Frotis sanguíneo

T.M Ana Ojeda S.

T.M Cinthya Concha H.
Objetivos

➢ Conocer las características de un frotis sanguíneo

➢ Aprender las distintas tinciones de un frotis sanguíneo
¿Qué es un frotis sanguíneo?

Es una delgada y homogénea extensión de sangre sobre un

portaobjetos, de tal manera que las células se dispongan
formando una sola capa.
Considerar para un buen frotis

● Ángulo de 45°
● Velocidad constante y homogénea.
● Hematocrito:
○ A mayor hematocrito menor ángulo (< 45°)
○ A menor hematocrito mayor ángulo (> 45°)
¿Cómo se realiza?

● En un portaobjetos colocar una gota de sangre en uno de

sus extremos
● Poner un cubreobjetos delante de la gota hasta que entren
en contacto y permitir que se desplace la sangre hacia
las esquinas
● Con un movimiento rápido y homogéneo extender la gota en
el portaobjetos
● Dejar secar y rotular con letra grande y legible sobre la
sangre (cabeza del frotis)
Zonas del frotis
Extensiones que no sirven

● Extensión corta y gruesa.

● Extensión larga y fina.
● Extensión con estrías
transversales.
● Extensión con estrías
longitudinales.
● Extensión con zonas sin
sangre.
● Extensión con extremos muy
deflecados.
Tinciones de frotis sanguíneo
Tinción de May-Grünwald Giemsa (MGG)

Tinción de tipo Romanowsky que se basa en la afinidad

tintorial de los colorantes utilizados, siendo estos básicos
(Azul de metileno) o ácidos (Eosina), con los elementos
celulares de la sangre.
Materiales necesarios

● Pipeta
● Metanol
● Cronómetro
● Buffer fosfato o agua neutra
● Colorante May-Grünwald
● Colorante Giemsa
● Cubetas de tinción o gradilla
Procedimiento
Tinción Wright-Giemsa

Materiales: Procedimiento:
1. Fijar la muestra con metanol por 5
● Metanol minutos y dejar secar.
● Colorante Wright 2. Cubrir con colorante Wright por 2
● Colorante Giemsa minutos.
● Agua destilada 3. Mezclar agua destilada y colorante
● Ácido acético 0,5% Wright en partes iguales, y dejar
● Pipeta actuar por 2 minutos.
● Gradilla o cubeta
4. Enjuagar con agua.
de tinción
5. Teñir con Giemsa por 1 minuto.
6. Enjuagar con agua y luego con
ácido acético al 0,5%
7. Dejar secar en soporte.
Tinción panóptica (tinción rápida)

Tinción de tipo Romanowsky que se basa en la tinción MGG,

sin embargo su procedimiento consiste en inmersiones
directas en los colorantes y fijador.

Materiales: Procedimiento:
1. Sumergir 5 veces el frotis durante 1 segundo
● Metanol en el fijador y dejar escurrir
● Eosina 2. Sumergir 5 veces el frotis durante 1 segundo
panóptica en Eosina panóptica y dejar escurrir
3. Sumergir 5 veces el frotis durante 1 segundo
● Azul de
en azul de metileno panóptico y dejar
metileno escurrir
panóptica 4. Enjuagar con agua y dejar secar
Tinción de reticulocitos.
¿Qué son los reticulocitos?

Son glóbulos rojos inmaduros, que aún poseen cierta cantidad

de ARN. Estos indican la actividad de la médula ósea,
permitiendo la clasificación de anemias según la cantidad de
reticulocitos presentes en sangre periférica.
Tinción de Reticulocitos

Fundamento: Los restos de ARN presentes en estos GR

inmaduros se tiñen con colorantes vitales como azul cresil
brillante y azul de metileno.
Tinción de Reticulocitos

Materiales: Procedimiento:

● Tubo khan 1. En un tubo khan poner 3 gotas

● Baño termorregulado de la muestra y 3 gotas de
● Pipeta pasteur azul cresil brillante, y
● Colorante azul cresil homogeneizar
brillante o azul de 2. Poner en baño termorregulado
metileno
a 37°C por 10 minutos
● Muestra sanguínea con
3. Realizar al menos 2 frotis y
EDTA
dejar secar
Bibliografía

1. https://www.ispch.cl/sites/default/files/RECOMENDACIONES%
20PARA%20LA%20TINCI%C3%93N%20DEL%20FROTIS%20SANGU%C3%8DNE
O.pdf
2. https://www.itwreagents.com/download_file/ce_ivd_instruct
ions/CEIVD23/es/CEIVD23_es.pdf