UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

CARRERA DE INGENIERÍA AGRICOLA MENCIÓN AGROINDUSTRIAL

INFORME DE LABORATORIO

PRACTICA # 2

TEMA:
FUNCIONAMIENTO DE CATALASA EN TEJIDO VEGETALES

INTEGRANTES:
DIEGO CRUZ
FREDDY LEMOS
ROGER PADILLA

DOCENTE:
ING. LUIS ZUÑIGA

ASIGNATURA:
ENZIMOLOGIA

SEMESTRE:
TERCERO ´´B´´

PERIODO:
2018- CICLO 2

GUAYAQUIL-ECUADOR
 1. Introducción:
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos
animales y vegetales.
La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el
metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el peróxido de
hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada).
Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se
soluciona el problema.
La catalasa es una enzima antioxidante presente en la mayoría de los
organismos aerobios.
Cataliza la dismutación del peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno.
La mayoría de estas enzimas son homotetrámeros con un grupo Hemo en
cada subunidad. Se ha determinado la estructura cristalográfica de nueve
catalasas. Algunas catalasas tienen subunidades pequeñas (masa molecular
=60KDa) y otras grandes (Masa moléculas >80 KDa).
Entre éstos dos grupos de catalasas existen diferencias estructurales
importantes. Las catalasas pequeñas son menos resistentes a la
desnaturalización, unen NADPH, tienen hemo b, y se inhiben e inactivan por
sustrato. En cambio, las catalasas grandes tienen un dominio extra en el C-
terminal que es semejante a la flavodoxina, son muy resistentes a la
desnaturalización, tienen hemo d, presentan enlaces covalentes inusuales
cercanos al sitio activo y son resistentes a concentraciones molares de
H2O2.En algunas especies de enzimas se contienemoléculas nicotinamín
adenín dinucleótido fosfatado en su forma reducida (NADPH) ligadas
estrechamente a la enzima, así se ha demostrado que la CAT humana entre
algunas y la de res, están ligadas a moléculas de NADPH, 1 en cada
subunidad y que no existe interacción directa entre el grupo hemo y NADPH.

2. Objetivos:
 Demostrar la actividad de la enzima catalasa presente en la papa,
espinaca y zanahoria
 Demostrar como diversos factores del medio pueden inactivar su
función

3. Materiales/Muestra/Procedimiento

● Materiales
 Pipeta
 Mortero
 Tubos de ensayo
 Vaso de precipitado
 Termómetro
 ●Muestra
 Zanahoria
 Papá
 Espinaca
 Limón

4. Procedimiento
1. Colocar en el vaso de precipitado un pedazo de papa, zanahoria y espinaca
de forma separada.
1. Colocar unas gotas de peróxido de hidrógeno a cada muestra.

2. Anotar los resultados

2. Cortar la papa en pedazos pequeños para que puedan ser introducidos en

tubos de ensayo
1. Rotular cinco tubos de ensayo del 1 al 5
2. Añadir pedazos de papa a cada tubo.
3. Mantener los tubos a las siguientes temperaturas:
Tubo 1 = 80 °C por 15 minutos
Tubo 2 = 37 °C por 15 minutos
Tubo 3 = Temperatura ambiente
Tubo 4 = En el congelador por 15 minutos
4. Al tubo 5 añadir zumo de limón hasta cubrir la muestra, esperar 15 minutos
5. Añadir 2 ml de peróxido de hidrógeno a cada tubo
6. Medir el tiempo aproximado transcurrido desde que se añadió el peróxido
hasta que comienza a producir burbujas, y anotar.

5. Resultados
Resultados de 5 tubos
Tubo 1 = 80 °C por 15 minutos Se notó reacción de la enzima.
Tubo 2 = 37 °C por 15 minutos Reacción inmediata de la enzima.
Tubo 3 = Temperatura ambiente Reacción inmediata de la enzima.
Tubo 4 = En el congelador por 15 Se notó reacción de la enzima.
minutos
Tubo 5= añadió zumo de limon La reacción tardó 3 a 4 segundos

6. Recomendaciones
 Seguir los pasos indicados en la guía de la práctica para obtener resultados
esperados.
 Configurar y establecer la temperatura indicada en la práctica, en el baño
María.
 Colocar la cantidad indicada de Peróxido de Hidrógeno en casa tubo y tener
el mayor cuidado al momento de manipularlos.
Bibliografía
Acuña, F. 2006. Química orgánica. EUNED. Costa Rica. 312.
Brown, T., Bursten, B. y LeMay, H.2004. Química.La ciencia central. Pearson.
México. 559-560
Anexo

1. Pelado de Papá 2. Agregando H202

3. Reacción de la enzima. 4. Colocando H2O2 en espinaca

5 Reacción de la enzima.