Facultad de Ciencias Médicas

LABORATORIOS

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

OBSTETRICI
X
CARRERA: MEDICINA ENFERMERÍA ODONTOLOGÍA A
FECHA: 27/06/2023 SEMESTRE: Primer HORA: 11:30-13:30

Anahí Belén Bonilla Rodríguez

DOCENTE: MATERIA: BCM

Actividad enzimática
TEMA DE LA PRÁCTICA:

I. INTRODUCCIÓN:

Las enzimas son proteínas funcionales las cuales son de suma importancia para todos los organismos
vivientes. A nivel bioquímico, las enzimas son catalizadores biológicos los cuales son capaces de
incrementar la tasa de una reacción química, mientras disminuyen la energía de activación necesaria
para poder llevar a cabo tal reacción. Las enzimas rápidas y eficientes además que no se degradan
después de cada reacción, de hecho, permanecen inactivas hasta comenzar un nuevo ciclo de
reacciones.

Para su funcionamiento correcto, las enzimas requieren de un sustrato, el cual va a ser reconocido por
la enzima con alta especificidad y afinidad, también necesitan de temperatura y pH óptimo para poder
trabajar sobre su sustrato. La variación de alguno de estos elementos puede alterar, mejorar o frenar
la reacción llevada a cabo por estas proteínas.

A nivel de función, las enzimas pueden unir dos moléculas, romper una macromolécula en pedazos
más pequeños, activar un componente bioquímico o desactivar un producto potencialmente dañino
para la célula. Esto quiere decir que las enzimas son altamente reactivas a un sustrato y a una
reacción por lo que cada una lleva a cabo un proceso distinto. Por ejemplo, en varios tejidos humanos
y de otros animales se encuentra una enzima llamada catalasa. Esta última es capaz de romper 2
moléculas de peróxido de hidrógeno (H2O2) en dos moléculas de agua (H2O) y un oxígeno (O2), es
decir, rompe un químico potencialmente tóxico en dos productos inofensivos.

En este laboratorio probaremos la actividad de la catalasa presente en hígado de pollo fresco, además
veremos cuales son los efectos del ambiente que pueden alterar el funcionamiento de la catalasa. Los
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resultados observados previo y posterior a cada reacción serán verificados, analizados y registrados en
forma de un informe de laboratorio.

II. OBJETIVOS:

Objetivo general
 Demostrar el funcionamiento enzimático y el efecto de la temperatura utilizando como modelo la
catalasa presente en el hígado de pollo

Objetivos específicos

 Reconocer la actividad enzimática de la catalasa en presencia de su sustrato

 Distinguir el efecto de la temperatura en la actividad de la catalasa

III. MATERIAL Y MÉTODOS:

Equipos
 Baño maría
 Termómetro
Materiales
 6 tubos de ensayo
 Pinzas para tubo de ensayo
 Pinzas para manipular la muestra
 4 vasos de precipitación de 250 ml
 Gradilla para tubos de ensayo
 Pipeteador automático

Material que debe traer el paralelo

 50 gramos de hígado de pollo o res
 1 frasco de agua oxigenada de 250ml
Material que debe traer cada grupo
 Marcador de vidrio y un marcador común
 1 hoja de bisturí
 1 pinza de disección
Material que debe traer el estudiante
 Mandil
 Gorro
 Guantes
Procedimiento. -

1. Cortar el hígado de pollo en 8 trozos pequeños de aproximadamente de 1 gr

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2. Enumerar 6 tubos de ensayo del 1 al 6

3. Introducir un pedazo de hígado de pollo en el tubo 1 y verter 2 ml de agua.

Observar la reacción antes y después de añadir el agua. Anotar el tiempo de
reacción, si corresponde.

4. Introducir un pedazo de hígado de pollo en el tubo 2 y verter 2 ml de Peróxido

de hidrógeno. Observar la reacción antes y después de añadir el peróxido de
hidrógeno. Anotar el tiempo de reacción, si corresponde.

