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RUIZ GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
INFORMES DE PRÁCTICAS
Micología General
ESTUDIANTE:
Odar Castillo Lucero Jasmín
PRACTICA # 1
I. OBJETIVOS:
Reconocer los distintos materiales de laboratorio utilizados en el Laboratorio de
Micología.
Manipulación de los distintos equipos utilizados a lo largo de las prácticas.
MATERIAL DE LABORATORIO
TUBOS DE DILUCION
PLACA DE PETRI
PROBETAS:
EQUIPO DE MICROCULTIVO
Consta de:
Placa Petri
Varilla de vidrio solido doblado
Lamina portaobjetos y laminilla cubre
objetos.
PIPETAS
EQUIPOS
MICROSCOPIO
MECHERO BUNSEN:
BALANZA ANALITICA
ESTUFA
Se utiliza para secado de sustancias y esterilización.
Alcanza temperaturas ente 250 y 300º C.
III. CONCLUSIONES:
MEDIO DE CULTIVO
I. OBJETIVO
Se pretende adiestrar al estudia te en la preparación de medios de cultivo.
Diferenciar los requerimientos del microorganismo por medio del uso de medios
de cultivo.
II. FUNDAMENTO
Un medio de cultivo son sustratos que semejan el nicho ecológico de los hongos y
que tienen la siguiente finalidad:
Permite observarlos a través de la formación de colonias
Permitir su aislamiento macroscópicas y microscópicas
Permite tenerlo en cultivo puro cepa“
Deben tener fuente de carbono proveniente de glucosa
Deben tener fuente de nitrógeno proveniente de peptona
De igual manera un pH (ligeramente ácido) y una temperatura adecuada en un
medio de cultivo son extremadamente importantes para el crecimiento de los
hongos.
Deben tener una fuente de carbono (suministrado por la glucosa) y una fuente
de nitrógeno (suministrado por la neopeptona)
La temperatura oscila entre 26- 28 ˚C, pero la mayor temperatura para hongos
es de 37 ˚C
El pH es 6,5(ligeramente acido)
Con una humedad adecuada
COMPONENTES:
Glucosa (2,0g)
Neopeptona (1,0g)
Agar(1,5g)
Agua destilada( 100ml)
AGAR PAPA DEXTROSA (PDA):
Se prepara con pulpa de papa como base y, al ser un medio muy pobre, se utiliza para
estimular el desarrollo in vitro de las estructuras de reproducción sexual de la mayor
parte de los hongos. También estimula la producción de pigmentos en hongos como por
ejemplo, T. rubrum. Se puede añadir zanahoria y bilis (para favorecer la obtención de
clamidosporas de Candidaalbicans) o glucosa/dextrosa (para
diferenciarTrichophytonrubrum).
COMPONENTES:
Papa (20g)
Glucosa (2g)
Agar (2g)
Agua destilada (100ml)
III. REACTIVOS Y MATERIALES:
REACTIVOS: PARA OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA:
ACLARANTES:
KOH al 10%
Lactofenol
COLORANTES:
Azul de algodón 1%(en sol. Acuosa)
MONTAJE (CONSERVACIÓN):
Azul de algodón
Lactofenol( azul de amamm)
1ml lact + 2ml de azul de algodón al 1%
EQUIPO DE MICROCULTIVO:
Placa de Petri
Varilla de vidrio acodada (A. de vidrio)
Laminas portaobjetos
Laminillas envueltas en un papel (que permitirá el aislamiento de los
hongos y para la obs. Microscópica)
Tubos de dilución
Microscopios
IV. PROCEDIMIENTO:
PREPARACIÓN DE AGAR SABOURAUD:
V. CONCLUSIONES:
Se aprendió a preparar correctamente el medio de agar papa dextrosa para hongos
y el ya conocido agar sabouraud.
PRACTICA N° 03
MONTAJE MICROSCOPICO
I. OBJETIVOS:
Realizar un montaje en fresco utilizando cinta adhesiva.
Familiarizarse con las estructuras microscópicas de los hongos
II. FUNDAMENTO
Por su tamaño microscópico, los hongos no pueden observarse a simple vista, a excepción
de los hongos macroscópicos que por su propio tamaño pueden ser observados
superficialmente sin equipos, siempre y cuando no se requiera estudiar detalles de las
esporas. Para su observación al microscopio compuesto, los hongos requieren ser
preparados y montados en portaobjetos. En estudios preliminares o de rutina se hacen
preparaciones temporales desechables, pero si se desea preservar especímenes por largo
tiempo es necesario elaborar montajes permanentes, los que de hacerse correctamente
duran uno o varios años en buenas condiciones
Los hongos constituyen uno de los grupos de organismos más importantes para la vida del
hombre, debido a que son los responsables de gran parte de la descomposición de la
materia orgánica aumentando su disponibilidad en el suelo; pueden ser comestibles,
venenosos o psicotrópicos; muchos son patógenos; otros, producen ciertas sustancias
beneficiosas o intervienen en procesos de elaboración de algunos comestibles.
