Ing. Bioprocesos Practicas

MANUAL DE
PRÁCTICAS DE
LABORATORIO
ITA
Ing. Bioprocesos
MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO ITA-IBT
FICHA TECNICA
FICHA TÉCNICA
Ingeniería de bioprocesos
Fecha: 17 Enero 2023

Nombre del catedrático: Dra. Gabriela E. Moeller Chávez
Dr. Martín Barragán Trinidad
Nombre de la práctica: Determinación de los porcentajes de remoción de
contaminantes de acuerdo a la afinidad de la biomasa por el
sustrato
Clave: U1, ED1
Número de práctica: 1 de 2 Duración en horas: 6
Justificación: El primer paso para llevar a cabo un balance de masa es un

biorreactor consiste en cuantificar la DQO inicial y final; así
como la producción de biomasa. Por lo que la presente
práctica tiene como objetivo ilustrar como se lleva a cabo la
determinación de DQO en un proceso de lodos activados para
la remoción de contaminantes orgánicos y así poder
cuantificar la eficiencia del proceso del proceso en la remoción
de materia orgánica.
Objetivos/Resultados de El alumno reforzará los conceptos vistos en teoría y aprenderá

aprendizaje: a determinar la eficiencia de remoción de DQO en un proceso
de lodos activados. Así como también, evaluar la influencia de
la fuente de carbono sobre el crecimiento microbiano.
Laboratorio donde se desarrolla de la práctica:
7
Actividades a desarrollar:
Los alumnos prepararán 250 mL de una solución isotónica con glucosa, sacarosa o acetato
de sodio a 500 mg/L de DQO, la cual será transferida a un matraz Erlenmeyer de 1 L. A ésta
solución se agregarán lodos activados (10 % v/v) y se mantendrá el lodo en suspensión con
ayuda de agitación magnética. Una vez realizada la mezcla, se tomarán 30 mL de muestra
(tiempo cero), que servirán para cuantificar la DQO soluble y SSV iniciales. Después de 3
horas de agitación continua se tomará otra muestra (muestra final), para realizar las
determinaciones antes mencionadas.
La cuantificación de DQO se llevará a cabo con base en los métodos estándar (APHA, 2005).
La fracción soluble se obtendrá empelando filtros de fibra de vidrio de 0.22 micras. Una vez
filtrada la muestra, ésta debe ser acidificada con H2SO4 concentrado hasta un pH<2 y
guardarse en refrigeración hasta su uso. Por su parte, para cuantificar los SSV es
indispensable contar con filtros de fibra de vidrio a peso constante (APHA, 2005). Las
determinaciones de DQO y SSV deberán hacerse por triplicado, de ser posible.
2
Evidencia a generar en el desarrollo de la práctica:

Reporte de práctica
COMPETENCIAS HABILIDADES
Elaboró: Revisó:
INTRODUCCIÓN
La prueba de Demanda Química de Oxígeno (DQO) se basa en la oxidación química de la materia
orgánica e inorgánica, presente en las muestras de agua, con dicromato de potasio y ácido
sulfúrico a ebullición (digestión). La cantidad de materia oxidable se mide como oxígeno
equivalente y es proporcional al oxígeno consumido.
Volúmenes pequeños de muestras de aguas son pipeteados dentro de frascos que contienen
reactivos pre-medidos, incluyendo catalizadores y compensadores de la interferencia de los
cloruros. Los frascos son calentados hasta que la digestión es completa y entonces enfriados.
La medición de DQO es realizado con un espectrofotómetro.
Fundamento de la determinación.
La determinación más general para la DQO, es con dicromato potásico en exceso en medio
ácido, con la ayuda de catalizadores en presencia de sulfato de plata (Ag2SO4) que actúa como
agente catalizador, y de sulfato mercúrico (HgSO4) adicionado para remover la interferencia de
los cloruros. El dicromato oxida la materia orgánica y la inorgánica presente en la muestra,
3
reduciéndose de Cr6+ a Cr3+. Ambas especies crómicas son coloreadas y absorben en la región
visible del espectro. El ensayo se realiza a 150 ºC, durante 2 horas.
Las reacciones implicadas en la determinación de la DQO son las siguientes:
𝐶𝑟2 𝑂72− + 14𝐻 + + 6𝑒 − → 2𝐶𝑟 3+ + 7𝐻2 𝑂
Los cloruros interfieren:
6𝐶𝑙 − + 𝐶𝑟2 𝑂72− + 14𝐻 + → 3𝐶𝑙2 + 2𝐶𝑟 3+ + 7𝐻2 𝑂
Para evitar la interferencia, se añade HgSO4:
𝐻𝑔2+ + 2𝐶𝑙 − → 𝐻𝑔𝐶𝑙2
Con HgSO4 insuficiente:
𝐴𝑔+ + 𝐶𝑙 − → 𝐴𝑔𝐶𝑙
El ion dicromato (Cr2O72-) absorbe fuertemente en la región de los 400 nm, donde el ion crómico
(Cr3+) absorbe mucho menos. El ion Cr3+ absorbe fuertemente en la región de los 600 nm, donde
el ión dicromato tiene una absorción cercana a cero.
Para valores de DQO entre 100 y 900 ppm se determina el incremento de Cr3+ a los 600 nm.
Los valores altos pueden determinarse por dilución de la muestra.
Para valores de 90 ppm o menos se determina la disminución de Cr2O72- a 420 nm. La