5. En el tubo 3, introducir un pedazo de hígado de pollo y verter únicamente la

fase líquida del tubo 2. Observar la reacción antes y después de añadir el pedazo de
hígado. Anotar el tiempo de reacción, si corresponde.

6. En el tubo 4, introducir el pedazo de hígado del tubo 2 y verter 2 ml de

peróxido de hidrógeno nuevo. Observar la reacción antes y después de añadir el
Peróxido de hidrógeno. Anotar el tiempo de reacción, si corresponde.

7. En el tubo 5, introducir un pedazo de hígado de pollo y meter el tubo en a baño

maría en agua a 80°C por 5 minutos. Después de los 5 minutos sacarlo y dejarlo
reposar hasta que se enfríe. Una vez frío, verter 2 ml de peróxido de hidrógeno
fresco y observar la reacción antes y después de añadir el peróxido de hidrógeno.
Anotar el tiempo de reacción, si corresponde.

8. Introducir un pedazo de hígado de pollo en el tubo 6 y meter el tubo en hielo

por 5 minutos. Verter 2 ml de peróxido de hidrógeno frío y observar la reacción
antes y después de añadir el Peróxido de hidrógeno. Anotar el tiempo de reacción,
si corresponde.

IV. RESULTADOS:
Llenar la siguiente tabla usando gráficas y descripciones

Tubo Contenido del Hubo Explicación de lo

Observaciones
# tubo reacción si/no observado
1
2
3
4
5
6
7
8
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V. DISCUSIÓN:

i. Describir cómo funciona la catalasa (usando tus palabras identifica enzima, sustrato y
producto)

VI. CONCLUSIONES:

(Realizar una conclusión bien argumentada en base a cada objetivo específico propuesto y responda: ¿se
cumplió el objetivo principal? ¿Por qué?)

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Referencias

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-03001996000200001#:~:text=La
%20catalasa%20(per%C3%B3xido%20de%20hidr%C3%B3geno,y%20los%20ri%C3%B1ones%2C
%20m%C3%A1s%20baja

https://www.atsdr.cdc.gov/es/toxfaqs/es_tfacts174.html#:~:text=El%20per%C3%B3xido
%20de%20hidr%C3%B3geno%20puede,leve%20irritaci%C3%B3n%20de%20los%20ojos.

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-energetics/environmental-impacts-
on-enzyme-function/a/hs-enzymes-review#:~:text=La%20actividad%20enzim%C3%A1tica
%20puede%20verse,de%20unirse%20a%20un%20sustrato.

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-03001996000200001

VIII. CUESTIONARIO

 ¿En qué tejidos se encuentra la catalasa en el ser humano? ¿cuál es su función clínica?

La catalasa es una enzima que desempeña un papel importante en la protección de las células
contra el daño causado por los radicales libres, especialmente el peróxido de hidrógeno. En los
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seres humanos, la catalasa se encuentra en varios tejidos y células del cuerpo, principalmente
en:
Hígado: El hígado es una fuente rica de catalasa. Esta enzima ayuda a descomponer el peróxido
de hidrógeno, un subproducto del metabolismo celular, y evita que se acumule a niveles tóxicos.
Eritrocitos (glóbulos rojos): La catalasa también se encuentra en los glóbulos rojos, donde
ayuda a neutralizar el peróxido de hidrógeno que se forma como resultado de diversos procesos
metabólicos.
Células del sistema nervioso: Algunas células del sistema nervioso también contienen catalasa
para protegerlas del estrés oxidativo.
La función principal de la catalasa es descomponer el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua
(H2O) y oxígeno (O2). El peróxido de hidrógeno es un subproducto del metabolismo celular y
puede ser tóxico para las células en altas concentraciones. La catalasa, al catalizar la
descomposición del peróxido de hidrógeno, ayuda a prevenir el daño oxidativo a las células y
protege contra el estrés oxidativo.
Su función clínica, en la actividad de la catalasa puede ser evaluada en pruebas de laboratorio
para obtener información sobre la capacidad del organismo para combatir el estrés oxidativo.
Niveles anormales de catalasa podrían estar asociados con condiciones médicas que implican un
desequilibrio en el sistema antioxidante del cuerpo. Además, la catalasa y otras enzimas
antioxidantes juegan un papel en la investigación y comprensión de enfermedades relacionadas
con el estrés oxidativo, como algunas enfermedades neurodegenerativas.