Uno de las más sencillas para poder identificar hongos es por medio del examen
directo. El examen directo es una técnica gracias a la cual se puede distinguir entre las
diferentes estructuras de los hongos y así poder identificarlos Este examen se puede
realizar a partir de una muestra o de una colonia (cultivo).
III. MATERIALES:
Liquido de montaje (KOH 10%), para
hongos oscuros
Colorante Azul de algodón, para hongos
claros
Láminas y laminillas
Ansa micológica
Material biológico enmohecido
Microscopios
IV. PROCEDIMIENTO:
Colocar una gota de líquido de montaje en el centro de la lámina porta objetos,
Con el aza tomar una porción de micelio y depositarla en el líquido para montar,
finalmente cubrir con una laminilla y observar al microscopio con objetivo de 40x
V. RESULTADOS:
MUESTRA: Arverja
ESPECIE: Mucor
VI. CONCLUSIONES:
Se aprendió a dominar la técnica de examen directo de los hongos a partir de las
muestras utilizadas.
Se encontró los géneros Rizopus, Gliocadium y Fusarium.
PRACTICA N° 4
I. OBJETIVO:
II. FUNDAMENTO
Los hongos ambientales son safrofíticos, a estos hongos se les encuentra en el aire, en
el suelo y en el agua, ya que en ellos estos hongos encuentran los nutrientes necesarios
para su metabolismo. Hongos filamentosos pueden producir toxinas que se han
implicado en diversas enfermedades y síndromes clínicos en el ser humano y
animales. Son metabolitos nicóticos secundarios que originan enfermedades, conocida
de forma global como micotoxicosis, tras la ingestión, inhalación o el contacto directo
con la toxina. Los hongos contaminantes resultan un grave problema para el hombre.
Dentro de las setas cabe mencionar las que parasitan y pudren la madera, como
Coniophara o las comúnmente denominadas "orejas". Sin embargo, el mayor perjuicio
se obtiene de los hongos microscópicos, sobresaliendo los mohos que pueden atacar y
degradar.
III. MATERIALES:
IV. PROCEDIMIENTO:
Destapar la placa conteniendo el medio y exponerla en periodos de 2 o 3 minutos.
Tapar, incubar a 26 °C
V. RESULTADOS
Después de incubar la placa durante el lapso de 7 días se procedió a
seleccionar una colonia y luego se describió la colonia del cultivo del aire.
1. CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS:
- Aspecto: Esporulada la parte central de la colonia y aterciopelado el halo
- Color: negra la parte esporulada y blanco el halo.
2. CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS:
Micelio: Tabicado y
cenocítico
Esporas: Redondeadas
V. CONCLUSIONES:
CULTIVO PURO
I. OBJETIVO:
Lograr un cultivo puro a partir de un aislamiento primario
II. INTRODUCCION:
Los cultivos puros se obtienen habitualmente de cultivos mixtos (que contienen
varias especies), por métodos que separan las células de modo que, cuando se
multiplican, cada una formará una colonia distinta, que luego puede usarse para
establecer nuevos cultivos con la seguridad de que tendrán sólo un tipo de
organismo. Los cultivos puros se obtienen más fácilmente si el medio de
crecimiento empleado para el cultivo mixto original favorece el desarrollo de un
organismo con exclusión de otros.
III. MATERIAL
Cultivo fúngico obtenido en un aislamiento primario
Agar saoburoud en tubo solidificado en plano inclinado
Asa micológica
Mechero
Porta
Cubre
Liquido de montaje
Microscopio
IV. PROCEDIMIENTO
Elegir la colonia adecuada
Tomar el inóculo con el asa esterilizada
V. RESULTADOS
Evaluar las características macroscópicas y microscópicas
Características macroscópicas:
COLONIA 01:
Aspecto: Aterciopelado, crateriforme.
Color: negro
Características microscópicas:
VI. CONCLUSIÓN
TÉCNICA DE MICROCULTIVO
I. OBJETIVO
Realización del microcultivo con la finalidad de observar estructuras
completas del hongo
Las varillas evitan que la lámina portaobjetos haga contacto con el fondo de la caja
de Petri. Luego sobre el portaobjetos se coloca el medio de cultivo sólido. Con un
asa previamente flameada se siembra el hongo a analizar en el medio de cultivo,
después se cubre con la laminilla cubreobjetos, y se adiciona en el fondo de la caja
de Petri agua destilada estéril para mantener una atmósfera húmeda. Después se
procede a la incubación a la temperatura requerida y por el tiempo necesario.
III. MATERIALES
Cepa en estudio
Equipo de microcultivo
Liquido de montaje
Ansa micológica
Mechero
Microscopio
Agua destilada estéril
Agar saboraud glucosado en cuadraditos de 1cm de lado
Pinzas y espátula estériles
IV. PROCEDIMIENTO
Aspecto: algodonosa
Color: negro
CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS:
Miscelio: Tabicado y cenocítico
IV. CONCLUSIÓN
Se aprendió la técnica para el microcultivo de hongos y con esto se pudo
observar sus estructuras que coinciden con las características que se habían
definido.
