Control de Microorganismos

Control de microorganismos
Esterilización
Asepsia – Antisepsia - Desinfección
Bioseguridad
Control de microorganismos
Control de Microorganismos:
Perspectiva histórica
• Conservación de alimentos
• Pasteur
• Koch
• Cirugía
• Lister
• Semmelwiess
Definiciones
Esterilización Gangrena
(Clostridium perfringens)
Eliminación o destrucción completa de Tetanos
todas las formas de vida microbiana (Clostridium tetani)
incluyendo las formas esporuladas. Botulismo
Procedimiento por el cual se utilizan (Clostridium botulinum)
métodos físicos o químicos para eliminar Antrax
toda posibilidad de vida microbiana (Bacillus anthracis)
incluidas esporas y bacterias altamente
termorresistentes.
Control de Microorganismos
Desinfección
Eliminación o muerte de los agentes infecciosos o
contaminantes sin asegurar la desaparición de todos los
m.o. patógenos ni de las esporas presentes sobre
materiales inertes
Desinfectantes
Agentes antimicrobianos que se emplean solamente
sobre objetos inanimados o medios inertes porque
son tóxicos celulares protoplasmáticos.
FDA: “sustancias químicas capaces de destruir en
10 o 15 min los gérmenes depositados sobre el
material inerte; deben alterar lo menos posible el
sustrato sobre el que actúan. Es deseable que
destruyan todas las formas vegetativas de las
bacterias, además de los hongos y los virus.”
Asepsia
Ausencia de m.o. infecciosos en los tejidos vivos.
Técnicas que impiden el acceso de m.o. no deseados al
área de trabajo.
Antisepsia
Procedimiento por el cual se emplea un agente
químico sobre superficies biológicas con el propósito
de inhibir o eliminar la proliferación de los m.o.
Antisépticos
Substancias de acción inespecífica y de uso preferentemente
superficial (piel, mucosas, heridas) que pueden destruir o inhibir el
desarrollo de m.o. (habituales o transitorios presentes en piel o
mucosas).
Deben reunir suficiente actividad antimicrobiana y buena tolerancia
local y general
Descontaminación
Inactivar m.o. que impliquen posibilidad de infección.
El agente químico empleado para descontaminar debe tener nivel
microbiológico, químico y clínico.
Descontaminación
– Nivel microbiológico: poder tuberculicida, virucida y
esporicida.
– Nivel químico: potencia y estabilidad.
– Nivel clínico: mínima cantidad efectiva aplicable sin riesgo
para la salud del operador y del paciente.
Condiciones ideales de Antisépticos y
Desinfectantes
– Elevada actividad antimicrobiana aún diluido.
– Costo moderado.
– Amplio espectro.
– Ser microbicida mejor que microbiostatico, producir la
muerte en forma gradual y en tiempo corto.
– Ser estable por varios meses y ante materia orgánica.
– Homogeneización uniforme en el diluyente.
– Su actividad debe producirse de preferencia en

soluciones acuosas para asegurar penetración.
– Presentar baja tensión superficial
– Ser compatible con otros productos que pudieran
usarse antes o después.
– No ser tóxico para los tejidos humanos, que no exija el
uso de guantes o su lavado inmediato.
– No corrosivo para metales, maderas, superficies
pintadas.
– Sus propiedades organolépticas no deben ser
desagradables.
– No tiene que desteñir las ropas, paredes, etc.
– No tiene que perder actividad por temperatura, ni
por pH.
– Biodegradables.
– Poseer acción residual del agente químico
(sustantividad).
• Mecanismos de Acción
– Microbicida: muerte, incapacidad de reproducción
– Microbiostática: detención. Inhibición de desarrollo y
reproducción
Acción Efecto Naturaleza

