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Acta biol. Colomb., Vol. 17 n.

º 2, 2019 335 - 348

IDENTIFICACIÓN DE GLÚCIDOS A PARTIR DE PRUEBAS CUALITATIVAS

a​
Ordoñez, R; b​ ​Pacheco, F; c​ ​Cabal, V.
Universidad Santiago de Cali, Facultad de Ciencias Básicas, Laboratorio de Bioquímica
a,b,c​
Programa de Microbiología

Santiago de Cali, Colombia

RESUMEN

Durante la práctica se efectuó el reconocimiento de glúcidos como lo son la glucosa, fructosa,


arabinosa, entre otros a través de algunas reacciones generales y otras específicas denominadas prueba
de Molisch, reacción de Benedict, reacción de Barfoed, prueba de Bial y Selivanoff en su respectivo
orden, las cuales cambiaron la coloración de la solución indicando de forma cualitativa el tipo de
compuesto que se está empleando. De lo anterior se obtuvo que efectivamente todas las sustancias
dieron positivo para carbohidratos, para azúcares reductores solo cuatro de los siete compuestos
dieron positivo, y por último, para la tercera, cuarta y quinta prueba los resultados no coincidieron con
lo predicho en la teoría. La importancia de esta práctica radica en que a través de su reconocimiento es
posible tratar enfermedades relacionadas con los azúcares en el organismo para el ámbito clínico, y en
cuanto al sector industrial permitirá crear productos alimenticios con los carbohidratos necesarios para
una sana alimentación.

Palabras clave:​ Glúcido, prueba cualitativa, azúcar reductor.

ABSTRACT

During the practice, the recognition of carbohydrates such as glucose, fructose, arabinose, among
others was carried out through some general reactions and other specific named Molisch test,
Benedict reaction, Barfoed reaction, Bial test and selivanoff in their respective order, which changed
the color of the solution qualitatively indicating the type of compound being used. From the above it
was obtained that effectively all the substances were positive for carbohydrates, for reducing sugars
only four of the seven compounds were positive, and finally, for the third, fourth and fifth tests the
results did not coincide with what was predicted in the theory. The importance of this practice lies in
the fact that through its recognition it is possible to treat diseases related to sugars in the organism for
the clinical field, and as for the industrial sector it will allow to create food products with the
carbohydrates necessary for a healthy diet.

Key words:​ Carbohydrates, qualitative test, reducing sugar.


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I. INTRODUCCIÓN pertenecen a la serie D de los azúcares y


pueden tener entre tres y hasta siete átomos de
Los glúcidos, también conocidos como carbono (Morrison, 1998).
carbohidratos, son compuestos formados en su
mayor parte por átomos de carbono e Los disacáridos son aquellos que están
hidrógeno y en una menor cantidad de formados por dos monosacáridos unidos entre
oxígeno. Los glúcidos tienen enlaces químicos sí por enlaces glucosídicos y, por tanto, al
difíciles de romper de tipo covalente, pero que hidrolizarse producen dos monosacáridos
almacenan gran cantidad de energía, que es libres. La fórmula de los disacáridos no
liberada cuando la molécula es oxidada. En la modificados es C​12​H​22​O​11 y el principal
naturaleza son un constituyente esencial de los ejemplo es la glucosa (Morrison, 1998).
seres vivos, formando parte de biomoléculas
aisladas o asociadas a otras como las proteínas Por último están los polisacáridos, los cuales
y los lípidos, siendo los compuestos orgánicos son cadenas, ramificadas o no, de más de diez
más abundantes en la naturaleza (Morrison, monosacáridos y resultan de la condensación
1998). de muchas moléculas de monosacáridos con la
pérdida de varias moléculas de agua
Estos compuestos desempeñan dos papeles (Morrison, 1998).
fundamentales en los seres vivos. Por un lado
son moléculas energéticas de uso inmediato De acuerdo con lo anterior, además de
para las células (glucosa) o que se almacenan reconocer si un compuesto pertenece a la
para su posterior consumo (almidón y familia de los carbohidratos, es necesario
glucógeno). Por otra parte, algunos tienen una diferenciar si se trata de un monosacárido tipo
importante función estructural ya que forman aldosa o cetosa, si es fácilmente oxidable o no,
parte de la pared celular de los vegetales es decir si es un azúcar reductor, si es de cinco
(celulosa) o de la cutícula de los artrópodos átomos de carbono (pentosa) o de seis
(Berg, 2002). (hexosa), si es disacárido o polisacárido, y
para ello se implementa una serie de pruebas
Los glúcidos pueden sufrir reacciones de que exhiben las propiedades específicas que
esterificación, reducción, oxidación, lo cual poseen cada uno de los glúcidos y cambia la
otorga a cada una de las estructuras una coloración si el resultado es positivo. Una
propiedad específica y estos se pueden secuencia que permite hacer el reconocimiento
clasificar en tres grandes grupos de acuerdo a y diferenciación de carbohidratos se
la cantidad de carbonos (Berg, 2002).: esquematiza en la figura 1 (Roca, 2004).

