UNIVERSIDAD RICARDO PALMA

Facultad de Medicina Humana

Asignatura: Microbiología

BACTERIAS ANAEROBIAS
Docente: Dra. Roxana Sandoval Ahumada
Especialista en Patología Clínica y Maestría en Biología Molecular
Miembro del Comité Local de Prevención y Control de Infecciones Asociadas a la Atención de la Salud del
Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen
Miembro del Comité Nacional de Prevención y Control de la Tuberculosis de EsSalud

Semestre académico 2021

Bacterias anaerobias no esporuladas:
Bacteroides
Bacterias anaerobias esporuladas:
Clostridium
 BACTERIAS ANAEROBIAS NO
ESPORULADAS

Clasificación:
-fragilis
Familia Bacteroidaceae -vulgatus
-ovatus
-Bacteroides -thetaiotamicron
-Fusobacterium -distasonis
-Prevotella -ureolyticus
-Porphyromonas -gracilis
Hábitat

• Los BGNA forman parte de la microbiota de las mucosas oral,

gastrointestinal y genital. La colonización con bacterias anaerobias
comienza luego del nacimiento y se incrementa en cantidad y
diversidad a través del tiempo.
Bacteroides spp.

• Son los más frecuentemente aislados de infecciones por anaerobios en

el ser humano: Bacteroides fragilis.
• Gran cantidad de factores de virulencia y mayores tasas de resistencia
contra los antimicrobianos.
Factores de virulencia

Los BGNA poseen factores de virulencia que le permiten adherirse,

invadir y constituirse en biofilms. La formación de abscesos y la
destrucción tisular son presentaciones características de estas bacterias.

• Adhesinas
• Cápsula: polisacáridos capsulares de B. fragilis (abscesos
intraabdominales).
• Producción de ácidos grasos de cadena corta: pueden inhibir la
actividad bactericida de los neutrófilos.
Factores de virulencia

• Lipopolisacárido: la porción del LPS, denominada lípido A, es una

endotoxina que estimula la respuesta inmune innata y es mediador de
shock séptico.
• Enzimas hidrolíticas: hemolisinas, proteasas, colagenasas,
neuroaminidasas, lipasa
• Enterotoxina: poderosa metaloproteasa descrita en las especies
enterotoxigénicas de B. fragilis.
Impacto clínico

• Las infecciones por BGNA son en su gran mayoría polimicrobianas,

piogénicas, de origen endógeno y se localizan en la proximidad de las
superficies mucosas, donde las bacterias anaerobias se encuentran en
una proporción 10 a 1000 veces mayor que las aerobias.
• Una minoría de las infecciones causadas por estos microorganismos son
adquiridas por vía exógena, como las producidas por mordeduras de
animales y humanos; las ocasionadas por heridas de golpes de puño u
otras de origen zoonótico, observadas en huéspedes
inmunocomprometidos.
• Los BGNA se aíslan principalmente de infecciones intraabdominales,
odontógenas, del tracto genitourinario, de piel y partes blandas y de
bacteriemias.
Patogenia

.
Patogenia

.
Patogenia

.
Diagnóstico microbiológico

• Medios enriquecidos:
Agar sangre anaerobio: hemina, vit K y AA.
Agar Bacteroides bilis esculina con amicacina (BBE). Es un medio
selectivo para Bacteroides del grupo fragilis.

• Bacteroides spp. son BGNA de desarrollo rápido (24 a 48 h) con

resistencia a todos los antibióticos de potencia especial. En su mayoría
no son pigmentados y desarrollan en bilis al 20 %.

• Ambiente: atmósfera libre de oxígeno

Diagnóstico microbiológico

• Las especies de Bacteroides producen colonias grandes a las 48 h de

incubación.
• Colonias: 1-3 mm de diámetro, color gris o blanco, enteras, convexas,
traslúcidas u opacas y no hemolíticas.
Diagnóstico microbiológico

• Al igual que la morfología macroscópica, el micromorfotipo observado

en la coloración de Gram, es muy útil en la identificación presuntiva.
 BACTERIAS ANAEROBIAS ESPORULADAS

• Hay cuatro especies patógenas principales.

