UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE DE

GROHOMANN

OXIDACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS

Práctica N° 9

FACULTAD:
CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA:
INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
CURSO:
BIOQUÍMICA
ALUMNA:
ESMERALDA XIOMARA GONZALES TAPIA
CÓDIGO:
2019-111020
TACNA- PERÚ
2021
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DE CIENCIAS AGROPECUARIAS – ESCUELA PROFESIONAL INGENIERÍA EN
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
I. INTRODUCCION
Los ácidos grasos son el mayor combustible metabólico para humanos. En presencia de
oxígeno, los ácidos grasos catabolizados hasta CO2 y H2O permiten que el 40% de la
energía libre producida en este proceso es conservada por la célula en forma de ATP. El
resto de energía es liberada como calor.
El catabolismo de los ácidos grasos ocurre dentro de la mitocondria por un proceso
conocido como beta-oxidación. Esta vía comprende una serie de reacciones enzimáticas
que conducen un Acil-CoA hacia la formación de Acetil CoA y un Acil-CoA con dos
átomos de carbono menos, respecto al que inició la reacción; este último compuesto,
reingresa nuevamente a este ciclo de reacciones de tal manera que el ácido graso
finalmente queda convertido en varias moléculas de Acetil-CoA, dependiendo del
número de carbonos.
Los moles del Acetil-CoA producidos son principalmente utilizados por el organismo en
la producción de energía, al unirse al Oxalacetato puede iniciar un ciclo de Krebs y luego
una cadena respiratoria para lograr su oxidación total hasta CO2 y H2O, con la
correspondiente síntesis de ATP.
El Acetil-CoA interviene también en la síntesis de ácidos grasos, síntesis de colesterol,
así como también en la síntesis de cuerpos cetónicos.
En esta práctica se utilizará un homogenizado de hígado, como fuente de enzimas. Como
el oxígeno es convertido en agua, se empleará el respirómetro de Warburg para medir el
consumo de oxígeno.
II. OBJETIVOS
a. Estudiar la oxidación del ácido butírico a través del consumo de oxígeno.
b. Demostrar el requerimiento de varios cofactores para una óptima
oxidación de ácidos grasos.
c. Revisar aspectos importantes de la respirometría.
III. MATERIAL Y METODOS
3.1. MATERIALES
3.1.1. Materiales biológicos
 Homogenizado de hígado de rata
3.1.2. Materiales de vidrio
 Tubos de ensayo
 Pipetas
 Frascos de Warburg
3.1.3. Reactivos
 ATP 0,01M
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 MgSO4 0,02M

 NAD
 Butirato de sodio 0,01M
 Buffer fosfato 0,1M pH 7,2
 Agua destilada

3.1.4. Equipos y otros

 Respirómetro de Warburg
 Guantes
3.2. METODOS
 Mediante la observación y exploración se aplicará el método del
respirómetro de Warburg para medir el consumo de oxígeno, con la
finalidad de verificar las reacciones de oxido-reducción.
IV. PROCEDIMIENTO
4.1. Oxidación de ácido graso, usando Respirómetro de Warburg.
 En 6 frascos de Warburg medir lo siguiente:
1 2 3 4 5 TB
ATP 0,01M 0,4mL 0,4mL 0,4mL
MgSO4 0,02M 0,3mL 0,3mL 0,3mL 0,3mL 0,3mL
NAD 0,1mL 0,1mL 0,1mL 0,1mL
Sustrato* 0,6mL 0,6mL 0,6mL
Buffer fosfato 0,01M pH 7,2 2mL 2mL 2mL 2mL 2mL
H2O destilada 1,2mL 0,6mL 1mL 0,7mL 1,6mL 4mL
Homogenizado de hígado 2mL 2mL 2mL 2mL 2mL

*5 volúmenes de butirato de sodio 0,1M y 1volumen de fumarato de sodio 0,01M.

 Equilibrar los sistemas por 10 a 15 minutos, permitiendo el libre intercambio
gaseoso con el medio ambiente.
 Cerrar la llave de los manómetros y la llave lateral de los frascos de Warburg y
realizar las lecturas cada 10 minutos hasta completar una hora.
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V. RESULTADOS
 Esquematizar el procedimiento de los experimentos. Luego interpretar sus
resultados.

Tubo N°01

ATP0.01 MgSO4 NAD Buffer H2O destilada Homogenizado

M 0,02M de hígado 2mL
0.1mL 2mL 1.2mL

Tubo N°02

ATP0.01M MgSO4 NAD Buffer H2O destilada

Homogenizado Sustrato
0,02M 0.1mL 2mL 0.6mL de hígado 2mL
0.4mL 0.6mL
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Tubo N°03

MgSO4 0,02M NAD Sustrato Buffer H2O Homogenizado de

0.3mL destilada hígado 2mL
0.1mL 0.6mL 2mL

Tubo N°04

ATP 0.01M MgSO4 0,02M Sustrato Buffer H2O destilada Homogenizado

0.4mL 0.3mL
0.6mL 2mL 0.7mL de hígado 2mL
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Tubo N°05

