Clase 5: Principios del cultivo de microorganismos

Microbiología Industrial
Jessica San Martín | Profesor

jsanmartin1@miuandes.cl
Temario
4. CINÉTICA DE CRECIMIENTO

4.1 Diseño de medios de cultivo.

4.2 Cinética de formación de productos.
. 4.3 Rendimiento y Productividades.
4.4 Clasificación cinética de fermentaciones por lotes.
Ejercicio

•Para realizar el proceso de fermentación en una empresa cervecera, los

fermentadores de un volumen útil 2.7 [m3 ] fueron inoculados con 30 [L] de un
inóculo propagado según el siguiente protocolo; Primero se inoculó con 700 [mL]
con un loop de levadura seleccionada y luego de 5 hrs. se obtuvo una concentración
celular 2 [g/L]. Estos 700 [mL] se inocularon en 29, 3 [L] de medio y luego de 10
hrs. de fermentación se obtuvo una concentración celular de 4 [g/L].

a)Determinar µ y el td de la cepa seleccionada.

b)Diseñe el medio de cultivo con glucosa, fosfato de potasio, cloruro de amonio,
sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro de potasio, siendo nitrogeno el
limitante para lograr una concentración celular de 5 [g/L] en el reactor.

Porcentaje de los elementos presentes en la Biomasa

%C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0,1 0,1 0,01
Ejericicio

•Solución

Como Determinar µ y el td?

¿Como iniciar ?
¿Con que se relacionan estos parámetros y que significan ?

μ= ln2
(tg ó td)

Xf = X eut
0
Ejericicio
Inóculo Reactor
X0= ¿?
•Solución X (5h)= 2 g/L
X0, t0=¿?
Como Determinar µ y el td? V=700 mL
¿Como iniciar ? Xf 10 h= 4 g/L T=10 h
¿Con que se relacionan estos parámetros y que significan ?
VT=Vinoculo+V1/2Rxtr
Primero se inoculó con 700 [mL] con un loop
de levadura seleccionada y luego de 5 hrs. se
obtuvo una concentración celular 2 [g/L].

μ= ln2 Estos 700 [mL] se inocularon en 29, 3 [L] de

medio y luego de 10 hrs. de fermentación se
obtuvo una concentración celular de 4 [g/L].
tg ó td

Xf=X0 eμt
Xf = 4 g/L

X0= 0 ó 2 ¿?

T = 10 ¿?
Ejericicio Primero se inoculó con 700 [mL] con un loop
de levadura seleccionada y luego de 5 hrs. se
•Solución obtuvo una concentración celular 2 [g/L].
DATOS Y DIAGRAMA Estos 700 [mL] se inocularon en 29, 3 [L] de
medio y luego de 10 hrs. de fermentación se
obtuvo una concentración celular de 4 [g/L].
contenedor1
V=7
0
X=2 0 [mL]=
[ 0,7L
t = 5 g/L]
h Tiempo

V=0,7 [L]
V=30 L Vf=29,3 [L]+0,7 L=30 L
X0= ¿? [g/L] Xf= 4 [g/L]
t=0h t = 10 h
V=29,3 [L]

Contenedor 2
 V1 x X1=V2 x X2
Ejercicio
inóculo Reactor
•Solución

V1 x X1=VR x X0
0,7 [L] x 2 [g/L] =(29,3 +0,7) [L] x X2

X0=X2= 0,046 [g/L] 0,05 [g/L]

Luego, Reemplazando en la ecuación de crecimiento, obtenemos μ

Xf=X0eμt
Ejericicio

•Solución

4 [g/L] =0,05 [g/L] eμx10 (h) Ln

μ =0,438 h-1
Ejericicio

•Solución

td= Ln2
μ 0,438 h-1

td = 1,57 h
Ejericicio

•Para realizar el proceso de fermentación en una empresa cervecera, los

fermentadores de un volumen útil 2.7 [m3 ] fueron inoculados con 30 [L] de un
inóculo propagado según el siguiente protocolo; Primero se inoculó con 700 [mL]
con un loop de levadura seleccionada, luego de 5 hrs. se obtuvo una concecntración
celular 2 [g/L]. Estos 700 [mL] se inocularon en 29, 3 [L] de medio y luego de 10
hrs. de fermentación se obtuvo una concentración celular de 4 [g/L].

a)Determinar µ y el td de la cepa seleccionada.

b)Diseñe el medio de cultivo con glucosa, fosfato de potasio, cloruro de amonio,
sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro de potasio, siendo nitrogeno el
limitante para lograr una concentración celular de 5 [g/L] en el reactor. La tabla
muestra la composoción elemental, en concentración de cada uno de los elementos
en la biomasa.

