INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

LABORATORIO DE MOTODOS DE ANALISIS

PRACTICA. PURIFIFICACION PARCIAL DE LISOZIMA DE CLARA DE HUEVO

PROFESORA: CINTHYA MARTINEZ REYES

ALUMNO: SEGURA GARCIA REYMUNDO EMMANUEL

GURPO: 5QV2 SECCION III

 RESULTADOS
TABLA 1. ACTIVIDAD DE LA LISOZIMA EN LAS FRACCIONES
OBTENIDAS
TABLA 2. CURVA DE CALIBRACION
DE ALBÚMINA POR EL METODO DE
BRDAFORD

FIGURA 1. CURVA DE CALIBRACION DE

ALBÚMINA POR EL METODO DE BRDAFORD
TABLA 3. OBTENCION DE LA CANTIDAD DE PROTEINA CON AYUDA
DE LA ECUACION DE LA RECTA Y LA ABSORBANCIA OBTENIDA
TABLA 4. DETERMINACIÓN DEL GRADO DE PURIFICACIÓN DE LA
LISOZIMA
MENCIONE LAS FUNCIONES ATRIBUIDAS A LA LISOZIMA
Degrada la pared bacteriana por medio de la ruptura de los enlaces
glucosídicos en el peptidoglicano bacteriano.
Las lisozimas y las enzimas tipo lisozimas son enzimas
multifuncionales, estas pueden servir como moléculas de inmunidad
innata inespecífica responsables de la defensa antibacterial (patógenos
y no patógenos) y/o de la digestión
 DESCRIBIR EL MECANISMO DE ACCION ENZIMATICA DE LA LISOZIMA

Figura 2. Mecanismo catalítico de la lisozima mediado por los aminoácidos Glu-35 y Asp-52 (Stick et
al ., 2009). Éste cataliza la escisión de los enlaces β-1,4-glicosídicos entre el ácido N-acetilmurámico y
la N-acetil glucosamina en el peptidoglucano ( Yu et al ., 2018 ). La lisozima tiene dos residuos de
ácido carboxílico, aspartato-52 y glutamato-35, que se encuentran estratégicamente situados en el
enlace glicosídico y catalizan la escisión en dos pasos
 USOS DE LA LISOZIMA

La lisozima se utilizado para la prevención y tratamiento de algunas

infecciones por virus, como la varicela, el herpes, el sarampión y la gripe.
La lisozima está indicada en la profilaxis y tratamiento de infecciones
bucofaríngeas (estomatitis, gingivitis, faringitis, amigdalitis, laringitis, etc),
Como un agente bactericida en el proceso y preservación de alimentos.
OTROS METODOS DE PURIFICACION DE LA LISOZIMA
Otro método de purificación comprende el realizar la dilución adecuada
de la clara de huevo con un buffer apropiado y la separación de la
enzima en CM-celulosa mediante fijación en ¨batch¨ y elución en
columna en condiciones adecuadas de pH y concentración del buffer.
Cromatografía por intercambio iónico utilizando carboximetilcelulosa.
Tratamientos de clara diluída con inóculo de cristales de lisozima como
la Ultrafiltración y por precipitación.
DIAGRAMA DE FLUJO DEL PROCESO DE PURIFICACIÓN PARCIAL DE LA LISOZIMA
 BIBLIOGRAFIA
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