Integrantes :María Guadalupe Domínguez Pérez

Bryan Alfredo Linares Martínez

Gabriela Rodríguez Salazar
Carolina Osornio Botello

Microbiología y Parasitología
Universidad Cuauhtémoc de Querétaro.

Practica No.2
“Elaboración de medios de cultivo y técnicas de sembrado”

Observaciones y resultados:

En esta imágen podemos ver los resultados de las siembras que se hicieron,
utilizando la técnica de siembra por estría cruzada en caja.

Los resultados se pueden ver muy fácil ya que se distinguen los cambios de color y
de las texturas del agar.
Aquí podemos ver como se tiene que esterilizar el asa para poder tener los
resultados deseados sin mezclar las bacterias.

En estas imágenes se puede observar los tubos con agar ya con siembra, la
técnica fue siembra por zigzag.

Cuestionario:

1. ¿Qué asegura la esterilización por calor húmedo durante un tiempo de 15 min. a 121 °C?

El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus

proteínas celulares. Uno de los principales métodos de la esterilización con calor
húmedo es la esterilización por vapor a presión comúnmente en un autoclave en la
cual se alcanzan las temperaturas de 121° C para la esterilización por 15 min.

2. ¿Qué características de un material o sustancia se requieren conocer para elegir el método

adecuado de esterilización? Dar algunos ejemplos.

 En la clasificación de los métodos de
Agente
esterilización se manejan 3 diferentes tipos de s
No
Agentes GasQuímic
Gas
físicos eos os
Óxido eoso
Ald
Radia os
Calor de s Pero
ehi
ciones
etilen dos
xido
Húme o Ácid
Seco de
do o
hidro
esterilización las cuales son por: pera
geno
cétic
o
3. ¿Cuál es la diferencia entre esterilización, desinfección y asepsia?

Una desinfección se aplica sobre objetos con ayuda de desinfectantes y

también sobre tejidos vivos. Mientras que una esterilización es la desinfección de
toda forma de vida, aniquilando todo microorganismo ya sean patógenos o no
patógenos.Y por último la asepsia es una acción que se consigue con la
esterilización de una manera correcta y es toda ausencia de germen y de
cualquiera de sus formas de resistencia.

4. Mencionar otras dos técnicas de aislamiento en medio sólido y comparar con la técnica de

estría cruzada.

Técnica de estría cruzada: Se coloca la muestra y se realiza un barrido con

un asa de inoculación hasta lograr separar colonias individuales de la cepa de
interés.

- Por diseminación en superficie: agotamiento de ansa, depósito y posterior

quemado y dilución
- Por mezcla

5. Investigar la clasificación química, utilidad e interpretación de cada medio de cultivo usado en

esta práctica.

Agar nutritivo

Composición/Ingrediente (g/L)

Peptona 5.0

Extracto de carne 3.0

 Gelatina 120.0

Agua destilada cpb 1L

Nutrient Agar se utiliza para el cultivo de bacterias y para el recuento de

organismos en agua, alcantarillado, heces y otros materiales.

Caldo Nutritivo

Composición/Ingrediente (g/L)

Peptona de caseína 5.0

Cloruro de sodio 8.0

Extracto de carne 3.0

Agua oxigenada cpb 1L

Se puede utilizar para el cultivo y la enumeración de bacterias que no son

particularmente exigentes.

Conclusión :
Gracias a esta práctica se logró utilizar y aprender algunos de los métodos que
existen para cultivar bacterias , de esta manera poder hacer uso del microscopio
para su visualización e interpretación de las mismas gracias a la inoculación
artificial de una porción de la muestra ,así como su técnica aséptica , seguimiento
cuidadoso de tal manera evitando accidentes como,
la contaminación y pérdida del cultivo en el laboratorio .

Se pudo deducir que en cualquier medio de cultivo es importantes ajustar el pH ya

que la mayoría de los microorganismo crecen mejor en pH neutro con esto
favoreciendo su crecimiento .Con este propósito durante la incubación se debe
proporcionar una temperatura acorde al crecimiento óptimo de los
microorganismos .

Bibliografía:
SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS. (s. f.). Microbiología.

Recuperado 30 de agosto de 2022, de

https://hopelchen.tecnm.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r130167.PDF
 Gutiérrez, S. (2001, octubre). MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. UCV.
Recuperado 30 de agosto de 2022, de
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/
10_M%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf

ASEPSIA Y ESTERILIZACION. (s. f.). Fetch. Recuperado 30 de agosto de

2022, de https://webs.um.es/mab/miwiki/lib/exe/fetch.php?media=g2.pdf

Practica No. 3
“Morfología Colonial y Tinciones”

Observaciones y resultados:

Este es el proceso que se estaba llevando para hacer la fijación de frotis a partir
de medio líquido.

