EJERCICIOS DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

ESTEQUIOMETRÍA DE PROCESOS FERMENTATIVOS

1. Un investigador quiere cultivar una levadura (50% C y 7% N) en cultivo por

lotes (discontinuo o batch). Desea comenzar desde una concentración
inicial de biomasa de 0.5 g/l, dejando que el cultivo crezca por 5 horas (t d =
45 min). Como fuente de carbono desea utilizar sacarosa y como fuente de
nitrógeno (sustrato limitante) usará sulfato de amonio. Para proporcionar las
otras sales y vitaminas dispone de un preparado comercial concentrado que
no necesita ser formulado. Calcule las concentraciones iniciales de carbono
y nitrógeno.

2. En un experimento de laboratorio se cultivo E. coli en medio mínimo. El

cultivo se realizó en un agitador rotatorio (shaker), primero a 37 oC hasta
consumir la mitad del nutriente limitante y después a 4 oC hasta alcanzar la
fase estacionaria.

a. Diseñar el medio de cultivo con Mg como nutriente limitante, si se desea un

incremento total de biomasa de 7 g/l. Los demás nutrientes deben estar en
exceso del 100%. El pH se mantendrá constante por medio de un tampón
no metabolizado. La composición celular y las fuentes recomendadas son
las siguientes:

Elemento Fuente % biomasa

C C6H12O6 50
N NH4Cl 14
S K2SO4 1
Mg MgCl2 0.5
P K2HPO4 2

3. Para realizar el proceso de fermentación en una empresa cervecera, los

fermentadores de un volumen útil de 2.7 m 3 fueron inoculados con 30 L de
inóculo propagado según el siguiente protocolo: Primero se inocularon 700
ml con la levadura seleccionada; luego de 5 h se obtuvo una concentración
celular de 2 g/l. Estos 700 ml fueron adicionados a 29.3 L de medio y luego
de 10 h de fermentación se obtuvo una concentración celular de 4 g/l.
Diseñe el medio de cultivo con glucosa, fosfato de potasio, cloruro de
amonio, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro de potasio, siendo
nitrógeno el limitante para lograr una concentración celular de 5 g/l en el
reactor, si la composición de algunos elementos de la biomasa es la
siguiente:
 %C %N %P %K %S %Mg %Ca
52 10 2 1 0.1 0.1 0.01

4. Determine cuáles serían las necesidades de aire en litros a C.N. para

suministrar el oxígeno a un cultivo bacteriano para hacer crecer la biomasa
en 5 g/l, utilizando glucosa como fuente de carbono y energía. Asuma que
la fuente de nitrógeno es amoniaco y que todo el sustrato es convertido a
biomasa, CO2 y H2O. La composición elemental de la célula es: 50% C,
22% O, 10% H, 14% N, trazas.

5. La producción bacteriana del aminoácido lisina puede representarse por la

siguiente ecuación:

a C6H12O6 + b NH3 + c O2 → d C4.4H7.3N0.86O1.2 + e CO2 + f H2O + C6H14O2N2

(Biomasa) (Lisina)

Sabiendo que el rendimiento global de glucosa en biomasa es 0.19 g/g y el de

glucosa en producto es 0.3 g/g, determine:

a. Los coeficientes estequiométricos de la ecuación.

b. El rendimiento máximo posible de glucosa en biomasa (Y XS si todo el
sustrato se convirtiera en biomasa).

Datos: El medio de cultivo contiene inicialmente 45 g de glucosa por litro. Y PS =

0.57 g/g.

6. A un fermentador con 4.9 litros de medio se agregaron 100 ml de un inóculo

bacteriano con una concentración de 25 g/l. La cepa se dejó crecer y al
cabo de “n” horas se obtiene en le fermentador una concentración de
biomasa de 35 g/l. Exprese, en función de n, el valor de t d y el tiempo que
debería haber estado la cepa en el fermentador para alcanzar la misma
concentración del inóculo (25 g/l).