correspondiente generación de Cr3+ ocasiona un incremento pequeño en la absorción a 420 nm,
pero esto es compensado por el procedimiento de calibración.
Definiciones:
La Demanda Química de Oxígeno (DQO): La determinación de la demanda química de

oxigeno (DQO) proporciona la cantidad de oxigeno requerida para oxidar bajo
condiciones específicas, la materia orgánica susceptible de oxidarse contenida en una
4
muestra de agua. Se expresa en mg/L de oxígeno y proporciona una medida de la

cantidad de sustancias, bajo las condiciones en las que se efectúa esta prueba.
Espectrofotómetro: Instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en

función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud
fotométrica relativos a dos haces de radiaciones.
Reactor DQO (digestor): Instrumento para calentar las muestras.
Viales: Frasco pequeño destinado a contener reactivos medidos, realizar ensayos o

reacciones y hacer lecturas en el espectrofotómetro.
OBJETIVO
MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO (Cristalería)

CANTIDAD MATERIAL ESPECIFICACIONES
15 Viales para DQO Para DQO
3 Matraces aforados 1l
2 Vaso de 250 mL
precipitados
2 Pipetas 10mL
volumétricas
1 Perilla de tres vias
2 Probeta 100 mL
1 Gradilla
EQUIPO REQUERIDOS
NOMBRE ESPECIFICACIONES
Digestor para viales de Temperatura constante 150 ±2 C
DQO
Espectrofotómetro UV/Vis Adaptador para viales
Parrillas de agitación 1
Campana de extracción 1, para extracción de vapores
5
OTROS MATERIALES REQUERIDOS

(No suministrados por el Laboratorio)
3 Envases de vidrio ámbar para 1L
resguardar solución digestora
1 Franela
Equipo de seguridad personal
REACTIVOS REQUERIDOS
NOMBRE CANTIDAD S I R O
Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) 920mL 3 0 2 4

Dicromato de potasio (K2CrO7) 10.216g 4 0 3 3
Sulfato de Mercúrio, HgSO4 33.3g 3 0 1 3
Sulfato de plata (Ag2SO4) 5.5g 2 0 1 1
S: Riesgo a la Salud I: Riesgo de Incendio R: Riesgo de reactividad O: Riesgo Especifico
Manejo y disposición de los reactivos requeridos:

Manejo de residuos no peligrosos y peligroso y en qué tipo de recipiente ponerlo
En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposición que se le

dará a cada uno de los desechos (químicos y biológicos) que se generen durante la
práctica.
Nombre del reactivo Datos importantes de la ficha técnica

