Universidad del magdalena

Facultad de ingeniería
Programa de ingeniería agronómica

SISTEMA DE PREPARACIÓN
DE MEDIOS
DE CULTIVOS
 Conocer los diferentes medios de cultivo.
Describir la preparación adecuada de los medios de cultivo en el laboratorio de
microbiología.
Identificar los contribuyentes habituales utilizados en la práctica.

En microbiología el aislamiento y cultivo de microorganismo es

indispensable para el análisis y experimentación con estos, por ende, se
aplican distintos métodos de cultivo aislando al microorganismo del
hospedador y brindándole los recursos necesarios para que este crezca sano
y en estado puro. El uso de los medios de cultivo remota desde finales del
siglo XVIII cuando los primeros bacteriólogos utilizaban carne, papas y
claras de huevo congeladas para el cultivo de microorganismos (Anónimo,
2019).

El científico Alemán Albert Koch (1843 – 1910) fue el primero en cultivar y

aislar microorganismos de la sangre de un tejido enfermo e inyectándoselo a
otros animales de prueba. Él publicó su trabajo llamado “Investigaciones
sobre la etiología de las infecciones de las heridas” demostrando el ciclo de
vida del bacilo y afianzando la capacidad de los cultivos de dicho
microorganismo para producir la enfermedad (Gonzales, 2010). Con este
trabajo, la microbiología daría un gran aporte a la ciencia médica en el
estudio de enfermedades y Koch se afianzaría como uno de los padres de la
microbiología junto a L. Pasteur (1822 – 1895) gracias a su aplicación de
medios de cultivo bacterianos. (López, 2017).

El uso de medios de cultivo de microorganismos ha impactado positivamente

en el desarrollo y estándares de vida de la humanidad, brindando
fundamentales aportes que han forjado pilares tanto con microbiología
como en otras ciencias como la medicina, genética, química, entre otras.

Mdmadmin (2019) Afirma: los medios de cultivos son importantes en la microbiología general, agrícola y
demás porque permiten el crecimiento y el desarrollo puntual de los diversos microorganismos necesarios
para los diferentes sectores.
Teniendo en cuenta que los medios de cultivo son conjuntos de nutrientes, que crean los ambientes
necesarios para el desarrollo de los microorganismos por lo tanto la variedad de estos es tan magna que la
diversidad de medios de cultivo es enorme, no existe un medio de cultivo universal apropiado para todos
(Anónimo, 2021)
A continuación, se da una idea general sobre algunos de los integrantes tradicionales de los diferentes medios:
Según su consistencia donde se tienen los líquidos, semilíquidos y solidos; según su origen: Naturales,
semisintéticos y sintéticos; Según su uso: pueden ser selectivos y diferenciales (Koneman y dowel, 1989).

Por otra parte, los componentes frecuentes de los medios de cultivo son: peptonas, extractos, fluidos
corporales, sistemas amortiguadores, indicadores de pH, agentes reductores y agentes selectivos si el medio
que se trabaja es sólido este contiene agar (aulavirtual, 2021).

PEPTONAS: mezclas complicadas que presentan compuestos orgánicos que son nitrogenados y sales
minerales, que se consiguen por digestión enzimática o química de proteínas animales o vegetales.

EXTRACTOS: la preparación consiste en que algunos órganos o tejidos son extraídos con agua y calor y a
continuación se concentran hasta formar una pasta o un polvo.

FLUIDOS CORPORALES: Muchas veces es obligatorio completar a los medios de cultivo de algunos patógenos
algunas sustancias como sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo, para que se logre
conseguir un primer aislamiento del hospedador.

SISTEMAS AMORTIGUADORES: Para que se mantenga el pH dentro de una condición optima del crecimiento
bacteriano algunas veces es necesario dilatar con algunos componentes al medio de cultivo.

INDICADORES DE PH: Para poder detectar diferenciaciones en el pH por fermentaciones y de otros procesos,
se hace ineludible aplicar indicadores de ácido-base que lo indiquen correctamente.

AGENTES REDUCTORES: para poder crear medios de cultivos que permitan el desarrollo de los gérmenes
microaerófilos ò anaerobios se agregan estos agentes siendo los más usados como la cisteína y el tioglicolato.

AGENTES SELECTIVOS: La aplicación de ciertas sustancias a un medio de cultivo consigue convertirlo en

selectivo.

AGAR: Se utiliza como componente gelatinoso que da una solidez a los medios de cultivo que se trabajen
(aulavirtual, 2021).
 USOS
CAJA DE PETRI

Instrumento utilizado para aislar materiales biológicos.

