Vitae 23 (Supl.
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OBTENCION Y CARACTERIZACION DE PECTINA
EXTRAIDA DE LA CASCARA DE CACAO (Theobroma cacao L.)
MEDIANTE HIDROLISIS ACIDA.
PREPARATION AND CHARACTERIZATION OF PECTIN EXTRACTED FROM COCOA
HULLS (Theobroma cacao L.) BY ACID HYDROLYSIS.
William SOSA-ROMERO1*, Carmen MARTINEZ1, Ivan LOPEZ LEDEZMA1.
RESUMEN
Antecedentes: la cáscara de cacao (Theobroma
cacao L.) es considerada como materia prima de
relativo bajo costo por ser un subproducto de la
industria cacaotera y que actualmente está siendo
sub-aprovechado y podría ser una fuente factible de
producción de pectinas a nivel industrial. Objetivo:
El presente estudio tuvo como objetivo la extracción
y caracterización de la pectina a partir de la cáscara
de cacao (Theobroma cacao L.). Métodos: La pectina
se extrajo por el método de hidrólisis acida emplean-
do ácido cítrico y ácido sulfúrico como agentes de
extracción, durante 60 min de calentamiento a 85 °C
a pH 2,0 y 3,0 de acuerdo a (1), (2) y (3) establecien-
do un diseño factorial multicategórico 2 factores,
2 niveles. La pectina se caracterizó en términos de
contenido de metóxilos y de ácido galacturónico
(AGA) en base a lo propuesto por (4). Se utilizó el
programa estadístico Statgraphics® Plus 5.1 (2000)
para el análisis. Resultados: Los factores estudiados
tienen influencia sobre el rendimiento de pectina,
con un p-valor menor al 5%. El mayor rendimiento
de pectina fue de 11,03% obtenido al emplear ácido
cítrico a pH 2,0. Esta pectina presentó el mayor
contenido de AGA (68,29%) y un contenido de
metóxilo de 3,95%. La extracción de pectina con
ácido sulfúrico a pH 3,0 dio como resultado la
obtención de una pectina de bajo metóxilo (5,06%
metóxilos) y por ende de una menor capacidad
gelificante. Conclusión: El mayor rendimiento
de extracción de pectina se obtuvo cuando se
empleó ácido cítrico a pH 2,0, y se caracterizó por
tener un mayor contenido de ácido galacturónico
(AGA) (68,29%) cuyo valor representa la pureza
1
Ingeniero Agroindustrial, Grupo Biotecnología Agroindustrial y Ambiental (BIOTA), Universidad de Nariño, Pasto, Colombia.
*
Autor a quien debe dirigir la correspondencia: williamsosaromero@gmail.com
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del proceso de extracción. La pectina extraída a pH
3,0 con ácido sulfúrico presentó un contenido de
metóxilos de 5,06% indicando que es una pectina
de bajo metóxilo y de menor capacidad gelificante.
Palabras clave: Pectina, cacao, hidrolisis acida,
metóxilos, ácido galacturónico.
ABSTRACT
Background: the peel of cacao (Theobroma cacao
L.) is considered relatively low cost raw material to
be a byproduct of the cocoa industry which is cur-
rently being sub-taken and could be a feasible source
of pectin production at industrial level. Objective:
This study aimed at the extraction and character-
ization of pectin from the peel of cacao (Theobroma
cacao L.). Methods: The pectin was extracted by the
acid hydrolysis method using citric acid and sulfuric
acid as extractants, 60 min of heating at 85°C and
at pH 2.0 and 3.0 for each agent according to (1),
(2) and (3) and a multicategorical factorial design
with 2 factors, 2 levels was established. The pectine
was characterized in terms of methoxyl content and
galacturonic acid (AGA) based on proposed by (4).
To analyze Statgraphics® Plus 5.1 (2000) software
was used. Results: The studied factors influence
the performance of pectin, with a p-value less
than 5%. The highest yield of 11.03% pectin was
obtained by using citric acid at pH 2.0. This pectin
had the highest content of AGA (68.29%) and a
methoxyl content of 3.95%. Pectin extraction with
sulfuric acid to pH 3.0 resulted in obtaining a low
methoxyl pectin (5.06% methoxyl) and hence less
gelling ability. Conclusions: The highest yield of
extraction of pectin was obtained when citric acid at
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pH 2.0 was used, and was characterized by a higher
content of galacturonic acid (AGA) (68.29%) whose
value represents the purity of the process extraction.
The pectin extracted at pH 3.0 with sulfuric acid
showed a methoxyl content of 5.06% indicating a
low methoxyl pectin and less gelling ability.