Microbicida Muerte Irreversible
Microbiostática Inhibición metabólica Revesible
• Mecanismos de Acción
Blanco Mecanismo de acción Ejemplo
Envoltura celular (pared Entrecruzamiento de prot.; Glutaraldehido
celular, membrana externa) remoción de Mg y liberación de
LPS (G-)
Membrana citoplasmática Daño gralizado a la bicapa de Amonios
cuaternarios
(Interna) PL, inducción de pérdida de aa clorhexidina
Entrecruzamiento de Entrecruzamiento de proteínas, Formol
moléculas RNA, DNA
Intercalación en el DNA Intercalación de moleculas Acridina
entre pares de bases
Interacción con grupos Tiol Enzimas unidas a membrana Compuestos
de plata
Efectos sobre el DNA Inhibición síntesis, rotura Halógenos
H2O2
Agentes oxidantes Radicales libres, alterac. Prot. Halógenos
peróxidos
Mecanismos de acción
Desnaturalización y coagulación Alteración de la permeabilidad de la
de proteínas (Alcoholes) membrana (Agentes surfactantes, alcoholes)
Combinación de radicales de proteínas y

ácidos nucleicos, dando reacciones de
sustitución (Aldehidos, oxido de etileno)
Oxidación de distintos compuestos

(Cl, óxido de etileno)
• Factores que afectan la efectividad
– Tipo de agente microbiano o infeccioso
– Tiempo de contacto
– Temperatura
– Curva de muerte
– Concentración
– pH
– Formulación o tipo de preparado
– Interferencia de sustancias en el medio
• Tipo de agente microbiano o infeccioso
– Bacteria vegetativa
– Bacilos ácido-alcohol resistentes
– Esporas bacterianas
– Hongos
– Virus
– Priones
Biofilms
• Tiempo de contacto
– Directamente proporcional al logaritmo de la concentración
bacteriana inicial.
– Concentraciones elevadas requieren mayor tiempo que
concentraciones bajas.
• Curva de muerte
– Se obtiene al graficar la concentración de m.o. sobrevivientes
en función del tiempo.
– Se debe reducir la carga microbiana inicial para asegurar
mayor eficacia.
• Temperatura
– El aumento de
temperatura acelera la
destrucción de m.o.
– Hay desinfectantes que
se inactivan por calor.
• Concentración
– En relación con el tiempo de exposición.
– Cuanto mayor sea la concentración menor será el tiempo.
– La relación es de tipo exponencial.
• pH
– Determina el grado de
disociación.
– Los agentes catiónicos
(amonio cuaternario) son
mas activos en medio
alcalino
– Los agentes aniónicos
(fenoles, hipoclorito) son
mas activos en medio
ácido.
• Formulación o Tipo de preparado
– Los preparados desinfectantes deberían ser estables en sus
formulaciones originales, es decir, sin diluir.
– Las soluciones de hipoclorito no lo son y requieren evaluación
periódica.
• Interferencia de sustancias
– Suero, sangres, pus, líquidos corporales.
– Formación de cubiertas protectoras.
– Formación de compuestos no microbicidas, alteración del
principio activo (precipitación, reacción)
– Adsorción a otros elementos con perdida de eficacia.
Nivel Microbiológico de los agentes químicos (Spaulding)
Nivel Espectro microbiológico Compuestos (ejemplos)
Alto 1. Esporas bacterianas Glutaraldehído al 2 %
2. Mycobacterium tuberculosis Formol al 20 %
3. Virus no lipídicos y pequeños Peróxido de hidrógeno
4. Hongos. Halógeno (>5.000 ppm)
5. Formas vegetativas bacterianas Ácido peracético
6. Virus lipídicos y medianos
Intermedio 1. Mycobacterium tuberculosis Alcohol al 70 %
2. Virus no lipídicos y pequeños Halógeno (<5.000 ppm)
3. Hongos. Deriv.fenól al 0,5-5 %
4. Formas vegetativas bacterianas Yodóforos al 8-10 %
5. Virus lipídicos y medianos
Bajo 1. Hongos Amonio cuaternario 0,5-1%
2. Formas vegetativas bacterianas Mercuriales 1-2%
3. Virus lipídicos y medianos Clorhexidina 0,2 y 0,12%
Detergentes aniónicos
Sales de plata
Mas resistentes
Menos resistentes
Clasificación Spaulding
Piel Intacta Bajo Riesgo de Infección
No Crítico Pulsioximetros, cableado de Limpieza con agua y
electrodos jabón
Mucosas, piel intacta Riesgo de infección
Semi- significativo
críticos Endoscopios, cateteres: Desinfección de alto nivel
electrocoagulacion, irrigación
Sistema vascular Alto riesgo de infección
Cavidades estériles
Tejidos estériles
Rotura barrera mucosa
Crítico
Pinza de biopsia Material de un solo uso
Asa de polipectomia Esterilización de todo
Agujas de esclerosis material reutilizable
Papilotomos
• Agentes Físicos
Métodos por calor húmedo
– Temperatura Métodos por calor seco
Métodos por frío
– Radiaciones
– Agentes mecánicos
• Métodos por calor húmedo
– Pasteurización
– Ebullición
– Termodesinfección
– Vapor de agua
– Vapor fluente con o sin presión
– Vapor con presión en autoclave