Incendio: combate,
derrame
Salud
Ambiente
Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarán

en el laboratorio.
en el laboratorio

en el laboratorio
6
PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
Preparación de soluciones.
Todos los reactivos que a continuación se mencionan deben ser grado

reactivo analítico, excepto K2Cr2O7 que debe de ser de la mayor pureza
disponible; cuando se hable de agua se debe entender por agua
desionizada tipo IV o mejor.
Solución de H2SO4 al 20 %: Diluir cuidadosamente 200 mL de H2SO4 grado

analítico en agua desionizada hasta completar un volumen de 1000 mL.
Solución de Digestión de Dicromato de Potasio: Agregue a 500 mL de agua

desionizada 10.216 g de Kr2Cr2O7 de la mayor pureza disponible, de
preferencia 99.5 %, previamente secado a 103° C por dos horas, 167 mL
de ácido sulfúrico (H2SO4) concentrado y 33.3 g de sulfato mercúrico.
Disolver, enfriar a temperatura del cuarto y diluir a un litro con agua
desionizada. (Solución digestora para una DQO de 100 a 900 ppm).
Reactivo de Ácido Sulfúrico; Agregar sulfato de plata Ag2SO4, cristal o polvo,

al ácido sulfúrico concentrado a la razón de 5.5 g de Ag2SO4/Kg de H2SO4
es decir 5.5 g Ag2SO4 /543.5 ml de ácido sulfúrico (ρ= 1.84 g/cm3). Dejar
reposar durante uno o dos días hasta que se disuelva el sulfato de plata,
guardar en frasco ámbar y mantener en la obscuridad para evitar su
descomposición.
Metodología para la determinación de muestra
Colectar las muestras dentro recipientes de plástico que estén libres de

contaminación de materia orgánica (lavado previo con una solución de
H2SO4 al 20% durante 20 minutos y posterior enjuague con agua
desionizada para evitar dejar residuos ácidos).
7
Deben analizarse inmediatamente después de su recolección; si no es

posible, se preservan con 2 ml de H2SO4 concentrado por litro de muestra
a pH<2 y se refrigeran a 4ºC máximo 28 días. Cuando se agregan

cantidades significativas de preservador, se debe hacer una corrección por
volumen de ácido extra. Homogenizar las muestras que contienen sólidos
para asegurar muestras representativas.
Lavado de los viales
Los viales que se utilizan para la determinación de la DQO se deben dejar

en remojo con ácido sulfúrico al 20% durante 30 minutos y posteriormente
enjuagar varias veces con agua desionizada.
Lavado de los viales
Los viales que se utilizan para la determinación de la DQO se deben dejar

en remojo con ácido sulfúrico al 20% durante 30 minutos y posteriormente
enjuagar varias veces con agua desionizada.
Preparación de los viales con los reactivos para la digestión
Agregar los reactivos a los viales previamente lavados de acuerdo a la

siguiente tabla:
Cantidad de reactivos para viales
Viales Solución digestora Reactivo de ácido

sulfúrico
1 1.5mL 3.5mL
Precauciones
 Cuando se haga la digestión, colocar el escudo de protección al

digestor.
 Usar el equipo de seguridad, guantes, lentes.
8
 Para muestras de agua residual, con alta DQO, hacer diluciones en

matraces volumétricos, con el fin de reducir los errores inherentes a
mediciones de pequeños volúmenes.
 Para muestras que presenten sólidos suspendidos, correr al menos
un duplicado por muestra, la diferencia de duplicados de estas
muestras (con sólidos suspendidos) no deben ser mayor del 5 %,
repetir la muestra tantas veces como sea necesario, hasta que se
cumpla el criterio anterior.
 Cuando prepare los viales trabajar con guantes aislantes, porque la
disolución es fuertemente ácida y el vial se calienta en este proceso.
 El sulfato de plata y el sulfato mercúrico son tóxicos, evitar el contacto
con estos reactivos puros, así como con sus disoluciones.
Procedimiento para la medición de DQO
1. Encendemos el reactor de DQO y precalentamos a 150 °C.
2. Homogenizamos en la parrilla de agitación 100 mL de la muestra por

