UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Perú, Decana de América

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

INFORME N°3

“CUANTIFICACIÓN DE UNA MUESTRA POR CURVA DE

CALIBRACIÓN Y POR COMPARACIÓN CON UN ESTÁNDAR”
ASIGNATURA
Química analítica instrumental

DOCENTE
Mg. Carlos Casas, Norma Angélica

“SUBGRUPO 1”

Aliaga Sotelo, Dan Abinadab

Cruz Huaroto, Milagros Guadalupe

Chirinos Mejico, Anely Rocío

Espinoza Medina, Maryori Alexandra

Revollar Panaifo, Cristian Enrique

Lima, Perú

2021-II
I. INTRODUCCIÓN

Dentro de la espectrofotometría, un procedimiento analítico cuantitativo muy empleado es la

calibración que consiste en la construcción de una curva de calibración, la cual es una
representación gráfica que nos permite relacionar los valores de absorbancia y concentración
de una serie de soluciones patrón o llamadas también soluciones estándar. Según Dosal y
Villanueva (2008) (1). La etapa de calibración se realiza mediante un modelo de línea recta
con el fin de encontrar la recta de calibrado que pueda ajustarse óptimamente a una serie de
puntos experimentales, donde cada punto se define por una variable x (independiente y en
base a la concentración del analito) y una variable y (dependiente y en relación a la respuesta
instrumental). La recta se encuentra en función a la ecuación de la recta dada por la pendiente
y= mx+b.

En el presente informe conoceremos cómo cuantificar una muestra de azosulfamida mediante

una curva de calibración, además sabremos cómo representar gráfica y matemáticamente.

II. OBJETIVOS

❖ Cuantificar la muestra de azosulfamida mediante una curva de calibración.

❖ Emplear el método de mínimos cuadrados para determinar con mayor exactitud la
curva de calibrado.

III. MATERIALES:

Estándar de azosulfamida 500 µg/mL Muestra problema: Aseptil rojo 5%

1
Espectrofotómetro UV-Vis. Celdas de cuarzo

Matraces de diferentes volúmenes Fiolas de diferentes volúmenes

Pipetas de diferentes volúmenes

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IV.PROCEDIMIENTO

Figura 1. Diagrama de flujo sobre cuantificación de una muestra por curva de calibración y
por comparación con un estándar.

3
V.RESULTADOS

4
VI. DISCUSIÓN

El estudio “Idoneidad del método de análisis de magnesio en agua potable por absorción
atómica con curva de calibración cuadrática” muestra dos metodologías de cálculo para la
determinación de magnesio en agua potable basados en principalmente en el método de
espectrometría de absorción atómica. Ahora bien, estas dos metodologías son la
cuantificación con curva de calibración lineal y la curva de calibración cuadrática. Todo ello
con el fin de contrastar los resultados obtenidos y además establecer las diferencias, si
existieran entre los métodos de cálculo.
En este sentido, el estudio demostró de forma categórica la capacidad inminente de la
modalidad cuadrática de cuantificar para la determinación de magnesio en agua potable, es
importante tomar en cuenta que esto se cumple cuando se trabaja con las condiciones
adecuadas.

Cabe resaltar, que existe información documentada sobre las limitaciones que presenta la
curva de calibración lineal cuando se trabaja con ella. Sin embargo, en la curva de calibración
cuadrática es de importancia considerar que estás no presentan características claras cuando
se intenta extrapolar algún dato, ello debido a que solo se garantiza una buena correlación
cuadrática en el rango calibrado (2).

VII. CONCLUSIONES
● Se realizaron cálculos y se obtuvieron las 5 concentraciones diferentes requeridas.
● Se graficó la curva de calibración.
● Se cuantificó la muestra utilizando la curva de calibración graficada.

VIII. CUESTIONARIO
1. Investigue ¿Qué tipo de estandarización de métodos es la curva de calibración?

Es el método de estandarización más utilizado,que consiste en la utilización de uno o más

patrones o estándares externos que contienen una concentración conocida de analito ,son
considerados externos ,debido a que son preparados y analizados de forma independiente
respecto a la muestra ,aunque es un método muy utilizado en el laboratorio ,se debe asumir
que en este método nunca se tiene en cuenta la variabilidad de la matiz en que se encuentra

5
nuestro analito y el valor de concentración calculado con este método nunca tiene en cuenta
el efecto matriz ,ya que considera al analito en la muestra como si de un estándar se tratase
(3).

2. ¿En qué consiste un error aleatorio y un error sistemático y cómo se les

identifica?
A) Error sistemático:
El error sistemático se produce debido a un fallo proveniente del equipo o por una
mala calibración. Lo característico de este error es que ante la repetición en el equipo
se seguirá reproduciendo el error, de esta manera se logra identificar y por este motivo
se debe reparar y calibrar lo antes posible (4).
B) Error aleatorio:
El error aleatorio, a diferencia del error sistemático, no se puede corregir debido a que
estos son identificables por su medida. Asimismo, se originan por efectos
incontrolados de las variables y se encuentran siempre presentes durante la medición
(4).

