RECUENTO DIFERENCIAL DE

LEUCOCITOS.
Requiere realizar un frotis, tinción Wright y
conteo.
Su finalidad es diferenciar los leucocitos, así
como reportar la presencia de células en la
sangre que deberían estar en la médula ósea.
EXTENDIDOS DE
SANGRE.

• Cabeza con margen

de 1.5 a 1.9 cm.

• Borde de la cola
finamente
deshilachado
(barbas).

• Extensión fina y
homogénea.

• ¾ partes del
portaobjetos.
ERRORES EN LOS
FROTIS.
 FROTIS IDEAL.

Se visualizan dos neutrófilos

y un monocito, rodeados de
eritrocitos.
TINCIÓN DE WRIGHT.

 El colorante está compuesto de azul de metileno en un 50-75% (que tiñe de azul

las partes ácidas de las células) y eosina (tiñe partes alcalinas), disueltos en
metanol (permite fijación de células).

 Tiñe el núcleo de púrpura, dejando el citoplasma ligeramente azulado.

 Dada la presencia de metanol, no requiere fijación antes de la coloración.

 En caso de no teñir el mismo día el extendido, fijar para evitar deterioro del frotis.
 La sangre cambiará de rojo a café claro si se fija con alcohol metílico.
MATERIALES PARA REALIZAR
TINCIÓN.

 Frotis sanguíneo.
 Puente de tinción.
 Colorante de Wright.
 Solución buffer pH 7,2.
 Piseta.
 Cristalizador o vertedero.
 Pipeta Pasteur.
 Tubo de ensayo.
 Cubre objetos.
 PROCEDIMIENTO.
1. Se coloca el puente de tinción en el cristalizador o en un vertedero con el frotis encima.
2. Se cubre de colorante Wright utilizando una pipeta Pasteur. Esperar un minuto, escurrir y
enjuagar con solución buffer.
3. Dejar secar verticalmente.
4. Mezclar en un tubo de ensayo 0.5 ml de Wright y 0.5 ml de solución buffer.
5. Aplicar en la muestra y deja actuar de 3 a 5 minutos.
6. Escurrir exceso de colorante y enjuagar con agua destilada.
7. Lavar de nuevo con solución buffer.
8. Escurrir y dejar secar verticalmente de nuevo.
9. Finalmente, colocar cubre objetos una vez haya secado.
Colorante Wright (1 Mezcla de Wright y solución
minuto). tampón (3-5 minutos).
 RESULTADOS DEL FROTIS.
 Núcleos de leucocitos en azul púrpura, con cromatina y paracromatina
diferenciadas.
 Gránulos de neutrófilos en lila o violeta
 Gránulos eosinófilos en rojo-naranja.
 Gránulos basófilos, púrpura-azul oscuro.
 Citoplasma de linfocitos azul claro.
 Citoplasma de monocitos ligero azul.
 Hematíes en rosa y plaquetas lila oscuro.
 CONTEO DIFERENCIAL EN MICROSCOPIO.

 Requiere un esquema ilustrado de los cinco tipos de leucocitos distintos.

 Colocar frotis sanguíneo sobre la platina del microscopio. Enfocar directamente con el
objetivo de 100x (inmersión).
 Contar 100 leucocitos y anotar el número correspondiente de neutrófilos, basófilos,
eosinófilos, linfocitos y monocitos.
 Para obtener las cifras absolutas, transformar la cifra porcentual de cada tipo de leucocito,
tomando como número total al cien.
VALORES NORMALES

 Neutrófilos 60-70%,
 Eosinófilos 2-4%,
 Basófilos 0,5-1%,
 Linfocitos 20-25%
 Monocitos 3-8%.