Se recomienda el uso del autoclave para la esterilización del
instrumental y de cualquier objeto, contaminado por fluídos
biológicos, que resista las condiciones físicas de la esterilización
por vapor. Los tiempos de esterilización en el autoclave varían
según la temperatura seleccionada. Las condiciones estándar
recomendadas son:
• Instrumental con varios envoltorios:
121° a 132° C/ 30psi 10 min - /15 psi 30 min
• Instrumental envuelto ligeramente:
132° C/ 30psi 8 min - 121° C /15 psi 20 min
• Instrumental sin envolver:
132° C/ 30psi 3 min - 121° C /15 psi 15 min
• Método por calor seco
– Incineración
– Flameado o fuego directo
– Esterilizado de bolillas
– Estufa de calor seco o esterilizador de aire caliente

ESTUFA DE ESTERILIZACION (Aire caliente)
Temperatura: 171°C ---- Tiempo: 60 min
• Métodos por frío

– Refrigeración habitual
– Congelación profunda
– Liofilización
• Radiaciones
– Ionizantes
– Ultravioletas: Dependen de la intensidad de la

lámpara (vida útil) y la distancia
• Agentes mecánicos
• Ultrasonido
• Cepillado o fregado
• Filtración
– Clásica
– Membranas
– Aérea
– Filtros HEPA
Desinfectantes y Antisépticos Grupos Principales
• Fenol y derivados fenólicos