Los monosacáridos, también conocidos como


azúcares sencillos, están formados por una
sola molécula y por tanto no pueden ser
hidrolizados a otras más pequeñas. Estos a su
vez pueden ser clasificados de acuerdo a tres
características diferentes: según el grupo
carbonilo (aldosa o cetosa), el número de
átomos de ​carbono que contiene y su
quiralidad​. Los monosacáridos naturales
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reactivo de Selinavanoff (G49694) , glucosa al


1% (D9434), fructosa (F0550000), arabinosa
(1042055), lactosa (47287-U), sacarosa
(84097),maltosa (M2250) y almidón (STA20)

​Procedimiento

​Prueba de Molisch

​ n esta prueba se tomo la misma cantidad de


E
tubos de ensayo que número de glúcidos con
lo que se trabajó, en estos se añadió 0,5 ml a
cada determinado tubo de ensayo, se tomo un
tubo adicional con el cual se determino el
control negativo, posteriormente se agrego a
cada tuvo dos gotas del reactivo, esto sin
agitar, luego de adicionar el reactivo se le
agrego 0,5 ml de ácido sulfúrico, terminado
este paso se dejo reposar para observar los
cambios fisicoquímicos

Prueba de Benedict

En esta prueba se tomaron nuevamente la


misma cantidad de tubos de ensayo por
cantidad de glúcidos, añadiendo un control
FIGURA 1. ​Pruebas cualitativas para la negativo. A cada respectivo tubo se le añadió 1
identificación de azúcares. ml del glúcido correspondiente y 1 ml del
reactivo, esa solución se llevo a agua hirviendo
En la práctica que se realizó, el objetivo por varios minutos, donde se observo el
principal era utilizar una reacción general cambio de coloración de la solución.
y algunas específicas para la identificación
​Prueba de Barfoed
de glúcidos, azúcares reductores, aldosas o
cetosas y hexosas y pentosas, analizando la Se agrego en diferentes tubos 1 ml de cada
capacidad de ciertos tratamientos para uno de los glúcidos, posterior a esto se añadió
1 ml de agua destilada y 1 ml del reactivo,
ocasionar la hidrólisis de algunos
terminado estos procesos se llevo a un baño de
carbohidratos. agua hirviendo, se observo si se provocaba
algún cambio.
II. MÉTODOS Y MATERIALES

Reactivos Prueba de Bial

Acido sulfúrico (339741), alcohol amílico


(W205702), reactivo de Molisch (E4567),
reactivo de Benedict ( 349589) , reactivo de En esa prueba se aladio a cada tubos 1 ml de
Bial ( 35673) , reactivo de Barfoed (H474630), cada uno de los glúcidos, posterior a esto se
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añadió 1 ml de agua destilada y 2,5 ml del Figura 2. Mecanismo de la reaccion de


reactivo, posteriormente se dejaron en agua Molich.
hirviendo y se retiro al ver un cambio de
coloración.

Prueba de Selivanoff

Esta prueba se añadió primero el reactivo y


posteriormente se adiciono 5 gotas de cada
glúcido, se adiciono a un tuvo el reactivo y
agua destilada para tener un control negativo.
Estos tubo se llevaron a baño hirviendo
durante 1 minuto.

