ING.

ROMANA LAURA GONZALEZ COBOS

 SALMONELLA SPP
NOM-114-SSA1-1994

1. Pre enriquecimiento

Pesar 25g de muestra en Verter 225 ml de caldo Homogeneizar la bolsa a

bolsa stomacher lactosado a la bolsa velocidad media durante 30 seg.

Mezclar y cerrar Mezclar bien y determinar Verter a un recipiente

con la tapa pH con papel pH. Ajustar de boca ancha y dejar
si es necesario reposar

Incubar a 32±2°C durante 24 h

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 2. Enriquecimiento selectivo

Agregar yodo yodurado y Verter 1 ml de Verter cultivo o

verde brillante al caldo Verter 1 ml de medio cultivo al caldo VR caldo selenito cistina
tetrationato

Caldo selenito cistina

Incubar los tubos a 35±1°C y caldo tetrationato
durante 24 horas

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 3. Selección de medios solidos

Tomar una muestra del cultivo anterior Incubar las cajas ya sembradas
Homogenizar el tubo con
con asa microbiológica estéril y en posición invertida a 32±2°C
caldo de enriquecimiento
sembrar en estría por agotamiento en durante 24 h.
ya incubado
cuadrantes en cajas de Petri

<

Realizar tinción de Seleccionar al menos 2 colonias

Gram a colonias Almacenar en
sospechosas de cada medio
sospechosas refrigeración de 5 a 8°C las
selectivo
placas con medios

Realizar purificación de las

Registrar las características
colonias seleccionadas,
morfológicas tanto macroscópicas
sembrando nuevamente en estría
como microscópicas
por agotamiento en cuadrantes

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 4. Identificación bioquímica

Registrar las características Por duplicado tomar

del medio TSI o KIA antes de
la inoculación
suavemente una porción Incubar el medio TSI o
del centro de la colonia con KIA a 35 2 C durante 24
asa bacteriológica estéril e h.
inocular por picadura y
estrías en un tubo de (TSI)
o (KIA) inclinado.

5. Serotipificacion

Suspender en cada una Agregar a una de ellas

Colocar con una asa de las gotas una una gota del suero anti
bacteriológica dos gotas porción del cultivo salmonella “O” y
separas sobre un portaobjetos desarrollado en TSI/KIA mezclar

Observar bajo buena Agitar inclinando la

Considerar cualquier grado de iluminación y fondo lámina durante 1
aglutinación como positiva oscuro la reacción minuto

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