3. ¿Cuál es el objetivo de la regresión lineal en las curvas de calibración rectilíneas?

¿A qué se llama error residual? Dar un ejemplo
A) Regresión lineal:
La regresión lineal nos permite obtener la recta y su función que relaciona a dos
puntos en la curva de calibración, esta regresión siempre va a tender a un valor
aproximado a 1 (5).
B) Error residual:
Se le conoce como error residual a la diferencia entre un valor experimental y el valor
obtenido mediante una ecuación de regresión. Los residuos observados se utilizan
para estimar posteriormente la variabilidad en estos valores y para estimar la
distribución de muestreo de los parámetros. Cuando el error estándar residual es
exactamente 0, el modelo se ajusta perfectamente a los datos (probablemente debido
al sobreajuste). Si no se puede demostrar que el error estándar residual sea
significativamente diferente de la variabilidad en la respuesta incondicional, entonces

6
 hay poca evidencia que sugiera que el modelo lineal tenga alguna capacidad
predictiva (6).

4. Un procedimiento común para la determinación de proteínas es el ensayo

colorimétrico de Bradford. En este método un colorante se une a la proteína y
forma un complejo de color azul cuya intensidad es proporcional a la
concentración de proteínas. Para una determinación se encontraron los
siguientes valores para cada concentración de estándar y absorbancias a 595nm.

PROTEÍNA 0.00 9.36 8.72 28.08 37.44

(µg)

ABSORBANCI 0.466 0.676 0.883 1.086 1.280

A

a. Por el método de mínimos cuadrados, determine la ecuación de la recta

que pase por esos puntos.

y = {[(5)(92.4452) - (83.6)(4.391)] / (5)(2353.888) - (83.6)2}x + [(4.391)(2353.888)

- (83.6)(92.4452)] / (5)(2353.88) - (83.6)2

=> y = 0.0199x + 0.5454

b. Represente gráficamente los datos experimentales y la recta definida en A

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 Figura X. Gráfico de comparación entre las concentraciones y absorbancias
de la muestra de proteínas
c. Una muestra problema de proteínas tuvo una absorbancia de 0.973.
Calcule la cantidad de proteína, en µg, presente en la muestra problema y
estime la incertidumbre (expresándola como desviación estándar)

c.1. Calcularemos la cantidad de proteína mediante método de

comparación con un patrón, bajo la siguiente expresión matemática:

Ast / Cst = A mp / Cmp

Donde:
Ast : Absorbancia de la solución estándar
Cst : Concentración de la muestra estándar
Amp : Absorbancia de la muestra problema
Cmp : Concentración de la muestra problema

Despejamos Cmp
Cmp = A st x Cst / A mp
Cmp = 0.943 x 9.36 / 0.676
Cmp = 13.05 ug

c.2. Estimar la incertidumbre (expresándola como desviación estándar:

S = |(4. 27) − (0. 5454)(4. 391) − (0. 019)(92. 45)| / 5 − 2

S =± 0. 1988

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BIBLIOGRAFÍA:

1. Dosal M, Villanueva M. Curvas de calibración en los métodos analíticos.

[Internet]. 2008 [Citado 3 de noviembre de 2021]. Disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/CURVASDECALIBRACION_23
498.pdf
2. Pérez-López E. Idoneidad del método de análisis de magnesio en agua potable
por absorción atómica con curva de calibración cuadrática. TM. 1 de
noviembre de 2014;[Internet]. [citado 2 de noviembre de 2021]. Disponible
en: https://www.scielo.sa.cr/pdf/tem/v27n4/a03v27n4.pdf
3. [Internet]. 2019 [citado 20 de octubre de 2021]. Disponible en:
http://www.bioquimica.ucv.cl/paginas/central/analisis%20instr/INTRODUCCI
%D3N%20A%20LAS%20T%C9CNICAS%20INSTRUMENTALES..pdf
4. Angulo A. Error Sistematico y Aleatorio | PDF | Medición | Distribución
normal [Internet]. 2010 [Citado el 3 de noviembre del 2021]. Disponible en:
https://es.scribd.com/doc/41997374/Error-Sistematico-y-Aleatorio
5. ¿Qué es una curva de calibración? - Curiosoando [Internet]. 2017 [Citado el 3
de noviembre del 2021]. Disponible en:
https://curiosoando.com/que-es-una-curva-de-calibracion
6. Fernández JM. LOS ERRORES EN QUIMICA ANALITICA [Internet]. 2002
[Citado el 3 de noviembre del 2021]. Disponible en:
https://dadun.unav.edu/bitstream/10171/27818/1/2002-ErroresenQA.pdf