UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE LOS ANDES

FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA PROFESIONAL DE ING. AMBIENTAL Y
RRNN

GUÍA DE LABORATORIO
CURSO: BIOQUÍMICA

DOCENTE: Mg. ANA IRINA CÁCERES VIZARRETA

NOMBRES Y APELLIDOS: Julio Gabriel Benavente Borda

FECHA: 26/05/2023 TEMA: Laboratorio Enzimas

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 INDICE
RESUMEN..............................................................................................................................2
INTRODUCCIÓN:.................................................................................................................2
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA................................3
EXPERIMENTACIÓN:..........................................................................................................3
Materiales e instrumentos.......................................................................................................3
PRIMERA ACTIVIDAD:.......................................................................................................3
SEGUNDA ACTIVIDAD:.....................................................................................................4
RESULTADOS:......................................................................................................................5
ANÁLISIS DE DATOS..........................................................................................................6
CONCLUSIÓN:......................................................................................................................8
INVESTIGA:..........................................................................................................................8

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RESUMEN

En este informe de laboratorio, se investigaron los factores que influyen en la actividad

enzimática utilizando la enzima catalasa. La catalasa es esencial para descomponer el
peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico producido durante el metabolismo celular.

En la primera actividad, se examinó el efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de

las enzimas. Se utilizaron tubos de ensayo con homogenizado de hígado y se midió el
tiempo de aparición de burbujas al añadir peróxido de hidrógeno a diferentes temperaturas.

En la segunda actividad, se estudiaron los factores que afectan el funcionamiento de la

catalasa utilizando muestras de papa, hígado y espinaca. Estas muestras fueron
homogeneizadas y se añadió peróxido de hidrógeno para observar las reacciones
resultantes.

Los resultados obtenidos proporcionaron información sobre los efectos de la temperatura y

los diferentes homogenizados en la actividad enzimática de la catalasa. Estos hallazgos
contribuyen a comprender cómo estos factores influyen en la eficiencia de la enzima y su
capacidad para descomponer el peróxido de hidrógeno.

INTRODUCCIÓN:

Las enzimas desempeñan un papel fundamental en las reacciones químicas que ocurren en
los seres vivos. Estas proteínas actúan como catalizadores biológicos, permitiendo que los
sustratos se conviertan en los productos necesarios para el funcionamiento celular. Una
enzima ampliamente presente en todos los organismos vivos es la catalasa, que
descompone el peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico generado durante el
metabolismo celular.

En el presente informe de laboratorio, se llevaron a cabo experimentos para investigar los

factores que influyen en la actividad enzimática, centrándose en la catalasa. Para ello, se
realizaron dos actividades experimentales. En la primera actividad, se examinó el efecto de
la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas. Se utilizaron tubos de ensayo con
homogenizado de hígado sometidos a diferentes temperaturas, y se midió el tiempo de
aparición de burbujas al añadir peróxido de hidrógeno.

En la segunda actividad, se investigaron los factores que afectan el funcionamiento de la

catalasa utilizando muestras de papa, hígado y espinaca. Estas muestras fueron
homogeneizadas y se añadió peróxido de hidrógeno para observar las reacciones
resultantes.

Los resultados obtenidos en estos experimentos proporcionarán información sobre los

efectos de la temperatura y los diferentes homogenizados en la actividad enzimática de la

3
catalasa. Esto permitirá comprender mejor cómo estos factores pueden influir en la
eficiencia de la enzima y su capacidad para descomponer el peróxido de hidrógeno.

A través de este informe de laboratorio, se presentarán los materiales utilizados, los

procedimientos experimentales realizados, los resultados obtenidos y se discutirán las
implicaciones de los hallazgos en relación con los factores que afectan la actividad
enzimática. Esto contribuirá a ampliar nuestra comprensión de la importancia de las
enzimas y sus mecanismos de funcionamiento en los sistemas biológicos.

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

Las reacciones químicas que se dan en los seres vivos no podrían tener lugar sin la presencia de las
enzimas. Las enzimas catalizan reacciones bioquímicas, permitiendo que los sustratos se conviertan
en los productos que necesita la célula. Una enzima que se encuentra en todos los seres vivos es la
catalasa, necesaria para descomponer el peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico, que se
produce durante el metabolismo celular.

EXPERIMENTACIÓN:

Materiales e instrumentos

● Peróxido de hidrógeno(H2 O2)

● Papa
● Espinaca
● Hígado de pollo
● Mortero y pilón
● Gotero
● Hielo
● Tubos de ensayos
● Gradilla

PRIMERA ACTIVIDAD:

Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas

1.- Rotule 5 tubos de ensayo del 1 al 5.

2.- Añadir 5 ml de hígado homogenizado a cada tubo.