MgSO4 NAD Buffer H2O destilada Homogenizado de

0,02M 0.3mL hígado 2mL
0.1mL 2mL 1.6mL

Por ultimo cerrar la llave de los manómetros y la llave lateral de los frascos de Warburg
y realizar las lecturas cada 10 minutos hasta completar una hora.
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 En el experimento 4.1. estructurar la siguiente tabla
T 1 2 3 4 5
TB
min kO2=0.99 kO2=1.02 kO2=0.97 kO2=1.0 kO2=0.98
0 200 250 235 241 248 238
203 7 24 9 9 6
10 243 211 232 239 232
+3 10 27 12 12 9
201 6 35 7 12 6
20 237 176 225 227 226
-2 4 33 5 10 4
200 8 25 12 9 6
30 229 151 213 218 220
-1 7 24 11 8 5
202 9 29 8 12 5
40 220 122 205 206 215
+2 11 31 10 14 7
200 6 27 8 12 7
50 214 95 197 194 208
-2 4 25 6 10 5
200 9 23 9 14 5
60 205 72 188 180 203
0 9 23 9 14 5
TOTAL 45 163 53 68 35
uL de O2 / hora 44.55 166.26 51.41 68 34.3

Aumento o disminución 73,21% 69,08% 59,10% 79,37%

100%
(%) (disminución) (disminución) (disminución) (disminución)
Haga una interpretación adecuada de los resultados obtenidos en cada frasco de Warburg.

Interpretación
En el tubo 1 se observó que no se agregó el sustrato por lo tanto no mucho consumo de
oxígeno, en cambio en el tubo 2 hubo el mayor consumo de oxigeno por lo que se puede
decir el que cuenta con todas las condiciones óptimas, en el tubo 3 se aprecia que no hubo
mucho consumo de oxigeno esto sucedió porque se agregó ATP por lo que ayudo a la
activación de AG y por último en el tubo 4 se aprecia que no hubo mucho consumo de
oxigeno porque no se agregó NAD.
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VI. CONCLUSIONES
en conclusión, el consumo de oxígeno en el sistema 2 es mayor porque hay cofactores
que ayudan a las enzimas ATP y Mg funcionen y activen los ácidos grasos
también podemos concluir que el respirador Wartburg puede ayudarnos a registrar
combinaciones en la presión de atmosférica para determinar el O2 consumido
VII. CUESTIONARIO
7.1. Explicar la relación existente entre el consumo de oxígeno y la oxidación
de ácidos grasos.
para producir la misma cantidad de ATP, la oxidación de ácidos grasos requiere
más oxígeno que la oxidación de carbohidratos (88). La oxidación de una molécula de
glucosa requiere 6 moléculas de oxígeno mientras que, por ejemplo,
la oxidación completa del acido esteárico requiere 26 moléculas de oxígeno
La oxidación de los ácidos grasos es un mecanismo clave para la obtención de energía
metabólica (ATP) por parte de los organismos aeróbicos. Dado que los ácidos grasos son
moléculas muy reducidas, su oxidación libera mucha energía
7.2. Señale y fundamente otros parámetros que pueden servir en el estudio
de la oxidación de ácidos grasos.
El Índice de peróxidos mide el estado de oxidación inicial de un aceite. Se expresa en
miliequivalentes de oxígeno activo por kilo de grasa. Es directamente proporcional del
yorudo de potasio liberado con tiosulfato de sodio
El índice de acidez (IA) o Valor ácido se define como la cantidad de miligramos de
hidróxido de potasio necesaria para neutralizar los ácidos grasos libres presentes en un
gramo de aceite o grasa (Nielsen, 2003) y constituye una medida del grado de hidrólisis
de una grasa.
El índice de yodo (IV) es una medida del número total de dobles enlaces presentes en
grasas y aceites. Se expresa como el «número de gramos de yodo que reaccionará con los
dobles enlaces en 100 gramos de grasas o de aceites
7.3. Comente el rol del ATP y Mg en la beta-oxidación de los ácidos grasos.
El catabolismo de codos grasos se requiere de ATP en la fase de activación y como
cofactor se utiliza el Mg debido al uso de la enzima TIOQUINASA y la combinación de
acidos grasos y Co A, se puede obtener el acil Co A liberando oxidación de 5ATPS de la
energía reductora de NAD y FAD.
7.4. ¿El desacoplamiento de la fosforilación oxidativa, tendría algún efecto
sobre la oxidación de los ácidos grasos, por qué?
El desacoplamiento de la fosforilación oxidativa hace desaparecer el gradiente de
protones sin intervención de la ATP sintasa. La energía producida por el transporte de
electrones se descarga en forma de calor en vez de utilizarse para la síntesis de ATP.
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La eficiencia de la fosforilación oxidativa puede reducirse en determinadas
situaciones, donde interesa estimular la respiración sin que haya síntesis de ATP. Por
ejemplo en plantas, las oxidasas alternativas constituyen una ruta diferente para los
electrones que fluyen a través de la cadena respiratoria (Borecky and Vercesi 2005)
7.5. ¿Qué finalidad tiene la preparación del sistema termobarómetro?
Es una herramienta que permite realizar mediciones termométricas y barométricas al
mismo tiempo.
7.6. ¿Qué importancia tiene el empleo de KOH en el comportamiento
central del frasco Warburg?
El KOH en el frasco Warburg atrapa el dióxido de carbono presente en la reacción para
medir el consumo de oxígeno en el termobarométro
7.7. ¿Qué es el KO2?
Óxido de potasio es un compuesto químico iónico formado por potasio y oxígeno. Es un
sólido amarillo a temperatura ambiente. Es un compuesto raro ya que es altamente
reactivo. Algunos productos comerciales, como fertilizantes y cementos, tienen un
pequeño porcentaje que también se escribe como K2O.
VIII. BIBLIOGRAFIA
https://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/291563/trfc1de1.doc.pdf?sequence=1&isAl
lowed=y
https://es.wikipedia.org/wiki/ATP_sintasa
https://eprints.ucm.es/id/eprint/11158/1/T32048.pdf
https://www.tesisenred.net/bitstream/handle/10803/995/01.YCN_INTRODUCCION.pd
f?sequence=2&isAllowed=y