Generalmente de Vidrio o plástico transparente.

cinta de enmascarar
y lápiz de cera

La cinta de enmascarar y el lápiz de cera se utilizan para

identificar el material con el cual se esta trabajando y
evitar confusiones.

matraz de erlenmeyer

Utilizado para contener líquidos con el cual se va a

trabajar en el laboratorio.

gradilla

Utilizados para almacenar y sostener los tubos de ensayo.

espátula
Utilizada para tomar pequeñas cantidades de un
compuesto en polvo

pipetas

Utilizadas para medir líquidos con precisión y transferir

de un recipiente a otro

tubos de ensayo con

tapa rosca

Utilizados para almacenar pequeñas muestras liquidas

o solidas
 equipos
autoclave

Es un recipiente a presión de metal que se utiliza para

esterilizar diferentes tipos de materiales en el laboratorio.

bascula

Instrumento utilizado para medir reactivos en polvo.

nevera

Se utiliza en el laboratorio para que las diversas

sustancias y fluidos se conserven en optimas condiciones.

estufa eléctrica

Se utiliza para esterilizar, secar los envases de vidrio y

metal que se manejan en el laboratorio.

incubadora

Se utiliza para mantener y cultivar microorganismos o

cultivos celulares. Mantiene la temperatura, la humedad y
otras condiciones en grado óptimo.

reactivos
agua destilada

Es utilizada como disolvente y medida higiénica

 Medios de cultivos
sólido

líquido
semi-solido

Los Medios de Cultivo son preparados estériles que

contienen sustancias necesarias para el desarrollo de los
microorganismos.

Medio D1 (Kado y Heskett)

NITRATO DE CLORURO DE FOSFATO ÁCIDO

MANITOL
SODIO LITIO DE POTASIO

SULFATO DE MAGNESIO AZUL DE AGAR

NITRATO DE CALCIO
HEPTAHIDRATADO BROMOTIMOL BACTERIOLÓGICO
TRETRAHIDRATADO
 ADVERTENCIA
Cuando se trabaje
con medios de
cultivo, debe usarse
una cámara de flujo
Cada equipo deberá realizar la preparación de un medio de cultivo laminar y encender
líquido (caldo tioglicolato) y solido [medios D1(kado y Heskett) el mechero para
agrobacterium] evitar
Se debe seguir estrictamente las instrucciones del fabricante. contaminaciones.

METODO DE CULTIVO SÓLIDO importante

Lavar bien las manos antes y
Pesar la cantidad necesaria según el volumen del medio de
después de haber terminado la
cultivo que se necesite, esta cantidad se obtendrá por medio de
practica de laboratorio.
una regla de 3, de acuerdo con las instrucciones de la etiqueta del
fabricante que contiene el producto a utilizar.

Esta cantidad se vierte en matraz Erlenmeyer y se le agrega agua

destilada.

Mezclar en la estufa eléctrica hasta ebullición.

Una vez haga ebullición se retira con cuidado de la hornilla eléctrica PARA RECORDAR
y se cubre el matraz Erlenmeyer con papel de aluminio y este se Al laboratorio no debe
llevará a la autoclave (15 libras de presión y 121 °C) durante 15 ingresar ningún accesorio
minutos. como: aretes, relojes,
cadenas, celulares y
ningún otro elemento que
Pasados los 15 minutos se retira y se deja enfriar para verter el no haga parte de la
contenido en cajas estériles de Petri para dejar solidificar a indumentaria de la
temperatura ambiente y se incuba a esta misma temperatura por 48 práctica.
horas.

ATENCIÓN
METODO DE CULTIVO LÍQUIDO
En caso de algún accidente ubicar las
Para la preparación del medio de cultivo líquido, se seguirán los
rutas de evacuación y puntos de
pasos anteriores (1-6) excepto que estos no se verterán en cajas de
encuentro.
Petri, en su lugar se almacenarán en tubos de ensayo o en el mismo
matraz Erlenmeyer.
 PREGUNTAS ORIENTADORAS

1.¿Por qué son importantes los medios de cultivo para microbiología?

Porque permiten el crecimiento y desarrollo en condiciones favorables de los microrganismos,

debido a los nutrientes que estos contienen.

2.¿Cuál es la clasificación de los medios de cultivos según su consistencia?

Líquidos, Solidos y Semisólidos.

3.¿Mencione 5 medios de cultivo selectivos y diferenciales más comunes en un

laboratorio de microbiología?
Agar EMB o Eosina Azul de metileno, Mac Conkey, Chromocult, Agar sangre y Agar cetrimide.

4.¿Cuáles son las propiedades de los medios de cultivo?

Humedad, PH, Esterilidad y Fertilidad.

5.¿Cuál es la principal función de un medio de cultivo selectivo?

La función principal es seleccionar el crecimiento de un microorganismo sobre determinado

medio.

BIBLIOGRAFIA