– Utilizado por Lister, 1867.
– Actualmente se usan derivados fenólicos.(Fluido Manchester, Espadol, Poett,
Lysoform)
– Se combinan con cloro para tratar superficies.
– Nivel intermedio
– Actividad depende de concentración y sp. microbiana a tratar.
– Mecanismo de acción: destrucción de pared y membrana celular, inactivación
de sistemas enzimáticos.
– Mas efectivo sobre grampositivos
– No es esporicida
Ventajas Desventajas
Estables en presencia de materia orgánica Tóxicos (daño neurológico)
Mejoran sus propiedades humectantes en Alergizantes
soluciones que contienen jabones Pueden dejar residuo viscoso (Fenol)
Impacto ambiental
• Indice Fenólico
– Evaluación actividad bactericida de un desinfectante
químico.
– Salmonella typhi ATCC6539, Staphylococcus aureus
ATCC6538.
– La mas alta dilución del desinfectante a prueba que no
mata las bacterias en 5 min pero si en 10, comparado
con la dilución de fenol que tiene el mismo efecto
• Yodo y Yodóforos
– Tintura de yodo como antiséptico sobre piel y mucosas.
– Compuestos orgánicos (yodóforo) proveen reserva yodo
residual de liberación sostenida.
– Povidona-Yodo (Pervinox) . Nivel Intermedio.
– Bactericidas y virucidas eficaces
– Según la concentración pueden ser esporicidas.
– Mecanismo de acción: rápida penetración a través de pared
celular, desnaturalización de proteínas, inactivación de ácidos
nucleicos.
• Soluciones acuosas (Lugol) u alcohólicas (alcohol
yodado, tintura de yodo).
• Antisepsia de piel y descontaminación de instrumental
Baja toxicidad Provocan una reacción de
Buena acción residual hipersensibilidad pero menor que la
Microbicidas mas activos que el yodo causada por el yodo.
Inodoros El uso prolongado corroe metales y altera
plásticos.
Mas estables en presencia de materia
orgánica Colorean temporariamente la superficie
sobre la que se aplica
• Cloro y Compuestos del Cloro
– Los mas empleados son los hipocloritos.
– Baratos, rápida acción. Nivel intermedio.
– Actividad debida al ácido hipocloroso no disociado,
dependiendo del pH: mas efectivo a pH bajo.
– Mecanismo de acción: inactivación de reacciones enzimáticas,
de ácidos nucleicos y desnaturalización de proteínas.
– La eficacia se reduce con el tiempo de almacenamiento y con la
exposición a luz solar.
– Dicloroisocianurato de sodio, menos sensible a materia
orgánica; dióxido de cloro; cloramina T.
• Se usa como desinfectante, para
descontaminar instrumental (0,5%
10 min), en endodoncia para
lavado de conductos, desinfección
de habitaciones, potabilización de
aguas.
Alta eficacia microbicida Estabilidad limitada
Baja toxicidad Corrosivo (>0,5 %)
Acción potente y rápida Incompatible con detergentes catiónicos
Bajo costo Puede provocar dermatitis
Biodegradable La materia orgánica limita la acción
5000 ppm 1.000 ppm 500 ppm 100 ppm
(0,5%) (0,1%)
1:10 1:50 1:100 1:500
Aldehídos
• Formaldehido
– Formol: Alto nivel, esterilizante. Solución
comercial de formalina (formol al 37 %).
– Mecanismo de acción: alquilación de
proteínas con cese de actividad enzimática.
– Potencial cancerígeno
Inactiva toxinas y virus sin afectar la antigenicidad Tóxico
Fijador de tejidos Irritante
Bajo costo Potencialmente cancerígeno
Aldehídos
• Glutaraldehido
– Alto nivel. Eporicida en solución acuosa a pH alcalino (7,5-8,5)
– Puede polimerizarse perdiendo actividad.
Alto nivel antimicrobiano Es tóxico

Poco corrosivo Su inhalación puede ser cancerígena
Irritante de la piel y las mucosas
Alto costo
No inactiva priones
Alcoholes
– Etílico e Isopropílico. Nivel intermedio.
– Concentración bactericida óptima 60-90%.
– Mecanismo de acción: desnaturalización de proteínas en
presencia de agua.
Bajo costo (etanol) Inflamables
Escasa actividad corrosiva Rápida evaporación
Útiles como vehículos de otros agentes Deshidratantes
químicos Endurecen los plásticos y las gomas
No dejan residuos tóxicos
Solución a preparar A partir de Vol.alcohol Vol.agua

Alcohol 70º Alcohol etílico 95º 760 mL 300 mL
Isopropílico 70º Alcohol isopropílico puro 700 mL 300 mL
• Metales pesados
– Mercurio, plata, cobre. Se usan en combinaciones químicas.
– Mecanismo de acción: inactivación de proteínas por unión al
ión metálico, interacción con grupos tioles.
– La plata ejerce efecto antimicrobiano en concentraciones
pequeñísimas.
– El nitrato de plata al 1 % es el mas usado en oftalmología para
evitar daño ocular por gonococos. Se usa también como
sulfadiazina o coloidal.
• Peróxido de hidrógeno
– Alto nivel.
– Mecanismo de acción: oxidación enérgica.
– Puede ser esterilizante por inmersión 30 min.
– Actividad limitada por materia orgánica y catalasas
bacterianas.
– Útil como antiséptico de heridas por remoción
mecánica y acción contra anaerobios
3% 10 vol
No es tóxico Es corrosivo
No deja residuos Es descalcificante 6% 30 vol
Bajo costo Destruye tejido vivo 30 % 100 vol

