PRACTICA 5: FROTIS SANGUINEO

OBJETIVO:

Que el alumno adquiera habilidad para realizar un frotis adecuado con la técnica de tinción de
Wright.

FUNDAMENTO:

El frotis de sangre es importante porque se usa para diagnosticar y vigilar muchas afecciones,
como trastornos de la sangre, insuficiencia renal repentina y el tratamiento de ciertos cánceres.

¿Qué es el frotis sanguineo?

Consiste en la extensión de una gota de sangre sobre la superficie de un portaobjetos o de un

cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente al microscopio.

¿Para qué se usa?

El frotis de sangre se usa para diagnosticar y vigilar muchas afecciones, como trastornos de la
sangre, insuficiencia renal repentina y el tratamiento de ciertos cánceres.

¿Qué es la tinción de tinción de Wright?

Un frotis o extendido sanguíneo se hace con la finalidad de teñir las células sanguíneas con
colorantes policromatófilos y poder detectar alteraciones morfológicas de los eritrocitos. De igual
manera es posible identificar leucocitos (glóbulos blancos) con base a afinidades tintoriales o
morfológicas.

La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky que da una

coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos y da color
rosado a los eritrocitos permitiendo suministrar un medio para estudiar la sangre y determinar las
variaciones y anormalidades de estructura, forma y tamaño de los eritrocitos, su contenido de
hemoglobina y sus propiedades de coloración.

Las tinciones de Wright-Giemsa se obtienen mediante la mezcla de colorantes básicos (azul de

metileno), que se tiñen de color azul, y colorantes ácidos (eosina), que se tiñen de color
rojo.
Colorante Carácter de la
estructura celular que Tipo de celula Color
tiñe
Acido Básico Eosinófilos Rojo
Básico Acido Basófilo Azul
Ácido y básico Neutro Nuetrófilo Violeta

¿Dónde se hace la punción capilar?

Se punza la piel del dedo en los lados, el talón en los lados u otra zona con una aguja afilada o
una lanceta.

Puede ser en la piel de un dedo de la mano o en el lóbulo de la oreja, y en caso de los bebes se
hace en el talón a los lados

PUNCION CAPILAR: PROSESO

MATERIAL:
  Torundas
  Lancetas desechables y estériles
  Tubos capilares

1.-Localizar el dedo donde se realizará la punción y aplicar un masaje en el área, para concentrar
la sangre.

2.-Con ayuda de algunas torundas limpiar y desinfectar el área a puncionar.

3.-Con una mano tomar el dedo a puncionar y con la otra tomar la lanceta y punzándola con un
movimiento rápido, firme y profundo.

4.-Despues de puncionar, descartar la primera gota de sangre, limpiando la zona con la torunda.

5.-Presionando el dedo para que la sangre vuelva a salir, tome el tubo capilar, tapándolo de un
extremo con su dedo y al momento de acercarlo a la gota de sangre, destápelo para poder extraer
la muestra, llenando aprox. ¾ del tubo con la sangre, sin dejar burbujas de aire dentro del tubo.

6.-Una vez extraída la muestra, selle el tubo por ambos extremos utilizando plastilina.

7.-Por último, con otra torunda limpie la zona punzada del dedo y presiónela con esta para parar el
sangrado.

MATERIALES: FROTIS SANGUINEO

1) 2 portaobjetos de vidrio
2) aceite de inmersión
3) muestra de sangre
4) microscopio

FROTIS SANGUINEO: PROSESO

1) En un portaobjetos (el portaobjetos de muestra), coloque una pequeña gota de sangre

2) Utilice la segunda diapositiva como una diapositiva "esparcidor".

3) Coloque el extremo del portaobjetos del esparcidor en el portaobjetos de muestra de modo que
el borde del lado corto del esparcidor quede debajo de la gota de sangre.

4) Sostenga la corredera del esparcidor en un ángulo de 30o al 8o (en relación con el portaobjetos
de muestra) y lleve el portaobjetos esparcidor hacia atrás contra la gota de sangre para que la
sangre se extienda en una línea delgada a través de la acción capilar.

5) Rápida pero suavemente, arrastre el portaobjetos esparcidor a lo largo de todo el portaobjetos

de muestra con un movimiento fluido.
6) Si la técnica se realizó correctamente, el frotis debe terminar antes del final del portaobjetos de
muestra en un "borde emplumado".

7)    Seque al aire el portaobjetos de muestra. Arregla y tiñe el portaobjetos.

MATERIALES DE LA TINCION DE WRIGTH:

 Frotis sanguíneo
 Colorante metanol
 Emocolorantes
 Agua destilada
 Un recipiente o una tarja
 Varillas de vidrio
 Piseta

 Después de la tinción cuando se analiza el frotis se utiliza un microscopio

TINCION DE WRIGTH: PROSESO

Tinción: PRECAUCIÓN: El colorante de Wright se prepara con metanol, que es una sustancia muy
tóxica que puede causar daño al nervio óptico. Se debe evitar la ingesta y exposición por vía
cutánea.

• Se colocan dos varillas de vidrio en forma paralela una a la otra sobre la tarja del laboratorio o
una charola.

• Se colocan los frotis sobre las varillas.

• Se agrega el colorante de Wrigth o colorante metanol de manera que el frotis quede

completamente cubierto, se deja reposar por 5 minutos
• Se agrega, mediante una piseta, solución amortiguadora o emocolorante de manera que se
forme una capa metálica. Se debe tener cuidado de no derramar el colorante fuera del frotis. Se
deja reposar durante 10 minutos.

• Durante el tiempo de reposo, utilizando una pipeta se sopla suavemente dos o tres veces sobre
la superficie del frotis para mezclar el colorante y la solución amortiguadora o emocolorante.

• Se lava el frotis con agua corriente hasta el eliminar el exceso de colorante.

• Se deja secar la preparación al aire.

• Se examina el frotis al microscopio utilizando primero el objetivo de 40 X con la finalidad de

observar la distribución de células en la superficie. Se selecciona un área en la que exista una capa
sencilla de células y los eritrocitos estén separados unos de otros.

• Se coloca una gota de aceite de inmersión en la zona elegida y empleando el objetivo 100 X se
observa la preparación.

• Se observa el tamaño, forma, color y presencia de inclusiones en los eritrocitos.

• Utilizando la guía de observaciones que se muestra a continuación ,es posible distinguir otras
células sanguíneas en la preparación.
FUENTES:

https://vetgirlontherun.com/es/veterinary-continuing-education-how-to-make-blood-smear-
veterinary-vetgirl-blog/

https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Wright

https://www.msdmanuals.com/es-mx/professional/multimedia/image/tinci%C3%B3n-de-wright-
giemsa-de-frotis-de-sangre-perif%C3%A9rica#:~:text=Las%20tinciones%20de%20Wright
%2DGiemsa,se%20ti%C3%B1en%20de%20color%20rojo.

http://www.ete.enp.unam.mx/IntroAnaCl.pdf

https://www.youtube.com/watch?v=ksAplYiF3Io

https://www.youtube.com/watch?v=WRJ2nqbC9LE