Clostridium

tetani botulinum difficile perfringens

Hábitat

• Clostridium spp. se distribuyen en el medio ambiente en forma ubicua,

es así que pueden encontrarse en el suelo, sedimentos marinos,
pasturas y vegetales en descomposición.

• Resistencia: esporas

Clostridium difficile se distribuye en el medio hospitalario y sus esporas

pueden ser transportadas por el agua, el polvo, el instrumental médico u
otros objetos.
Hábitat

• Algunas especies integran la microbiota residente del hombre y de los

animales, entre ellas Clostridium perfringens, Clostridium septicum y C.
difficile.
Factores de virulencia

Los BGNA poseen factores de virulencia que le permiten adherirse,

invadir y constituirse en biofilms. La formación de abscesos y la
destrucción tisular son presentaciones características de estas bacterias.

• Toxinas
Las toxinas clostridiales de mayor impacto clínico son las producidas por
C. perfringens, C. tetani, C. botulinum, C. difficile y C. septicum.
Factores de virulencia

• C. perfringens: enterotoxina (actúa como superantígeno con respuesta

inflamatoria exacerbada), responsable de cuadros gastroentéricos.
También toxina alfa, con acción hemolítica y necrótica y es esencial en
el desarrollo de gangrenas.
• C. tetani: produce una hemolisina sin actividad patogénica denominada
tetanolisina y una neurotoxina, tetanospasmina, responsable de la
sintomatología de la enfermedad.
• C. botulinum: neurotoxina (Entre las toxinas bacterianas identificadas,
las botulínicas se reconocen como las más potentes), llega al torrente
sanguíneo y actúa en la membrana presináptica de las neuronas
motoras donde bloquea la liberación del neurotransmisor.
• C. difficile: toxinas A y B, presentan actividad similar, causan necrosis,
aumento de la permeabilidad intestinal e inhibición de la síntesis
proteica, daña las microvellosidades de la mucosa intestinal y puede
producir una erosión completa de las mismas
Patogenia

Clostridium perfringens
Se le implica en tres enfermedades:
• La intoxicación alimentaria por C. perfringens se presenta con náuseas,
dolor abdominal y diarrea espumosa y maloliente. Se asocia a la
ingestión de alimentos, en particular cárnicos, contaminados con una
elevada carga del toxinotipo A. El período de incubación es de 8 a 24 h.
Los síntomas son relativamente leves, de corta duración (menos de 24
h) y se deben a la acción de la enterotoxina.
• Enteritis necrozante: inicia1 días después, por toxina beta necrotóxica.
Patogenia

Clostridium perfringens
• Gangrena gaseosa: Se presenta luego de traumatismos abiertos o
cerrados, pero se asocia en particular a heridas contaminadas. La
acción de las toxinas (toxina α) causa gran destrucción tisular al mismo
tiempo que favorece la diseminación del MO, exacerba la toxemia y
genera una marcada hemólisis intravascular
• Clásica, tras una lesión traumática o lesión abdominal, celulitis
anaeróbica en pacientes con leucemia y sepsis puerperal – gangrena
uterina, después de un aborto.
Patogenia

Clostridium tetani
Tétanos: una enfermedad toxigénica, con frecuencia se asociada a
heridas, mordeduras, fracturas expuestas o quemaduras contaminadas
por el polvo o por objetos corto-punzantes (astillas, espinas, clavos) que
contengan esporas de C. tetani. P.I.: 2 sem
Neurotoxina tetánica y se disemina al SNC. El
resultado es una hiperexitabilidad de las neuronas
motoras con contracciones tónicas y clónicas,
espasmos musculares, parálisis y disfunción
autónoma, lo cual puede conducir a un estado de
contractura generalizada y permanente y
finalmente, a la muerte del paciente por parálisis
espástica de los músculos respiratorios.
Patogenia