• Compuestos de amonio cuaternario
– Cloruro de Benzalconio, DG6. Bajo nivel
– Residuos aniónicos y proteínas reducen su eficacia.
– Mecanismo de acción: ruptura de membrana, inactivación de
enzimas productoras de energía, desnaturalización de
proteínas.
– Antisepsia de materiales no críticos.
No son corrosivos Se inactivan en presencia de
Se usan con propósitos de limpieza materia orgánica
Son tóxicos
• Detergentes
– Disminución de la tensión superficial
– Efecto humectante y emulsionante.
• Detergentes aniónicos
– Jabones
– Higiene de piel y superficies ambientales
• Detergentes catiónicos
– Compuestos de amonio cuaternario
• Anfóteros (Tego; poca inactivación por materia orgánica)
• Soluciones enzimáticas
• Soluciones enzimáticas
– Predescontaminantes.
– Enzimas proteolíticas (estables hasta 60º)
– Técnica de la triple caja: 1) solución enzimática 2)
desinfectante 3) detergente biodegradable
Facilitan la limpieza La solución no elimina el poder
Disuelven sangre. Mucina infectivo
100 % biodegradables Alto costo
• Ácidos y álcalis
– Relacionado con el grado de disociación.
– Ácido sórbico y benzoico conservantes.
– Ácido bórico en sol. Aq. 4 % antiseptico.
– Ácido tricloroacético al 50 % cáustico
– Hidróxido de calcio utilizado en endodoncia
• Bisguanidas (clorhexidina)
– Muy usado en odontología
– Mayor sustantividad.
– Se usa como clorhidrato, acetato o gluconato.
– Inactivada por sangre y materia orgánica.
– Catiónico, mayor efectividad a pH 8, poco efectiva por debajo
de pH 5,2
– Mecanismo de acción: daño a membranas con perdida de
constituyentes de bajo peso molecular a bajas
concentraciones; coagulación de citoplasma a altas
concentraciones
• Antiséptico en lavado de manos, control de placa

bacteriana, enjuague de mucosas.
• No se deben almacenar mucho tiempo
• Se deben almacenar en envases de plástico.
Acción rápida sobre la Costo elevado que condiciona el
microbiota transitoria (15 seg) y uso en zonas específicas
residente (30 seg) Pigmentación dentaria
Adherencia sobre la piel Descamación
Bajo poder de sensibilización y Incompatible con jabones y
toxicidad detergentes aniónicos
Sustantividad
• Colorantes
– Tinción e indicadores. Medio selectivo.
– Mecanismo de acción: modificación del potencial
de óxido-reducción del medio.
– Mas activos contra grampositivos.
– Derivados de acridina y trifenilmetano (Verde
brillante y violeta cristal)
– Como antisépticos.
– Efectos cancerígeno.
Características Desinfectantes Antisepticos
Resistencia bacteriana a antisépticos y desinfectantes
Mecanismos de Resistencia Intrínseca de bacterias a antisépticos y desinfectantes
Tipo de Resistencia Ejemplo Mecanismo de resistencia

Bacterias Gram (-) Compuestos de amonio Membrana externa,
cuaternario, triclosan, glicocalix
diamidinas
Micobacterias Clorhexidina, Compuestos de Pared celular cerosa
amonio cuaternario,
glutaraldehido
Esporas bacterianas Clorhexidina, Compuestos de Revestimiento y pared de la
amonio cuaternario, fenoles espora
Bacterias Gram (+) Clorhexidina Difusión reducida

Inactivación (mediada Clorhexidina Ruptura de la molécula
por plasmidos
Resistencia bacteriana a antisépticos y
desinfectantes
Posibles mecanismos de resistencia codificada por plásmidos
Ejemplos Mecanismo
Clorhexidina Inactivación, Eflujo, Captación reducida
Compuestos de amonio cuaternario Eflujo, Captación reducida