PRACTICA N° 7
I. OBJETIVOS:
Preparar láminas para la observación microscópica de hongos, así como obtener
montajes semipermanentes.
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
Por su tamaño microscópico, los hongos generalmente no pueden observarse a
simple vista, a excepción de hongos macroscópicos que por su propio tamaño
pueden ser observados superficialmente sin aparatos, siempre y cuando no se
requiera estudiar detalles de las esporas, etc.
III. MATERIALES:
- Material de microcultivo.
- Líquido de montaje (Azul de aman o colorante)
- Lamina portaobjeto
- Esmalte transparente para uñas.
IV. PROCEDIMIENTO:
V. CONCLUSION:
Se obtuvo un montaje semipermanente y se pudo observar las estructuras
del hongo Aspergillus sp.
PRACTICA N° 08
I. OBJETIVO:
Aislamiento de Saprolegnia sp
III. MATERIALES
Agua estancada, obtenida en un frasco estéril
Anzuelo
Moscas muertas
Pinzas
Mechero
IV. PROCEDIMIENTO:
Sumergir el anzuelo en agua hirviendo y depositarlo en la muestra (agua
estancada), incubar a temperatura de laboratorio por una semana.
V. RESULTADOS:
Masa algodonosa alrededor de la muest ra.
VI. CONCLUSIONES
Se logró aislar con éxito a la Saprolegnia sp.
PRACTICA N°09
AISLAMIENTO DE PHITHOPHTORA
I. OBJETIVOS
Aislamiento de hongos Phytophtora
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
División Mastigomycota
Producen células flageladas, al menos zoosporas, presentan división nuclear céntrica (con
centriolos), su nutrición es por absorción, producen un micelio cenocítico en su mayoría,
su talo es unicelular o filamentoso y la reproducción es asexual por zoosporas.
Clase Chitridiomycetes
Clase Oomycetes
Orden Saprolegniales
Saprolegnia se encuentra en el orden Saprolegniales y pertenece finalmente a la Familia
Saprolegniaceae la cual tiene como características generales un miceliocenocítico muy
ramificado, una pared celular principalmente de glucanos, también de celulosa en la cual
aparecen septos para separar los órganos reproductores. Los zoosporangios son largos y
cilíndricos, terminales, de diámetro algo mayor que la hifa que los origina.
Phytophthora infestans fue el agente causante del tizón tardío de la patata que provocó la
gran hambruna de Irlanda entre 1845 y 1849 y que originó la extraordinaria emigración
de irlandeses a Estados Unidos. Las enfermedades en las plantas originadas por este
género son difíciles de controlar químicamente, por eso como estrategia contra ellas se
está extendiendo el cultivo de variedades resistentes.
Phytophthora es referido algunas veces como un organismo fúngico pero está clasificado
entre los protistas en el grupo denominado Oomicetes. Este es un buen ejemplo de la
evolución convergente: Phytophthora es morfológicamente muy parecido a los hongos
verdaderos (Fungi) aunque su evolución biológica es diferente. En contraste con los
hongos verdaderos, los Oomicetes están más relacionados con las plantas que con los
animales. Mientras las paredes celulares de los hongos están principalmente compuestas
de quitina, las paredes celulares de los Oomicetes lo están de celulosa.
Ciclo biológico de
Phytophthora
infestans
III. MATERIALES
Tierra de cultivo
Manzana en buen estado
Saca bocados
Agua destilada estéril
Cinta adhesiva
Algodón y alcohol
IV. PROCEDIMIENTO
Practicar 1 agujero en el mesocarpo de la manzana y en forma perpendicular de
1.5cm de diámetro, el agujero no debe atravesar la manzana.
Depositar la muestra en el cilindro dejando un vacio de 2cm, completar con agua
destilada estéril, sellar con papel celofán estéril.
Incubar durante 5 a 6 días a temperatura ambiente.
V. RESULTADOS
VI. CONCLUSIÓN
Si se logró aislar el objetivo de la práctica.
PRACTICA N°10
I. OBJETIVOS
Aislamiento de hongos queratinoliticos
II. FUNDAMENTO TEÓRICO
Los hongos queratinoliticos Viven en el suelo alimentándose de restos
queratina de animales. Aunque es raro, pueden presentarse como parásitos
del ser humano directamente o por medio de animales, produciendo tiñas
inflamatorias.
III. MATERIAL:
Tierra de jardín obtenida a 10cm de profundidad en una placa Petri esteril
Anzuelo
Cerdas de caballo de 2- 3 cm de tamaño
Agua destilada estéril
Pinzas estériles
IV. PROCEDIMIENTO:
Con la ayuda de una pinza estéril, mezclar de 5- 6 cerdas de caballo con la tierra
y al lado del mechero humedecer con agua destilada estéril, incubar a
temperatura de laboratorio durante 2 semanas
V. RESULTADO
VI. CONCLUSIÓN:
- Se logró observar hongos geratoliticos (christocecio) o queratinolitico