3.- Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas:

Tubo 1= 80°C por 15 minutos

Tubo 2 = 37° C por 15 minutos

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Tubo 3 =Temperatura ambiental

Tubo 4= Hielo por 30 minutos

4.- Añadir 2 ml de peróxido de hidrogeno al tubo 1.

5.- Medir el tiempo transcurrido desde que se añadió el peróxido de hidrógeno hasta que se
comienzan a producir burbujas, y anotar en la tabla 1.

6.- Repetir el mismo procedimiento con los demás tubos.

7.- Grafique sus observaciones

SEGUNDA ACTIVIDAD:

Factores que afectan el funcionamiento de la catalasa.

a.- En el mortero triturar la papa, hígado y la espinaca por separado, utilizar agua destilada para
diluir las muestras.

b.-

Colocar
cada muestra en un tubo de ensayo.

c.- Usando un gotero, coloque 5 gotas de cada homogeneizado en una placa de vidrio y añadir 3
gotas de peróxido de hidrógeno.

d.- Realiza tus observaciones, gráfica y anota en la tabla 2.

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 REGISTRO DE OBSERVACIONES Y DATOS.

TABLA 1

Tubo Temperatura Tiempo que tardó en comenzar la reacción

1 80°C 27 min

2 37°C 35 min

3 ambiente 20 min

4 hielo 25 min

TABLA 2

Homogenizado Reacción al añadir el peróxido de hidrogeno

Agua se observa que al agregarle agua oxigenada la muestra poca reacción

por la falta de enzimas activas

Papa también se observa la reacción gracias a la presencia de enzimas

Hígado a temperatura ambiente se observa que tienen una mayor reacción a su

elevada concentración de enzimas

Espinaca pudimos observas la escasa reacción de enzimas con el agua

oxigenada ya que encuentran inactivas por la temperatura que se
encuentra

RESULTADOS:

Actividad enzimática de la catalasa a diferentes temperaturas:

- Tubo 1 (80°C): Se observó una disminución significativa en la actividad enzimática de la catalasa.

El tiempo de aparición de burbujas fue más largo en comparación con los otros tubos, lo que indica
una menor eficiencia en la descomposición del peróxido de hidrógeno.

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- Tubo 2 (37°C): Se registró una actividad enzimática óptima a esta temperatura. El tiempo de
aparición de burbujas fue relativamente corto, indicando una alta eficiencia en la descomposición
del peróxido de hidrógeno.

- Tubo 3 (Temperatura ambiente): Se observó una actividad enzimática similar al tubo 2, lo que
indica que la catalasa mantiene su eficiencia en la descomposición del peróxido de hidrógeno a
temperatura ambiente.

- Tubo 4 (Hielo): Se observó una disminución drástica en la actividad enzimática. El tiempo de

aparición de burbujas fue considerablemente más largo, lo que indica una baja eficiencia en la
descomposición del peróxido de hidrógeno a temperaturas frías.

Actividad enzimática de la catalasa en diferentes homogeneizados:

- Muestra de papa: Se registró una actividad enzimática moderada. El tiempo de aparición de

burbujas fue intermedio en comparación con las otras muestras.

- Muestra de hígado: Se observó una alta actividad enzimática. El tiempo de aparición de burbujas
fue corto, indicando una alta eficiencia en la descomposición del peróxido de hidrógeno.

- Muestra de espinaca: Se registró una actividad enzimática moderada. El tiempo de aparición de

burbujas fue similar al de la muestra de papa.

Estos resultados indican que la actividad enzimática de la catalasa puede variar según la
temperatura y la composición del tejido. La temperatura óptima para la actividad enzimática de la
catalasa se encuentra alrededor de la temperatura ambiente, mientras que tanto temperaturas muy
altas como muy bajas afectan negativamente su eficiencia. Además, las muestras de hígado
mostraron una mayor actividad enzimática en comparación con las muestras de papa y espinaca.

ANÁLISIS DE DATOS

1.- ¿Cómo se relaciona la temperatura y la actividad enzimática?

A temperaturas bajas, la actividad enzimática es baja debido a la falta de energía cinética, mientras
que a temperaturas óptimas, la actividad enzimática alcanza su máximo. A temperaturas muy altas,
la actividad enzimática disminuye debido a la desnaturalización de las enzimas.
2.- ¿Qué le suceda a las enzimas cuando se exponen a temperaturas extremas (muy frías o muy
calientes)?
A temperaturas muy frías, las reacciones enzimáticas disminuyen o se detienen debido a la
disminución de la movilidad de las moléculas de agua y la menor frecuencia de colisión entre
enzimas y sustratos. Además, las enzimas pueden sufrir daños por la formación de cristales de hielo.
A temperaturas muy altas, las enzimas pueden desnaturalizarse, lo que implica la pérdida de su
estructura tridimensional y la consiguiente pérdida de actividad enzimática. Las interacciones
débiles que mantienen la estructura de la enzima se rompen, y en casos extremos, las enzimas
pueden descomponerse en sus componentes individuales.
3.- ¿Puedes mencionar otras enzimas que actúan en nuestro cuerpo?