Compuestos de plata Captación reducida
Formaldehido Inactivación (formaldehido
deshidrogenasa)
Acridinas Eflujo
Diaminas Eflujo
Cristal violeta Eflujo
Mercuriales Inactivación (reductasas)
Bromuro de etidio Eflujo
Bomba de eflujo
• Aspectos que deben tenerse en cuenta en desinfección y
antisepsia
– ¿qué es lo que hay que desinfectar?
– ¿qué procedimiento conviene utilizar?
– ¿cual es el nivel microbiológico que se quiere alcanzar?
– ¿cuál es la resistencia del agente microbiano?
– ¿cuál es el nivel químico que se quiere lograr?
– ¿qué nivel clínico posee el agente químico?
• Validación del proceso de Desinfección
– Confirmación la eficacia de una sustancia o de un
programa formal en la práctica de la desinfección.
– Proceso de obtención y confiabilidad del proveedor.
– Referencias bibliográficas del compuesto
– Factores que afectan la efectividad.
– Métodos de validación aprobados.
Control de Superficies
limpias
Bioluminiscencia - ATP
Tratamiento del Instrumental utilizado en la
práctica medica
1. Predecontaminación
2. Descontaminación
3. Limpieza
– Manual
– Mecánica
– Ultrasonido
4. Enjuague
5. Secado
6. Lubricación
7. Acondicionamiento
1. Propiedades de un envoltorio
2. Tipos de envoltorios
3. Cerrado y sellado de los paquetes
8. Esterilización
1. Por calor húmedo
2. Por calor seco
3. Vapor químico
9. Almacenamiento
• Validación
• Controles del proceso de esterilización
– Controles físicos
– Controles químicos
– Controles fisicoquímicos
– Controles biológicos
• Controles físicos
– Termómetro de máxima
– Manómetros
– Timer
• Controles químicos
– Controles químicos externos
– Controles químicos internos
– Controles químicos de funcionamiento
• Controles fisicoquímicos
• Controles biológicos • Formato
• Esporas bacteriana del género Bacillus – Tiras de papel
• B. stearothermophilus: autoclaves de impregnadas en
vapor de agua, compuestos químicos. esporas
– Frasquitos con
tierra
– Monitor biológico
completo
• B. subtilis var. niger: calor seco y óxido
de etileno.
• Residuos
– Ley de Residuos Peligrosos, No. 24.051.
• Decreto Reglamentario No. 831/93
– Ley de Residuos Patogénicos, No.11.347.
• Decreto Reglamentario No. 450/94
Bioseguridad
• Precauciones Universales
– Todo paciente debe ser tratado como si tuviera
una enfermedad.
– Técnicas de barrera
– Equipo de protección personal
– Técnicas de trabajo seguras
– No encapuchar ni envainar ningún elemento
cortopunzante.
Bioseguridad
• Siempre tener a mano soluciones desinfectantes para
contención y desinfección de derrames y salpicaduras.
• Contar con toda la inmunoprofilaxis disponible. Ley
24181 vacunación HBsAg.
• Cuidar de establecer áreas y circuitos limpios.
• Precaución de no contaminar las áreas limpias.
• Considere las medidas de precaución antes de la práctica
profesional, durante la práctica y después de la práctica.
Hasta acá llegamos….

Control de Microorganismos - Medicina - 2019

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– Su actividad debe producirse de preferencia en

Acción Efecto Naturaleza

Combinación de radicales de proteínas y

Oxidación de distintos compuestos

– Bacilos ácido-alcohol resistentes

– Vapor fluente con o sin presión

– Vapor con presión en autoclave

– Flameado o fuego directo

– Estufa de calor seco o esterilizador de aire caliente

• Métodos por frío

– Ultravioletas: Dependen de la intensidad de la

• Fenol y derivados fenólicos

Alto nivel antimicrobiano Es tóxico

Solución a preparar A partir de Vol.alcohol Vol.agua

Bajo costo Destruye tejido vivo 30 % 100 vol

• Antiséptico en lavado de manos, control de placa

Tipo de Resistencia Ejemplo Mecanismo de resistencia

Bacterias Gram (+) Clorhexidina Difusión reducida

Compuestos de amonio cuaternario Eflujo, Captación reducida

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