30 segundos en un vaso de precipitado.
3. Removemos la tapa de vial de reactivo de digestión de DQO y

sostenemos el vial en un ángulo de 45 grados.
4. Pipeteamos 2.00 mL de la muestra dentro del vial (0.2 mL para el

rango de 0 a 15,000 mg/L).
5. Colocamos la tapa del vial herméticamente. Enjuagamos con agua

desionizada. Limpiamos la parte exterior del vial con papel toalla.
6. Sostenemos el vial por la tapa y lo agitamos. Lo invertimos

suavemente por un tiempo para mezclar el contenido. Colocamos el vial en
el reactor DQO precalentado.
7. Preparamos una muestra control repitiendo los pasos del 3 al 6,

substituyendo 2.00 mL (0.2 mL para el rango de 0 a 15,000 mg/L) con agua
desionizada para la muestra.
8. Calentamos los viales por 2 horas.
9
9. Apagamos el reactor. Invertimos cada vial por un tiempo mientras aún

está caliente. Esperamos cerca de 20 minutos hasta que el reactor llegue
a enfriar los viales a 120 °C o menos.
10. Colocamos los viales en una gradilla. Esperamos hasta que los viales
se enfríen a temperatura ambiente.
11. Inicialmente el analista debe revisar y verificar que el

espectrofotómetro, se encuentre en buen estado y leer el manual.
12. Luego, procede a seleccionar el programa HACH del mismo, utilizando

el código de DQO que representa el rango alto a 620 nm.
13. Seguidamente, se limpian los viales con papel toalla para eliminar las
posibles huellas o marcas, que puedan afectar la medición o lectura.
14. El analista debe instalar el adaptador de 6 mm, para continuar con la

lectura del vial llamado blanco.
15. Se coloca el blanco dentro del adaptador con el revestimiento del logo
HACH al frente del instrumento. Se cierra el escudo de luz y se presiona
suavemente hacia abajo la tecla ZERO. La pantalla muestra: 0.0 mg/L DQO.
16. Posteriormente, se coloca el vial que contiene la muestra dentro del

adaptador con el revestimiento del logo HACH al frente del instrumento. Se
cierra el escudo de luz. Se presiona suavemente la tecla READ. Los
resultados en mg/L DQO serán mostrados
17. Luego se procede a anotar la lectura del instrumento en mg/L de

DQO; si, es el rango (200 a 15,000 mg/L) se multiplica por diez (10) la
medida establecida.
REPORTE DE LA PRÁCTICA
10
EVIDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE LA PRÁCTICA

Calcular las eficiencias de remoción de DQO y el rendimiento observado YX/S.
Comparar las eficiencias y rendimientos obtenidos para las tres fuentes de carbono
empleadas.
DISCUSIÓN
CONCLUSIÓN
BIBLIOGRAFÍA
APHA, AWWA, WFE, 2005. Standard Methods for the Examination of Water & Wastewater, 21st ed.
American Public Health Association, Washington.
FICHA TECNICA
11
FICHA TÉCNICA
ASIGNATURA
Fecha: 7 Febrero 2023

Nombre del catedrático: Dra. Gabriela E. Moeller Chávez
Dr. Martín Barragán Trinidad
Nombre de la práctica: Parámetros cinéticos del crecimiento de Saccharomyces
cerevisiae en un cultivo por lote.
Clave: U2, ED1
Número de práctica: 2 Duración en horas: 4 sesiones
Justificación: Los cultivos en lote son útiles para estimar parámetros

cinéticos, los cuales son útiles para el diseño y escalamiento de
bioprocesos.
Objetivos/Resultados de El alumno aprenderá a estimar parámetros cinéticos
aprendizaje: empelando modelos matemáticos.
Laboratorio donde se desarrolla de la práctica:

7
Actividades a desarrollar:
 Preparación de materiales y reactivos para cuantificar glucosa y peso seco.
 Cultivo de Saccharomyces cerevisiae en lote.
 Obtención de parámetros cinéticos
Evidencia a generar en el desarrollo de la práctica:

Reporte
COMPETENCIAS HABILIDADES
Elaboró: Martín Barragán Trinidad Revisó:
12
INTRODUCCIÓN
El crecimiento y la viabilidad de los microorganismos están determinados por factores

nutricionales y ambientales, y en condiciones de laboratorio óptimas, es posible predecir
una curva de crecimiento característica microbiano.
Cuando un microorganismo es inoculado en un medio de cultivo líquido fresco,

experimentará un periodo de adaptación al medio y condiciones de cultivo y
posteriormente se dividirá en forma exponencial, dando lugar a una curva de tipo
sigmoidea que se acostumbra dividir en cuatro partes:
El crecimiento y la viabilidad de los microorganismos están determinados por factores

nutricionales y ambientales, y en condiciones de laboratorio óptimas, es posible predecir
una curva de crecimiento característica microbiano.
Cuando un microorganismo es inoculado en un medio de cultivo líquido fresco,

experimentará un periodo de adaptación al medio y condiciones de cultivo y
posteriormente se dividirá en forma exponencial, dando lugar a una curva de tipo sigmoidea
que se acostumbra dividir en cuatro partes:
Figura 1. Curva típica de un cultivo por lote
A) Fase de retardo, de latencia o fase lag; B) fase de crecimiento exponencial o fase log; C)
fase estacionaria y; D) fase de declinación o muerte. El tiempo de duración de cada fase
13
dependerá de: i) la especie de microorganismos; ii) la preparación del inóculo; iii) la

composición del medio de cultivo y; iv) las condiciones ambientales.
En general las bacterias crecen con mayor rapidez que los microorganismos eucarióticos.
Además, entre más pequeños sean se desarrollan más rápido debido a una mayor área
superficial.
OBJETIVO
Estimar las constantes cinéticas de crecimiento de Saccharomyces cerevisiae en un cultivo por lote.
MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO (Cristalería)

1 Desecador Vidrio o plástico
1 Termómetro Que nos permita medir temperaturas en el

rango de los 20-35 °C
3 Vidrio de reloj o capsulas de
porcelana
1 Matraz Erlenmeyer 1L
1 Matraz Erlenmeyer 125 mL
1 Pinza de disección
2 Pipetas graduadas 5 mL
2 Pipetas graduadas 1 mL
1 Perilla de tres vías
15 Tubos para centrifuga 15 mL
1 Gradilla para tubos de ensaye
30 Tubos HACH
15 Filtros de fibra de vidrio 24 mm, 1.2 micras
6 Crisoles Gooch Para soportar los filtros de fibra de
vidrio
1 Piseta
EQUIPO REQUERIDOS
NOMBRE ESPECIFICACIONES
Potenciómetro 1
Bomba de vacío 1
Espectrofotómetro 1
Incubadora 1
Campana de extracción 1
Parrilla de agitación 1
14
OTROS MATERIALES REQUERIDOS

(No suministrados por el Laboratorio)
1 Levadura para pan Levadura comercial
REACTIVOS REQUERIDOS
NOMBRE CANTIDAD S I R O
KH2PO4 30 g 1 0 0
K2HPO4 20 g 1 0 0
MgSO4··7H2O 5 1 0 0
(NH4)2SO4 15 1 0 0
Extracto de levadura 5 0 0 0
Glucosa 50 1 0 0
Antibiótico 200 mg
HCl 5 mL 3 0 1 CORR
NaOH 12 3 0 1 CORR
Ácido 3,5-Dinitrosalicílico 1 1 1 0 OX
Tartrato de sodio y potasio (Sal de Rochelle) 30 1 0 0
S: Riesgo a la Salud I: Riesgo de Incendio R: Riesgo de reactividad O: Riesgo Especifico
Manejo y disposición de los reactivos requeridos:

Manejo de residuos no peligrosos y peligroso y en qué tipo de recipiente ponerlo
En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposición que se le

dará a cada uno de los desechos (químicos y biológicos) que se generen durante la
práctica.
15
Nombre del reactivo Datos importantes de la ficha técnica

Incendio: combate,
derrame
Salud
Ambiente

en el laboratorio.
en el laboratorio

en el laboratorio
PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
 Preparación del Reactivo de DNS
Se pesan 5 g de ácido 3,5 dinitrosalicílico, 150 g de tartrato de sodio y

potasio tetrahidratado y 8 g de NaOH. Se disuelve el NaOH en 200 mL de
agua desionizada (o destilada) y se añade en agitación la Sal de Rochelle
lentamente. Se completa con agua hasta 400 mL y se comienza a añadir
lentamente el ácido 3,5 dinitrosalicílico. Se deja en agitación toda la noche
en oscuridad. Finalmente se afora a 500 mL y se filtra. Ajustar la cantidad
de reactivo a preparar según el número de ensayos a realizar.
16
 Composición del medio de cultivo
Tabla 1. Composición del medio de cultivo
Componente Concentración (g/L)