Keywords: Pectin, cocoa, acid hydrolysis, me-
thoxyl, galacturonic acid.
INTRODUCCIÓN
El cacao (Theobroma cacao L.) es uno de los pro-
ductos agroalimentarios de origen neotropical de
mayor penetración en el mercado internacional y
sus exportaciones en grano han representado más
de 71% de volumen producido. En la explotación
cacaotera solo se aprovecha económicamente la
semilla, que representa aproximadamente un 10%
del peso del fruto fresco. Esta circunstancia se ha
traducido en serios problemas ambientales así como
también problemas de disposición. Los desechos
generados están constituidos en su mayoría por la
cáscara, que además se considera un foco para la
propagación de Phytophora spp, causa principal de
pérdidas económicas de la actividad cacaotera (3).
(5) extrajo pectinas del endocarpio de cacao con un
rendimiento de 8,0% en base seca. Mientras que
(6) obtuvo un rendimiento de extracción de 8,0%
a 11,0% (base seca) a partir de cáscaras de cacao. De
lograr extraer pectinas de dicha fuente se aumenta-
ría el valor agregado del cacao y podría representar
una solución parcial al problema ambiental generado
por las cáscaras. Así entonces, esta investigación
tiene como objetivo establecer si la cascara de cacao
es una fuente significativa de pectina y lograr una
caracterización de esta para analizar la eficiencia
de la hidrolisis acida como método de extracción,
poniendo así en evidencia el aprovechamiento que
puede tener la cascara de cacao contribuyendo a la
disminución de la contaminación de los ambientes
donde actualmente se ven sus efectos negativos.
MATERIALES Y METODOS
Preparación de la materia prima
Se seleccionaron cáscaras del fruto de cacao en
buen estado, provenientes de la zona pacifica del de-
partamento de Nariño. Posteriormente se trocearon
y deshidrataron a 55ºC hasta alcanzar un contenido
de humedad de aproximadamente 6% en la mufla
STANDARD ASTM E 145-94 Type 11ª. Una vez
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secas fueron molidas hasta a un tamaño de partícula
de 4 um empleando un tamiz de malla 80.
Hidrólisis acida
Se siguió la metodología planteada por (1),
(2) y (3) bajo un diseño factorial multicategórico
con dos agentes extractantes (ácido cítrico y ácido
sulfúrico) correspondientes al factor A y dos valores
de pH (2,0 y 3,0) correspondientes al factor B. Se
usó una relación de 1L de agua por 100 gramos de
cáscaras. Las soluciones acidas fueron sometidas
a calentamiento durante 60 minutos a 85ºC con
agitación constante. Luego se filtraron usando tela
de liencillo, enfriando rápidamente por debajo de
25ºC y se centrifugo en la centrifuga DINAMYC
CENTRIFUGE PATETN No 211,466 durante
10 minutos a 3.000 r.p.m. Al sobrenadante se le
adiciono etanol al 95% y se dejó reposar durante
24 horas. La pectina extraída se secó a temperatura
ambiente. Los ensayos tuvieron dos replicas. Se es-
timó el rendimiento de extracción como la relación
entre el peso de la pectina extraída y el peso inicial
de la cáscara seca.
Caracterización de la pectina
Se evaluaron el contenido de metoxilos (% Me-
toxilos) (ecuación 1) y la cantidad de ácido anhidro
galacturónico (%AAG) (ecuación 2), de acuerdo a
lo planteado por (4) donde una solución de 0,5 g de
pectina /100 ml de agua se tituló con NaOH 0,1 N
(meq A). Luego se añadió 25 ml de NaOH 0,25N,
se dejó reposar por 30 min, y se agregó 25 ml de
HCl 0,25N; se tituló con NaOH 0,25N (meq B).
gasto (ml)*Normalidad*3,1
peso muestra (gr)
(Ecuación 1)
176*100 (meq A+meq B )
=
mg de pectina
(Ecuación 2)
Análisis estadístico
Los resultados fueron interpretados mediante el
análisis de varianza, grafico de interacciones y prue-
ba de comparación de medias LSD de Fisher a un
nivel de significancia del 5% mediante el programa
estadístico Statgraphics® Plus 5.1 (2000).
