustancias no ionizables de bajo peso molecular que

provocan solidificación amorfa.

-Liofilización: Desecación al vacío de una muestra previamente congelada.

 Por encima de la temperatura máxima: Inactivación y desnaturalización de proteínas

con actividad enzimática. Colapsamiento de las membranas (fundamentalmente la
membrana citoplasmática). Separación de las dos hebras de la hélice de DNA. Si la
situación persiste, origina la lisis térmica.
 Efecto letal del calor: Calor húmedo. Más efectivo que el calor seco debido a que las
moléculas de agua pueden desplazar a los puentes de hidrógeno de proteínas o lípidos
de membrana, originando su desnaturalización. Aplicaciones:

-Esterilización de medios de cultivo y soluciones.

-Esterilización de material quirúrgico.

-Esterilización o inactivación parcial en la industria alimentaria.

-Uperización (135-150ºC, 1-2 segundos)

-Pasteurización (63-66ºC, 30 minutos)

-Pasteurización instantánea (71ºC, 15 segundos)

Calor seco: Requiere mayores temperaturas y tiempos que el calor húmedo. Aplicaciones

-Esterilización instrumentos de laboratorio (horno Pasteur: 160-170ºC durante 2-3 horas).

-Flameado a la llama (hasta el rojo) de asas metálicas de siembra, con las que se inoculan las
bacterias.

-Incineración de materiales de desecho.

3. DESECACIÓN

Sensibilidad variable según el microorganismo, pero termina ocasionando la muerte. Muerte

de células vegetativas, pero no de esporas. Causas de letalidad:

-Concentración paulatina de solutos que origina la desnaturalización de todos los

componentes celulares.

-Daños por oxidación.

4. ENERGIA SÓNICA

-Ondas ultrasónicas (más de 200000 ciclos/segundo

 Agitación del contenido celular.

 Alteración del estado coloidal citoplasmático.
  Cavitación (formación de pequeñas burbujas dentro y fuera de la célula que colisionan
originando muerte celular).

APLICACIONES:

-Esterilización mediante “sonicación” (poco útil).

-Obtención de extractos celulares para ensayos bioquímicos.

5. PRESION HIDROESTATICA

-Por encima de 600 kg/cm2.

 Aumento de la viscosidad del citoplasma.

 Disminución de la capacidad de las enzimas de unirse a sus respectivos sustratos.
 Interferencia en procesos de transporte a nivel de membrana.
 Interferencia en la biosíntesis de proteínas.
 Interferencia en la división celular.

-Bacterias “barotolerantes” y “barófilas”.

-Obtención de extractos celulares mediante prensa de French.

6. PRESIÓN OSMÓTICA

Muerte originada por la diferencia de concentración de solutos entre el interior y el exterior

celular. Variantes:

-Plasmolisis: Liberación de H2O celular.

-Choque osmótico: Elevación de la concentración intracelular de solutos (ej: glicerina).

7. RADIACCIONES

Luz UV: Origina mutaciones en los ácidos nucleicos, que pueden llegar a ser letales.
Aplicaciones: Obtención de mutantes. Esterilización (superficies, aire o agua; NO efectiva sobre
materiales opacos o sólidos).

8. ACCIÓN DE LOS AGENTES QUIMICOS/ TIPOS DE EFECTOS SOBRE LOS MICROORGANISMOS

Rojo: Numero de células totales (todos)

Verde: Numero de células viables (mantienen la capacidad de dividirse)

Flecha: Se aplica el agente, detiene el crecimiento de la bacteria (no hay síntesis de proteínas)

 Microbiestáticos: Se detiene el crecimiento, pero siguen siendo viables, no causa un

daño irreversible
 Microbicidas: El daño del agente es irreversible, después del tratamiento la célula no
va a poder ser modificada. Las puedes ver, pero no son viables (no se pueden
multiplicar) y no lisan la célula.
 Microbiolíticos: Afecta a la integridad de la célula, se rompen las estructuras y libera el
contenido (lisis de la célula). Daño irreversible.
Tipos según su EFECTO sobre los microorganismos:

- Esterilizantes: Producen la inactivación total de todas las formas de vida microbiana. También
es capaz de linear las esporas.

- Desinfectantes (o germicidas): Matan los microorganismos patógenos (infecciosos) de un

material. Pueden presentar efectos tóxicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear
sólo sobre materiales inertes.

- Higienizantes: Reducen (pero no eliminan) la cantidad de microorganismos a niveles que se

consideran seguros.

- Antisépticos: Se oponen a la sepsis o putrefacción de materiales vivos. Baja toxicidad hacia los
tejidos vivos donde se aplican.

- Quimioterápicos: Actividad microbicida o microbiostática, con una toxicidad baja como para
permitir su administración a un organismo superior, en cuyos fluidos corporales y tejidos
permanece estable un cierto tiempo a concentraciones tales que los hace eficaces como
antimicrobianos dentro del organismo.

Tipos según su USO:

- Externo: Esterilizantes Desinfectantes Higienizantes Antisépticos.

- In vivo: Antisépticos Quimioterápicos

8.1. Tipos de desinfectantes según su actividad (I)

 AGENTES QUE DAÑAN LA MEMBRANA:

-Detergentes: Catiónicos, Aniónico, No iónicos

- Compuestos fenólicos: Fenol, Cresoles, Difenilos halogenados, Alquilésteres del para-

hidroxibenzoico, Aceites esenciales de plantas

- Alcoholes: Etanol, Isopropanol

 AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEÍNAS:

-Ácidos y bases fuertes

-Ácidos orgánicos no disociables

8.2. Tipos de desinfectantes según su actividad (II)

  AGENTES MODIFICADORES DE GRUPOS FUNCIONALES:

- . Metales pesados: Mercuriales, Compuestos de plata, Compuestos de cobre

- Agentes oxidantes: Halógenos, Agua oxigenada, Permanganato potásico, Ácido peracético

- Colorantes: Derivados de la anilina, Derivados de la acridina

- Agentes alquilantes: Formaldehido, Glutaraldehido, Óxido de etileno, β-propionil-lactona

9. ACCION DE LOS AGENTES QUIMICOS/QUIMIOTERAPIAS

Tipos de agentes quimioterápicos:

 De síntesis: Análogos de metabolitos que actúan como inhibidores competitivos

respecto de cierta enzima. Se generan de forma artificial. Algo que se parece, pero no
lo es (análogo) la enzima utiliza el análogo como si fuera el sustrato, pero no se
produce la reacción real.
 Antibióticos: Sustancias que a pequeñas concentraciones tienen efectos
antimicrobianos (microbicidas o microbiostáticos) tras ser administrados por vías
adecuadas a un organismo receptor.

TIPOS DE ANTIBIOTICOS:

Como se experimenta resistencia se han ido generando nuevos antibióticos a partir de los
naturales, a veces también se hace para mejorar un antibiótico.

 Naturales: Producidos por seres vivos

 Semisintéticos: Modificados artificialmente a partir de los naturales

Tipos (según diana sobre la que actúan o interfieren):

-Interfieren con la biosíntesis de la pared celular.

-Actúan sobre la membrana celular.

-Inhiben la biosíntesis de proteínas.

-Interfieren en la síntesis y transcripción de ácidos nucleicos.

Tipos de antibióticos (según espectro de actividad)

QUIMIOTERÁPICOS: Determinación del efecto de los antibióticos

-Técnica de dilución en tubo Permite determinar la concentración mínima inhibitoria (MIC)

-Técnica de difusión en medio sólido