KH2PO4 6
K2HPO4 4
MgSO4·7H2O 1
(NH4)2SO4 3.0
Extracto de levadura 1
Glucosa 10
Antibiótico 50 ppm
Ajustar el pH a 6
 Preparación del inóculo
Reactivar la cepa comercial inoculando la levadura al 3% (p/v) en 50 mL

medio de cultivo líquido (Tabla 1), durante 10-12 horas a 30 °C a 150 rpm.
 Cultivo en Lote
Agregar 6 mL del pre-cultivo a un matraz Erlenmeyer de 1L, completando

con medio de cultivo (Tabla 1) hasta un volumen de 250 mL. Incubar a 30
°C con agitación constante de 150 rpm.
 Parámetros de seguimiento
Cada 2 horas tomar 10 mL del cultivo para medir el crecimiento microbiano

por turbidimetría (620 nm, usando como blanco medio de cultivo sin
levadura) y el consumo de glucosa.
 Determinaciones analíticas
Biomasa
El crecimiento microbiano se determinará por mediciones de la densidad

óptica (DO 620 nm). Procurando siempre obtener valores de DO entre 0.3-
0.7. Para convertir la DO en concentración de biomasa, medir una alícuota
de 10-15 mL de cultivo con una DO ~0.5 y llevar a cabo la determinación
17
de solidos suspendidos totales con base en los métodos estándar (APHA,

2005). Para realizar la determinación de peso seco, se deberá contar
previamente con filtros de fibra de vidrio a peso constante. La
determinación de peso seco se realizará por triplicado.
Determinación de glucosa
De la muestra de cultivo, tomar aproximadamente 4 mL y filtrar a través de

un filtro de fibra de vidrio tan rápido como sea posible. El filtrado se preserva
con 2-3 gotas de NaOH (10 N) a 4-8°C, para su uso posterior cuantificación
de glucosa residual por el método de Miller (1959).
La cuantificación de glucosa se realizará como se describe a continuación:

en tubos de vidrio se mezclan 0.5 mL de muestra con 0.5 mL de Reactivo
de DNS. Los tubos se colocan en un baño de agua a ebullición por 5 min.
Se enfrían hasta temperatura ambiente (empelando hielo) y se les añade 5
mL de agua desionizada. Se agitan y se toma la lectura a 540 nm. El blanco
se prepara con agua desionizada. La curva de calibración se realizará
usando D-glucosa como estándar, en un rango de 0.2 a 2 g/L. Todas las
determinaciones se realizarán por triplicado.
REPORTE DE LA PRÁCTICA
EVIDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE LA PRÁCTICA

Construir una gráfica para observar el crecimiento microbiano (como DO y biomasa) y,
consumo de glucosa en función del tiempo.
Calcular el valor de la tasa específica de crecimiento máxima (µmax) y el porcentaje de

remoción de glucosa.
Calcular el rendimiento aparente biomasa-sustrato (Y´X/S).
Construir una gráfica de la productividad como una función del tiempo.
Simular el crecimiento microbiano usando los modelos modificado de Gompertz y

Logistico y, estimar el valor de los parámetros cinéticos.
18
DISCUSIÓN
CONCLUSIÓN
BIBLIOGRAFÍA
• APHA, AWWA, WFE, 2005. Standard Methods for the Examination of Water &
Wastewater, 21st ed. American Public Health Association, Washington.
• Miller, G.L., 1959. Use of Dinitrosalicylic Acid Reagent for Determination of

Reducing Sugar. Anal. Chem. 31, 426–428. https://doi.org/10.1021/ac60147a030
• Longhi, D.A., Dalcanton, F., Aragão, G.M.F. de, Carciofi, B.A.M., Laurindo, J.B.,
2017. Microbial growth models: A general mathematical approach to obtain μ max and
λ parameters from sigmoidal empirical primary models. Braz. J. Chem. Eng. 34, 369–
375. https://doi.org/10.1590/0104-6632.20170342s20150533.
19

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MANUAL DE

Fecha: 17 Enero 2023

Número de práctica: 1 de 2 Duración en horas: 6

Justificación: El primer paso para llevar a cabo un balance de masa es un

Objetivos/Resultados de El alumno reforzará los conceptos vistos en teoría y aprenderá

Evidencia a generar en el desarrollo de la práctica:

La medición de DQO es realizado con un espectrofotómetro.