%C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0,1 0,1 0,01
 Ejercicio

a)Diseñe el medio de cultivo con: glucosa, fosfato de potasio, cloruro de amonio

(reactivo limitante), sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro de potasio,
siendo nitrógeno el limitante para lograr una concentración celular de 5 [g/L] en el
reactor.
1. ¿Que debemos determinar?
la concentración de cada uno de los sustratos

2. ¿ Como ?

Utilizando Utilizando la ecuación del rendimiento

• Sf : supuesto igual 0
• S0: pueden multiplicarse por 1.5 o 2.0 a excepción del nutriente que se requiera como limita

3. ¿ Que datos tenemos ?

Xf = 5 [g/L]
X0 = 0,05 [g/L] ⩰ 0
Sf ⩰ 0
Los valores de la tabla, que son los % de los elementos en la Célula, nos sirven para
 Ejercicio

a)Diseñe el medio de cultivo con glucosa, fosfato de potasio, cloruro de amonio,

sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro de potasio, siendo nitrogeno el
limitante para lograr una concentración celular de 5 [g/L] en el reactor.

Recordando!!!!!
Cuanto % del elemento hay en el compuesto que voy a utilizar

%C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0,1 0,1 0,01
Considerar tipo de metabolismo
En metabolismo aerobio : 0.5 – 0.6

En metabolismo anerobio : 0.1

Ejericicio Nitrógeno Limitante

%C %N %P %K %S %Mg %Ca
Glucosa cloruro de fosfato de cloruro de sulfato de sulfato de cloruro de
amonio potasio potasio magnesio magnesio calcio

C6H12O6 NH4Cl K2HPO4 KCl MgSO4 MgSO4 CaCl2

 %C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0,1 0,1 0,01

Ejemplo calculo de sustrato “Glucosa”

º
Carbono (C6H12O6) Y X/S,

Porcentaje de C en el sustrato, (PM C= 12)

% S = Peso de Carbono = ( 6xPMC )

Peso Molécula Glucosa ( 6xPMC +12xPMH +6xPMO)

Porcentaje de C en el sustrato, (PM C= 12)

% S = Peso de Carbono = ( 6x12 ) = 0,4

Peso Molécula Glucosa 6x12+12x1+16x6

Ejemplo cálculo de sustrato “Glucosa”

º
f, ¿?

En metabolismo anaerobio : 0.1

0,4 0,1
Y º X/S C = X
= 0,077
0,52

Y ºX/S = ∆X = Xf-X0 SUPUESTO solo Sf =0

∆S
S0-Sf

S0 (glucosa)= 5 [g/L]- 0,05[g/L] = 64,28 [g/L], de glucosa

0,077
Ejemplo calculo de sustrato “Glucosa”

S0 (glucosa)= 64,28 [g/L], de glucosa

Corregir la concentración ya que la glucosa es un sustrato que esta en

exceso.
supuesto: exceso del 50%.

S0 (glucosa)= 64,28 (g/L)x 1,5= 96,42 (g/L)

Resultado, debemos agregar una concentración de glucosa de 96,42

gramos/Litro.
 %C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0,1 0,1 0,01

Ejemplo calculo de sustrato “Glucosa”

º
Carbono (C6H12O6) Y X/S,

Porcentaje de C en el sustrato, (PM C= 12)

% S = Peso de Carbono = ( 6xPMC )

Peso Molécula Glucosa ( 6xPMC +12xPMH +6xPMO)

Porcentaje de C en el sustrato, (PM C= 12)

% S = Peso de Carbono = ( 6x12 ) = 0,4

Peso Molécula Glucosa 6x12+12x1+16x6

 %C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0,1 0,1 0,01

Ejemplo cálculo de sustrato “Glucosa”

º
f, ¿?

En metabolismo anaerobio : 0.1

0,4 0,1
Y º X/S C = X
= 0,077
0,52

Y X/S = ∆X = Xf-X0
¡¡¡¡¡¡SUPUESTO, X0 y Sf =0!!!!!!!!!
∆S S0-Sf
Despejando S0, tenemos

S0 (glucosa)= 5 [g/L]
= 64,93 [g/L], de glucosa
0,077
Ejemplo calculo de sustrato “Glucosa”

S0 (glucosa)= 5 [g/L]
= 64,93 [g/L], de glucosa
0,077

Corregir la concentración ya que la glucosa es un sustrato que esta en

exceso.
supuesto: exceso del 50%.

S0 (glucosa)= 64,93 (g/L)x 1,5= 97,34 (g/L)

Resultado, debemos agregar una concentración de glucosa de 97,34

gramos/Litro.
Resultados del cálculo de la concentración inicial de todos los sustratos

Sustrato g/L
C 64,93
P ¿?
N ¿?
Mg ¿?
Ca ¿?
K ¿?
S ¿?

¡¡¡ Calcular la concentración de fosfato de

potasio, cloruro de amonio (reactivo limitante),
sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro
de potasio!!!!