RESULTADOS
La tabla 1 presenta los resultados obtenidos del
rendimiento de la extracción y de las características
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fisicoquímicas de la pectina extraída de la cáscara del cambur manzano (10) se presentó cuando se
de cacao mediante hidrólisis acida empleando como empleó un pH 2.0 del agua acidulada con ácido
agentes extractantes ácido cítrico y ácido sulfúrico a cítrico. Según (2) el incremento en el rendimiento
pH 2,0 y 3,0. En la tabla 2 se presenta el resumen de podría estar asociado a que durante el proceso de
la ANOVA de dos factores aplicado a los valores de hidrólisis además de pectina se extrajeron dife-
rendimiento de extracción, contenido de metóxilos rentes biomoléculas existentes en la corteza como
y de ácido galacturónico en términos de porcentaje. almidón, hemicelulosa, celulosa entre otros. El
rendimiento obtenido en esta investigación resulta
Tabla 1. Rendimiento de extracción y características ser superior al reportado por (3) (2,64-4,69 %) de
fisicoquímicas de la pectina.
cacao, e inferior a los encontrado por (6) del 8-11%
Agentes de Extracción Ácido Cítrico Ácido Sulfúrico y (5) del 8% de rendimiento de extracción a partir
pH 2.0 3.0 2.0 3.0 de cáscara de cacao.
11,5 6,73 7,96 2 Aunque la interacción de los pH y ácidos tiene
Rendimiento (%) 10,97 6,89 7,81 1,5 un efecto significativo en el porcentaje de metóxilo
10,62 7,03 6,89 2,45
(5,06%), con una combinación de ácido sulfúrico y
3,61 4,18 3,49 5,01
pH 3, sin embargo siguen siendo pectinas de bajo
Metóxilo (%) 4,33 4,23 3,27 4,94
3,92 4,09 3,38 5,24
metóxilo al estar por debajo de 7% (3) lo que podría
67,57 38,46 57,24 50,23 estar relacionado a la composición química del fruto
AGA (%) 69,4 35,62 55,38 52,99 y al efecto del agente extractante que posiblemente
67,89 34,16 54,76 50,36 induce el rompimiento de los ésteres metílicos cau-
sando una disminución del contenido de metóxilo
Tabla 2. ANOVA de dos factores aplicado al rendimiento
(2). El porcentaje de metóxilo encontrado en este
de extracción, contenidos de metóxilo y AGA.
estudio (5,06%) es mayor al encontrado por (2) de
Valor p 2,22% y a (10) con 3,23%; y se encuentra en el rango
Fuente de variación Rendimiento % Metóxilo AGA establecido por (3).
Tipo de acido 0,0000 0,2141 0,1858 El pH tiene un efecto significativo en el porcen-
pH 0,0000 0,0000 0,0000 taje de ácido galacturónico permitiendo un alcance
Interacciones 0,0235 0,0003 0,0000 mayor a pH bajos, lo que significa una pureza mayor
de la pectina (11). El mayor contenido de ácido ga-
DISCUSIÓN lacturonico (AGA) (68,29%), se obtuvo con ácido
cítrico a pH 2,0. Este contenido de AGA es superior
Se encontró que tanto los factores (tipo de ácido a los valores obtenidos por (6) correspondientes al
y pH) como sus interacciones influyen significati- 33,2 y 36,2% y por (3) de 49,8 y 64,06% de AGA
vamente en cada parámetro evaluado, a excepción en pectinas de cáscaras de cacao.
del efecto del tipo de ácido sobre el contenido de
metóxilo y de ácido galacturónico (AGA), cuyo valor CONCLUSIÓN
p fue mayor a 0.05. Durante el proceso de extracción
se obtuvo una fracción de sustancias pécticas de El mayor rendimiento de extracción de pectina
color pardo, esta coloración según (6, 7) se debe a la se obtuvo cuando se empleó ácido cítrico a pH 2,0,
presencia de compuestos fenólicos, específicamente y se caracterizó por tener un mayor contenido de
a la presencia de taninos. La obtención de pectina ácido galacturónico (AGA) (68,29%) cuyo valor re-
de color oscuro también fue reportada por (8) quien presenta la pureza del proceso de extracción. La pec-
extrajo pectina a partir de cáscara de cacao. tina extraída a pH 3,0 con ácido sulfúrico presentó
Según la tabla 1 el mayor rendimiento de ex- un contenido de metóxilos de 5,06% indicando que
tracción fue de 11,03 %, el cual se obtuvo cuando es una pectina de bajo metóxilo y de menor capaci-
se utilizó ácido cítrico como agente extractante a dad gelificante. Aunque las condiciones de hidrólisis
pH 2,0, mientras que el rendimiento a pH 3,0 con ácida de extracción de pectina a partir de cáscara de
los dos tipos de ácido fue menor. Otros estudios cacao no resultaron ser las mejores se justifica que
concuerdan con lo encontrado en esta investigación, este subproducto de la industria cacaotera pueda
el mayor rendimiento de extracción de pectina a ser una fuente factible de obtención de pectina si se
partir de frutos de Maushan (9) y de la cáscara optimizan las condiciones de extracción.
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