En la imagen se ve que se estaba limpiando con agua destilada, es la técnica de

tinción de Ziehl-Neelsen.
Esta fue la otra fijación que se realizó, fue la fijación de frotis a partir de medio
Sólido.

Este es el resultado de la tinción y así se veía en el microscopio, en la primera

imágen del microscopio se puede observar staphylococcus y en la segunda se ve
la salmonella.

Estos son los resultados del medio líquido, la primera imagen es salmonella y la
segunda staphylococcus.

Cuestionario:

1. ¿Cómo se determina la textura de una colonia?

Los microorganismos aislados en un cultivo se identifican con base en sus

características como el tamaño, forma, aspecto y color de la colonia, etc. Estas
singularidades son fácilmente identificables en medios de cultivos sólidos o en
cultivos mixtos.

2. ¿Por qué es diferente la fijación de una muestra proveniente de agar sólido en comparación con

un medio líquido?

La diferencia es la concentración del agar: en el medio de cultivo sólido

contiene de un 1.5 a 2% de composición de agar-agar y el medio de cultivo líquido
es un caldo, no es agar-agar.

3. ¿Cuál es la diferencia entre tinción simple, diferencial y estructural?

- Tinción simple: El colorante utilizado sirve solo para denotar la morfología celular.

- Tinción diferencial: El colorante ayuda a diferenciar células bacterianas entre sí o

entre partes de una misma célula.

- Tinción estructural: El colorante ayuda a observar determinadas
estructuras de los organismos expuestos, tales como: cápsulas,
esporas, flagelos, etc…

4. ¿Cuáles son las desventajas de la tinción simple? Investigar otros colorantes utilizados para este

tipo de tinción además del azul de metileno.

- Cristal violeta
- Safranina

Son catiónicos y se combinan fuertemente con componentes celulares cargados

negativamente, como los ácidos nucleicos y los polisacaridos ácidos.

5. ¿Qué papel cumple el calentamiento en la tinción de Ziehl-Neelsen?

Provoca una re-solidificación de los ácidos grasos por lo que el

colorante ya no puede salir de las bacterias.
Conclusión:
Se pudo aprender la descripción de la morfología de las colonias y tener un perfil
de una especie bacteriana cultivable ,este puede ser muy variable ,en caso de que
sean por ejemplo puntitos ,se reportan que son puntiformes .
Se puede decir que las diferencias de los cultivos en relación del medio sólido al
medio líquido son diferentes ya que en el medio líquido las células no están
dispersa en un fluido con movimiento ,sino que se agregan formando colonias bien
definidas la cual se atribuye al crecimiento de las colonias en existencia de
gradientes de oxígeno, de nutrientes .
Además la morfología de las colonias dependen de medios ambientales como la
composición del medio ,la temperatura y porcentaje de humedad.
El análisis de la morfología bacteriana tiene dos enfoques ,a simple vista o
microscópica ,en el punto microscópico puede analizarse en función de las
características generales de la forma, de la elevación y el borde .

Bibliografía:
R, O. G. A. (s. f.). Diseño del Kit de Tinción Ziehl Neelsen del Instituto Nacional
de Higiene Rafael Rangel. Scielo. Recuperado 30 de agosto de 2022, de
http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-04772016000100003
UNIVERSIDAD TECNOLOGICA NACIONAL FACULTAD REGIONAL
ROSARIO DEPARTAMENTO DE INGENIERIA QUIMICA. (2009). Trabajo práctico
n° 4 “Tinción y observación de microorganismos.”CATEDRA DE BIOTECNOLOGIA.
Recuperado 30 de agosto de 2022, de
https://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/
practico4.pdf
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS UNIVERSIDAD NACIONAL
DE CÓRDOBA. (2015). GUIA DE ACTIVIDADES PRÁCTICAS MICROBIOLOGÍA
AGRÍCOLA. Microbiología Agrícola – F.C.A. U.N.C - 1. Recuperado 30 de agosto de
2022, de http://agro.unc.edu.ar/~microbiologia/wp-content/uploads/2014/04/Guia-de-
Trabajos-Practicos.pdf
Manual de prácticas de laboratorio Microbiología y parasitología