Disolver 1 gr de cristales de Yodo en una solución que

contiene 2 gr de Yoduro de potasio o Yoduro de Sodio en

1.Preparación de 300 ml de agua destilada
Preparar 150 ml de Agar bacteriológico, estilizar y verter
Solución de Yodo en 6 Cajas Petri
Dejar solidificar medio a temperatura ambiente.

Lavar y desinfectar 10 tubos de ensaye con agua y jabón.

Etiquetar los tubos del 1 al 10
2. Preparación de Preparar solución salina para dilución serial de la muestra
de suelo. (El tubo #1 tendrá 10 ml de solución salina y los
material (Tubos) otros 3 tendrán 9 ml cada uno)
Esterilizar 2 pipetas de 10 ml debidamente protegidas.

#3 “AISLAMIENTO DE Tomar con una microespátula 1 gramo de suelo a analizar

BACTERIAS y añadirlo a un tubo de ensaye #1 que contiene 10 ml de

PRODUCTORAS DE 3. Preparación de solución salina preparada. (Tubo de dilución 10^-1)

Agitar para que los microorganismos se difundan
AMILASA DE UNA muestra por Dilución homogeamente y dejar reposar unos segundos)
MUESTRA DE SUELO” serial Tomar una alícuota de 1 ml de la solución anterior y
repetir el proceso agregándola a un tubo con 9 ml de
solución salina (Disolución 10^-2) así hasta 10^-4

Agregar 0.1 ml de muestra de suelo diluida en los tubos

10^-2 y 10^-4 al centro de 2 cajas de agar bacteriológico,
4.Extendido en placa con respectivamente.
Inmediatamente extender las muestras diluidas de suelo
Asa de Digralsky por encima de la superficie del agar, girando con
precaución el Asa de Digralsky previamente limpia y
desinfectada
Incubar las cajas a temperatura de (35ºC a 37ºC y revisar
el crecimiento 24 hrs cada 24 hrs
 Añadir con mucho cuidado la solución de yodo sobre la
Caja Petri hasta cubrir por completo la superficie de agar.
5. Formación de colonias Observar cambios de coloración y tomar foto de las
bacterianas tonalidades que se presenten.

En las colonias donde el almidón esté presente se teñirán

de color AZUL-NEGRO esto significará que no fueron
6. Observación y capaz de degradar esta enzima
Descripción de Las colonias bacterianas que sean capaces de degradar
almidon al ponerse en contacto con la solución de yodo
Resultados obtenidos: (Lugol) aparecerán de un color amarillento o más claro

#3 “AISLAMIENTO DE
BACTERIAS
PRODUCTORAS DE
AMILASA DE UNA 7. Tinción de Gram de
Observar bajo el microscopio realizando a esas colonias
identificar si son Gram + o Gram -
MUESTRA DE SUELO” colonias degradadoras Describir su morfología y estructura
PARTE 2

Resembrar en tubos con medio sólido inclinado,

las colonias bacterianas que presenten un Halo
(claro) en el medio de caja
8. Resiembra en tubo Incubar las muestras de resiembra a 37ºC y
inclinado con medio observar el crecimiento periódicamente
Una vez que el microorganismo creció lo mejor
sólido. posible, proteger las muestras y llevarlas a
refrigeracion hasta la siguiente práctica #4