III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En la actualidad se tiene conocimiento de Figura 3. Resultados de la reacción de molish,


distintas reacciones, que nos ayudan a determinando como positivas las que
determinar e identificar los glúcidos de forma obtuvieron la coloración rosa.
cualitativa, estas son la reacción de Molish,
Benedict, Barfoed, Selivanof y bial, en cada El reactivo de Benedict es usado para
uno se determino distintas características de determinar los azucares reductores, en esta
cada uno de los azucares a trabajar. prueba los azucares positivos fueron la
glucosa, la fructosa, la lactosa y la maltosa,
Los azucares, azucares a trabajar fueron la esta reacción se da debido a que el ion
sacarosa,fructosa,maltosa, gluosa,arabinosa y cúpricico pasa a ion cuproso y este da la
el almidón, en la reacción de molish se coloración anaranjado después de que
determino principalmente si alguna de estas precipita.
azucares era o no un carbohidrato, para esto
determinamos entonces que la
fructosa,maltosa y glucosa son carbohidratos,
detereminado por la coloacion rojiza que se
mostro en esta prueba, esto coloración se da ya
que el compuesto furfurico que se genera de el
azúcar con el acido sulfurico, condensa el
reactivo de Molish generando la coloración
rojiza.

Figura 4. Reaccion de Benedic expresada en


fisher.
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Figura 5. Resultados de la prueba de benedict, Figura 6. Reaccion de Berford expresada en


determinando que los que poseen una Fisher.
coloración rojiza/ anaranjada son positivas.
Reacción de selivanoff
Por otro lado en las pruebas de Berford (
Esta es una reaccion se da ya que el
determinación de azucares reductores),
hidroximetilfurfural(producto de la
Selivanof (determinación de aldosas y cetosas)
deshidratación) se forma mucho mas rápido a
y en la prueba de Bial(determinación de
partir de cetohexosas y se forma mas lenta a
hexosas y pentosas) no se obtuvo un resultado
partir de aldohexosas, para esta prueba tuvo
deseado, probablemente por la contaminación
que dar positiva la fructosa y sacarosa.
cruzada o debido a que los reactivos habían
expirado su vida útil, pero, ¿como funcionan
estas reacciones?

Reacción de Berford:

Esta reaccion se da ya que el acetato de cobre


se hidroliza dando hidróxido de cobre (II) Figura 7. Mecanismo de la reaccion de
Selivanoff.
que se deshidrata a oxido de cobre (II). El
óxido cúprico reacciona con el azúcar Prueba de Bial
generando el ácido orgánico correspondiente
y un precipitado de óxido de cobre (I), para Esta reacción se da si cuando una pentosa
esta prueba debió dar positivo en ​la glucosa, está presente, ya que esta se deshidratará
fructosa, lactosa y maltosa para formar furfural que reaccionará con el
orcinol para general un compuesto
coloreado.

Figura 8. ​Mecanismo de la reaccion de Bial.


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sin embargo es necesario corroborar que los


IV. CONCLUSIONES reactivos estén en buenas condiciones y evitar
la contaminación cruzada para así poder
Existen en la actualidad diferentes formas y
obtener los resultados estimados por la teoría.
técnicas con las cuales se puede identificar la
presencia de hidratos de carbono, pero las
Es importante tener en cuenta que, para que la
pruebas cualitativas como la de Molisch,
reacción de reacción se lleve a cabo en un
Benedict, Barfoed, Bial y Selivanoff resultan
corto periodo de tiempo, es necesario un pH
ser bastante útiles y eficaces para, no solo
básico y una temperatura elevada, por dicha
reconocer si la sustancia en cuestión pertenece
razón se ponen las pruebas en agua hirviendo
a este grupo, sino también, verificar si son
por un tiempo.
azúcares reductores, la cantidad de carbonos
presentes y el grupo funcional que contiene,

V. REFERENCIAS Bioquímica​ (Quinta edición). Ediciones Omega.


pp. 238,239
[1] Morrison, R; Boyd, R. (1998). Química
[5]​ Biochemistry Department. «Colorimetric
Orgânica.5a edicion.Ed. Pearson.Pag 948-950 Identification of Unknown Sugars». ​Biochemistry
Laboratory 353.​ Smith College. Archivado desde ​el
[2] J. M. Berg, J. L. Tymoczko, L. Stryker original​ el 16 de julio de 2006.

(2002). Biochemistry. Ed. 5 [6]​Bonner, William A.; Castro, Albert J. (1974).


«12». ​Química orgánica básica​ (3ª edición). Madrid:
[3] Roca, P., Oliver, J., & Rodríguez, A. M.
Alhambra
(2004). Bioquímica: técnicas y métodos. Ed.
Hélice,
[4]​Nelson, David L.; Cox, Michael M. Cuchillo,
Claudi M., ed. ​Lenhinger. Principios de

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