Las reacciones implicadas en la determinación de la DQO son las siguientes:

𝐶𝑟2 𝑂72− + 14𝐻 + + 6𝑒 − → 2𝐶𝑟 3+ + 7𝐻2 𝑂

Los cloruros interfieren:

6𝐶𝑙 − + 𝐶𝑟2 𝑂72− + 14𝐻 + → 3𝐶𝑙2 + 2𝐶𝑟 3+ + 7𝐻2 𝑂

Para evitar la interferencia, se añade HgSO4:

𝐻𝑔2+ + 2𝐶𝑙 − → 𝐻𝑔𝐶𝑙2

Con HgSO4 insuficiente:

Para valores de 90 ppm o menos se determina la disminución de Cr2O72- a 420 nm. La

La Demanda Química de Oxígeno (DQO): La determinación de la demanda química de

muestra de agua. Se expresa en mg/L de oxígeno y proporciona una medida de la

Espectrofotómetro: Instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en

Reactor DQO (digestor): Instrumento para calentar las muestras.

Viales: Frasco pequeño destinado a contener reactivos medidos, realizar ensayos o

MATERIALES REQUERIDOS POR EQUIPO (Cristalería)

OTROS MATERIALES REQUERIDOS

Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) 920mL 3 0 2 4

Manejo y disposición de los reactivos requeridos:

En este espacio se pone la manera en que se manejan y la disposición que se le

Nombre del reactivo Datos importantes de la ficha técnica

Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarán

Datos de la ficha de seguridad de cada uno de los reactivos que se utilizarán

Todos los reactivos que a continuación se mencionan deben ser grado

Solución de H2SO4 al 20 %: Diluir cuidadosamente 200 mL de H2SO4 grado

Solución de Digestión de Dicromato de Potasio: Agregue a 500 mL de agua

Reactivo de Ácido Sulfúrico; Agregar sulfato de plata Ag2SO4, cristal o polvo,

Metodología para la determinación de muestra

Colectar las muestras dentro recipientes de plástico que estén libres de

Deben analizarse inmediatamente después de su recolección; si no es

a pH<2 y se refrigeran a 4ºC máximo 28 días. Cuando se agregan

Lavado de los viales

Los viales que se utilizan para la determinación de la DQO se deben dejar

Lavado de los viales

Los viales que se utilizan para la determinación de la DQO se deben dejar

Preparación de los viales con los reactivos para la digestión

Agregar los reactivos a los viales previamente lavados de acuerdo a la

Cantidad de reactivos para viales

Viales Solución digestora Reactivo de ácido

 Cuando se haga la digestión, colocar el escudo de protección al

 Para muestras de agua residual, con alta DQO, hacer diluciones en

Procedimiento para la medición de DQO

1. Encendemos el reactor de DQO y precalentamos a 150 °C.

2. Homogenizamos en la parrilla de agitación 100 mL de la muestra por

3. Removemos la tapa de vial de reactivo de digestión de DQO y

4. Pipeteamos 2.00 mL de la muestra dentro del vial (0.2 mL para el

5. Colocamos la tapa del vial herméticamente. Enjuagamos con agua

6. Sostenemos el vial por la tapa y lo agitamos. Lo invertimos

7. Preparamos una muestra control repitiendo los pasos del 3 al 6,

8. Calentamos los viales por 2 horas.

9. Apagamos el reactor. Invertimos cada vial por un tiempo mientras aún

11. Inicialmente el analista debe revisar y verificar que el

12. Luego, procede a seleccionar el programa HACH del mismo, utilizando

14. El analista debe instalar el adaptador de 6 mm, para continuar con la

16. Posteriormente, se coloca el vial que contiene la muestra dentro del

17. Luego se procede a anotar la lectura del instrumento en mg/L de

EVIDENCIAS DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS DURANTE LA PRÁCTICA

Fecha: 7 Febrero 2023

Número de práctica: 2 Duración en horas: 4 sesiones