 ¿Qué reacciones químicas son capaces de producir H2O2 como producto en el cuerpo humano?
(describir al menos una)

El peróxido de hidrógeno (H2O2) se produce como un subproducto en varias reacciones

químicas dentro del cuerpo humano. Una de las reacciones más comunes es la que involucra la
descomposición del superóxido (O2-) en peróxido de hidrógeno. Esta reacción ocurre en el
contexto de la cadena de transporte de electrones en la mitocondria, que es parte del proceso
de generación de energía en las células.

La reacción específica es la siguiente:

Generación de superóxido (O2-): O2+e−→O2−

Durante la respiración celular, los electrones que fluyen a lo largo de la cadena de transporte
de electrones pueden interactuar con el oxígeno molecular (O2) para formar el radical
superóxido (O2-). Este superóxido es una especie reactiva de oxígeno.

Conversión a peróxido de hidrógeno (H2O2): 2O2−+2H+→H2O2+O2

Los superóxidos generados pueden reaccionar con protones (H^+) para formar peróxido de
hidrógeno (H2O2). Esta conversión se realiza a través de una serie de reacciones enzimáticas y
químicas en el cuerpo. El peróxido de hidrógeno formado puede tener efectos biológicos
importantes. Por un lado, puede ser utilizado por la enzima catalasa y otras enzimas
antioxidantes para neutralizar su efecto tóxico. Por otro lado, en condiciones de estrés
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oxidativo, niveles elevados de peróxido de hidrógeno pueden contribuir al daño celular y al
envejecimiento.

 ¿Por qué el H2O2 es considerado tóxico?

El peróxido de hidrógeno puede ser tóxico si se ingiere, si se inhala o por contacto con la piel o
los ojos. Inhalar el producto para uso doméstico (3%) puede producir irritación de las vías
respiratorias, mientras que el contacto con los ojos puede producir leve irritación de los ojos.
Inhalar vapores de las soluciones concentradas (más del 10%) puede producir grave irritación
pulmonar.

 ¿Qué factores afectan al funcionamiento enzimático?

La actividad enzimática puede verse afectada por diversos factores, como temperatura, pH y
concentración.

Las enzimas funcionan mejor dentro de rangos de temperatura y de pH específicos, y bajo

condiciones que no son las óptimas una enzima puede perder su capacidad de unirse a un
sustrato.

 Temperatura: aumentar la temperatura generalmente acelera una reacción, y bajar la

temperatura la hace más lenta. Sin embargo, temperaturas extremadamente altas pueden
causar que una enzima pierda su forma (se desnaturalice) y deje de trabajar.

 pH: cada enzima tiene un rango óptimo de pH. Cambiar el pH fuera de este rango hará
más lenta la actividad de la enzima. Valores de pH extremos pueden causar la
desnaturalización de la enzima.

 Concentración de la enzima: aumentar la concentración de la enzima acelerará la

reacción, siempre que se disponga de sustrato al cual unirse. Una vez que todo el
sustrato esté adherido, la reacción deja de acelerarse, puesto que no hay algo a lo las
enzimas adicionales se puedan unir.

 Concentración del substrato: aumentar la concentración de sustrato también aumenta

la velocidad de reacción hasta un cierto punto. Una vez que todas las enzimas se han
adherido, cualquier aumento de sustrato no tendrá efecto alguno en la velocidad de
reacción, ya que las enzimas disponibles estarán saturadas y trabajando a su máxima
capacidad.
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Estos factores pueden interactuar de manera compleja y variar según la enzima específica y
el entorno celular. El entendimiento de estos factores es crucial para comprender y controlar
procesos biológicos y diseñar estrategias terapéuticas en el ámbito médico y biotecnológico.

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