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 ● Amilasa
● Pepsina
● Lipasa
● DNA polimerasa
● RNA polimerasa
● Tripsina
● ATPasa
● Catalasa
● Acetilcolinesterasa
● Sintasa de óxido nítrico (NOS)
4.- ¿Qué efecto poder tener una fiebre prolongada sobre el funcionamiento de las enzimas?
una fiebre prolongada puede afectar el funcionamiento de las enzimas al provocar su
desnaturalización, disminuir su actividad, alterar la velocidad de las reacciones enzimáticas y
afectar su estructura y función. Es importante tratar la fiebre adecuadamente y buscar atención
médica si persiste durante un período prolongado o si se experimentan síntomas graves.
5.- ¿Qué ocurrió al añadir el peróxido de hidrogeno?

al unir peróxido de hidrógeno , la enzima catalasa presente se descompone el peróxido de hidrógeno

en agua y oxígeno, lo que ayuda a proteger las células hepáticas y evita la acumulación de peróxido
de hidrógeno tóxico

6.- ¿Ocurrió lo mismo en todas las muestras?

Si, en algunas muestras las enzimas no se activaron en gran cantidad pero siempre hubo reacción en
mínimas proporciones.

7.- ¿Por qué se forman las burbujas?

Las burbujas se producen porque el oxígeno es un gas que tiene una solubilidad limitada en agua.
Cuando se libera oxígeno en una solución acuosa, tiende a formar burbujas a medida que escapa del
líquido. Estas burbujas pueden ser observadas como pequeñas o grandes burbujas que se elevan a la
superficie.

8.- ¿Por qué se prepararon los homogenizados? ¿Por qué no se añadió el peróxido directamente a
los tejidos sin macerados?

los homogenizados se preparan antes de añadir el peróxido de hidrógeno a los tejidos debido a que
permiten una mezcla más homogénea y una mayor interacción entre el peróxido de hidrógeno y las
enzimas presentes. Además, facilitan la extracción y el análisis de las enzimas para su estudio.
Añadir el peróxido de hidrógeno directamente a los tejidos sin homogeneizar dificultaría la
distribución uniforme y la reacción eficiente con las enzimas.

9.- Explique por qué la gran mayoría de las especies de plantas y de animales producen la enzima
catalasa.

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la producción de la enzima catalasa por la gran mayoría de las especies de plantas y animales se
debe a su papel fundamental en la protección celular contra el peróxido de hidrógeno y el estrés
oxidativo. La presencia de catalasa contribuye al mantenimiento del equilibrio redox, la protección
contra infecciones y la conservación evolutiva de los organismos.

CONCLUSIÓN:

En este estudio de laboratorio, se investigaron los factores que influyen en la actividad enzimática
de la catalasa, una enzima ampliamente presente en los seres vivos. A través de la realización de
experimentos, se examinaron el efecto de la temperatura y los diferentes homogenizados en la
actividad enzimática.

En cuanto al efecto de la temperatura, se observó que la actividad enzimática de la catalasa fue

óptima a la temperatura ambiente y disminuyó tanto a temperaturas muy altas como a temperaturas
muy bajas. Esto indica que la temperatura juega un papel crucial en la eficiencia de la enzima, ya
que la actividad disminuye cuando las condiciones térmicas se alejan de su rango óptimo.

En relación a los diferentes homogenizados, se encontraron diferencias en la actividad enzimática

entre las muestras de papa, hígado y espinaca. Estos resultados sugieren que la presencia de
diferentes sustratos y componentes celulares puede afectar la eficiencia de la enzima catalasa, lo
que demuestra la importancia de la composición del tejido en la actividad enzimática.

En general, estos hallazgos respaldan la importancia de comprender los factores que influyen en la
actividad enzimática, ya que esto tiene implicaciones significativas en los procesos biológicos y
metabólicos de los organismos vivos. La enzima catalasa desempeña un papel crucial en la
protección celular contra el peróxido de hidrógeno, y su actividad está influenciada por la
temperatura y la composición del tejido. Estos resultados contribuyen al conocimiento de los
mecanismos bioquímicos que regulan la actividad enzimática en los sistemas biológicos.

INVESTIGA:

1.-¿Qué son las enzimas?¿Cómo está formado? ¿Cómo actúa?

las enzimas son proteínas especializadas que actúan como catalizadores biológicos en el cuerpo.
Están formadas por cadenas polipeptídicas y su estructura tridimensional única determina su
actividad. Las enzimas actúan facilitando las reacciones químicas al unirse específicamente a
sustratos en su sitio activo y proporcionar un entorno favorable para la catálisis de la reacción.