Centro de Bachillerato Tecnológico industrial y de servicios n.

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Bioquímica

Parcial 2

P3 “Enzimas: Demostración de la actividad de la Catalasa”

Equipo 9

Aceves Acosta Susana Ximena #1

Angulo Valenzuela Diva Norelly #6

Barceló Bórquez María Isabel #8

Chávez Leal Ana Victoria #10

Félix Ramírez Kamhila #13

Gerardo Razo Kennya Edith #20

6AMLC

Maestra: María Laura Vivas Franco

Cd. Obregón, Sonora a 19 de marzo de 2022

 Introducción

La enzima catalasa, es antioxidante en la mayoría de los seres aerobios, se

encuentra en mayor cantidad en los eritrocitos, por lo que es necesario la toma de muestra

sanguínea para la práctica.

La práctica realizada en equipo es una demostración de la actividad de la catalasa

en los eritrocitos, qué efecto tiene al añadir sustancias inhibidoras y al añadir calor.

Los inhibidores a utilizar son cianuro de sodio y nitrato de plomo. El material

biológico es sangre diluida en agua destilada y el peróxido de hidrogeno se utiliza para

efectuar la reacción, este es caustico y toxico.

La función de esta practica es observar las reacciones que se generan entre la

catalasa, los reactivos y el calor.

Es de gran importancia tener cuidado al manejar los reactivos para evitar lesiones,

al igual que se debe ser cuidadoso con el material biológico y asegurarse de desactivar la

muestra al final de la práctica.

 Marco teórico

La catalasa es una enzima que encuentra distribuida en numerosos tejidos y en

grandes cantidades en los eritrocitos. Su función es proteger a las células de la

peroxidación.

Es muy común en todos los seres vivos que sobreviven en oxigeno y cataliza la

descomposición del peróxido de hidrogeno, liberando agua y oxígeno. Es decir, la

Enzima transforma 2 moléculas de peróxido de hidrogeno (H2O2), el cual es toxico y

caustico para la célula, hasta 2 moléculas de agua (H›O), y una de oxígeno molecular

(O2). Un mg de enzima pura libera cenca de 3,000 litros de oxígeno por hora. Para poder

funcionar correctamente necesita de un pH y temperatura adecuados.

Es muy importante en los organismos patógenos, porque protege al organismo

del daño oxidativo de las especies reactivas del oxígeno y neutraliza la función

bactericida en el peróxido de hidrogeno.

La prueba catalasa es una prueba bioquímica en organismos aeróbicos para

detectar la producción de esta enzima en el organismo, se utiliza para la diferenciación

de organismos catalasa positivos como los estafilococos de especies catalasas negativas

como los estreptococos. Sin embargo, la practica a realizar consiste en demostrar la

actividad de la catalasa de los eritrocitos.

 Objetivo

Demostrar la actividad de la catalasa presente en los eritrocitos. Para lo cual observara el

efecto que tiene sobre la acción enzimática, la adición de substancias inhibidores y, la

desnaturalización enzimática por la acción de calor.

 Materiales

• 1 gradilla

• 6 tubos de ensayo grandes

• 2 pipetas de 5ml

• 1 mechero

• 1 tripie

• 1 tela asbesto

• 2 vasos de precipitado 250ml

• 1 pinza para tubo de ensayo

• 1 termómetro

• 2 pipetas de 1ml

• 2 frascos goteros

Reactivos

• Peróxido de Hidrogeno 30% purificado

• Cianuro de sodio al 8%

• Nitrato de plomo 5%

Material biológico

• Sangre diluida 1:50

 Método

El método utilizado para realizar esta práctica fue el método experimental, con el cual

podemos utilizar varios reactivos para observar diferentes reacciones de la catalasa e

inhibidores.
 Procedimiento

1. Enumerar 4 tubos de ensayo.

2. Al tubo 1, agregar 3 mil de sangre diluida, colocarlo en baño maría durante 10

minutos y enfriar con agua corriente para que adquiera la temperatura ambiente.

3. Agregar 2ml de peróxido de hidrogeno a los 4 tubos.

4. El tubo 2 se queda así y al 3 se le agregan 6 gotas de cianuro de sodio.

5. Agregar 6 gotas de nitrato de plomo al tubo 4.

6. Agregar sangre diluida a los tubos 2, 3 y 4.

7. Colocar las muestras en baño maría a 37° por 5 min

 Resultados.

Observación 1:

Los 4 tubos generaron mucha espuma, el 1ro en menor cantidad que los demás y el 2do

en mayor cantidad, debido a que no contenía inhibidores.

Observación 2:

Hubo muy poca reacción al poner las muestras a 37°, pero el cambio que se presento fue

gracias a que esta es la temperatura a la que la enzima actúa.

 Conclusiones

Aceves Acosta Susana Ximena #1

En esta práctica nosotros identificamos la catalasa que está presente en los eritrocitos me

pareció bastante interesante como el calor actúa en la desnaturalización enzimática, esta

práctica fue nueva para mí ya que nunca la había hecho y adquirí conocimientos de ella

y me gustó mucho, no tuvimos problemas en hacerla ya que la maestra nos apoyó en todo

momento y nos explicó cada proceso que realizamos.

Angulo Valenzuela Diva Norelly #6

Logre el objetivo de la práctica, más que nada observando la actividad de la catalasa al

reaccionar con los reactivos y lo que sucedía al usar el baño maría.

Al ser ayudante del cuarto de reactivos, tuve que poner el cianuro en un gotero, la verdad

si medio un poco de miedo ya que es peligroso, por eso use guantes durante el proceso.

Respecto a la práctica me pareció muy interesante que se generó espuma como reacción,

no creo que se hayamos tenido factores que pudieran alterar los resultados ya que

seguimos las instrucciones al pie de la letra. Sin duda para mí, fue un experimento el cual

me impresiono bastante ya que nunca había visto esa clase de reacción química.

Barceló Bórquez María Isabel #8

Gracias a la practica realizada pudimos observar la presencia de catalasa en los eritrocitos

y como reacciona al estar en contacto con el peróxido de hidrogeno. Fue de gran ayuda

para adquirir conocimientos incluso exteriores a la práctica, como lo es el uso de pipeta

y pipetor al igual que el baño maría

.
Chávez Leal Ana Victoria #10

Fue muy interesante observar la reacción y como se creaba la espuma sin dejarnos

terminar de echar la sangre correspondiente, esperaba que se cayera aún más. Fue muy

sencilla en especial por el apoyo de la maestra.

Félix Ramírez Kamhila #13

La practica me ayudo a comprender más que es la catalasa y donde se encuentra presente.

Fue muy interesante observar la reacción de todos los reactivos actuando y cómo al

aplicar calor seguía haciendo reacción. No hubo complicaciones gracias al apoyo de la

maestra y del equipo.

Gerardo Razo Kennya Edith #20

Esta practica fue algo totalmente nuevo para mí, fue de gran agrado el trabajo en equipo

y la ayuda que nos proporciono nuestra maestra. Me agrada mucho el poder conocer

nuevos términos y poder realizar una practica totalmente nueva para mí. En lo personal

no considero que hubo complicaciones.

 Referencias

Céspedes Miranda, Ela M, Hernández Lantigua, Ingrid, & Llópiz Janer, Niurka. (1996).

Enzimas que participan como barreras fisiológicas para eliminar los radicales

libres: II. Catalasa. Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas, 15(2)

Recuperado en 19 de marzo de 2022, de

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-

03001996000200001&lng=es&tlng=es.

Passen, M. (2021, 26 octubre). Prueba de catalasa: principio, procedimiento, tipos,

resultados, usos -. Martin Passen. Recuperado 18 de marzo de 2022,

dehttps://microbiio.info/prueba-de-

catalasa/#:%7E:text=La%20prueba%20de%20catalasa%20es%20una%20prueb

a%20bioqu%C3%ADmica,del%20per%C3%B3xido%20de%20hidr%C3%B3g

eno%2C%20liberando%20agua%20y%20ox%C3%ADgeno.
LISTA DE COTEJO PARA REVISIÓN DE REPORTES DE PRÁCTICAS IB

2022

Alumno o Nombres miembros del equipo Aceves Acosta, Angulo GRUPO: 6AMLC
Valenzuela, Barceló Bórquez Chávez Leal, Félix Ramírez, Gerardo Razo. Fecha: 19/03/2022

ACTIVIDAD Val OBSERVACIONES

Portada completa Logo de la institución
Nombre de Institución, N° y nombre de la práctica, nombre de la
materia, nombre de la maestra, grupo, completo de cada miembro
orden alfabético, lugar y fecha 1
Introducción (Debe decir de que trató la práctica, que método se
utilizó, para que es útil, entre otras) mínimo una cuartilla y referencia
bibliográfica.
Redacción en impersonal (importante considerar) 1
Objetivo 1
Material/es y reactivos (Presentar en listado) 1
Método (especificar el tipo de técnica seguido en el ensayo)
Experimental, Inductivo, Deductivo o Método Científico 1
Procedimiento (paso a paso lo que se realizó) Diagrama de Flujo 1
Resultados (tablas, fotos, esquemas, con su respectivo título)
Especificar si el resultado es cualitativo y cuantitativo.
Especificar en cada foto que es lo que se está mostrando (titulo) 1
Conclusiones personales (cada uno dar su aportación referente a la
práctica) si hubo complicaciones, cómo se resolvieron, si hubo cambios
o ajustes que puedan alterar el resultado 2
Bibliografía estilo APA.
Etiqueta del archivo solicitada
PX_Siglas de Practica_ Apellido(s) 1
Para su revisión debe cumplir con el estricto orden
Tipografía: Arial 12, texto justificado, interlineado sencillo, títulos en
negritas.
Anexar Lista de cotejo en la última hoja del trabajo
CALIFICACIÓN 10

LISTA DE COTEJO PARA LA PARTICIPACIÓN EN PRÁCTICA

PARAMETROS / PARTICIPANTES 1 2 3 4 5

Asiste puntualmente
Toma parte en el proceso
Conoce los pasos a seguir
Responde a preguntas
Maneja material de laboratorio correctamente (dadas
instrucciones)
Maneja equipo correctamente
Reflexiona los resultados obtenidos
Limpieza de su espacio de trabajo/ sin mochilas en mesa
Entrega material y equipo
Disciplina
Deja acomodadas las sillas y mesa de trabajo
Sin juegos/ distractores/ Celulares/ distractores