Clostridium botulinum
• Botulismo: Intoxicación alimenticia que produce enfermedad paralítica.
• Se caracteriza por una parálisis fláccida, simétrica y descendente. La
misma comienza por los pares de nervios craneales, desciende hacia los
músculos del tórax y de las extremidades y puede causar la muerte del
individuo por falla respiratoria. Las manifestaciones de flaccidez suelen
estar precedidas por síntomas gastrointestinales como náuseas,
vómitos, diarrea o constipación.
Patogenia

Clostridium botulinum
• También puede tratarse de una toxoinfección por la germinación de
esporas en el tubo digestivo, lo cual sucede en lactantes, con menor
frecuencia en niños menores de 1 año o en algunos adultos con
colonización intestinal por este MO y factores predisponentes.

• Se encuentra en el suelo contaminando, legumbres y frutas, en

alimentos enlatados (pescado, embutidos).
Patogenia

Clostridium difficile
• La infección por C. difficile toxigénico produce un amplio espectro de
manifestaciones clínicas, desde la colonización del tracto
gastrointestinal, diarrea leve a mod., hasta colitis pseudomembranosa
con graves complicaciones y riesgo de vida para el paciente como en los
casos de megacolon tóxico, ileo paralítico y perforación colónica.
• Colitis pseudo membranosa: en pacientes que han recibido exceso de
antibióticos: (cefalosporinas, clindamicina o fluoroquinolonas).
• Causa el 25-30 % de las diarreas adquiridas en el medio hospitalario y el
15 a 25 % de los episodios asociados a tratamientos antibióticos.
Diagnóstico microbiológico

Clostridium perfringens

Cultivo líquido (caldo thioglicolato) y sólido (agar sangre anaerobio).

Características
Bacilos finos cortos gram
positivos con espora
subterminal.
Diagnóstico microbiológico ANAEROBIOS

Colonias rodeadas de una zona de

hemólisis, debido a las toxinas α y β
producidas por C. perfringens
Diagnóstico microbiológico

Clostridium tetani
El diagnóstico de tétanos se realiza en base a las manifestaciones clínicas
y a los antecedentes del paciente.
C. tetani se puede aislar a partir del tejido infectado u objeto hallado en
la herida; sin embargo, este procedimiento no es muy empleado ya que
la sensibilidad de los cultivos es baja.

Características
Bacilos finos cortos gram positivos.
Espora terminal deformante
en palillo de tambor
Diagnóstico microbiológico

Clostridium botulinum
El diagnóstico del botulismo se basa en las manifestaciones clínicas y la
epidemiología. La identificación de las toxinas se realiza en laboratorios
de referencia. Para ello se examinan alimentos, heces y suero de los
individuos afectados y en el caso de animales, también se incluyen
tejidos.

Características
Bacilos gram positivos,
con espora subterminal
ovalada.
Diagnóstico microbiológico

Clostridium difficile
Demostración de la enterotoxina o citotoxina en heces.
Cultivo líquido (caldo thioglicolato) y sólido (agar ANA). Difícil desarrollo.
Pruebas de inmunocromatografia para detección de toxinas.

Características
Bacilos gram positivos, con
espora central o subterminal.
Diagnóstico microbiológico ANAEROBIOS

La recuperación e identificación de estos microorganismos está

condicionada a:
• Sospecha clínica adecuada
• Correcta toma, transporte y conservación de la muestra: Es necesario
evitar la contaminación de la muestra con la microbiota residente de
piel y mucosas. Las muestras deben ser protegidas del efecto deletéreo
del O2 hasta que puedan ser procesadas. Lo ideal es cultivarlas de
inmediato. Las muestras líquidas, purulentas y de volumen considerable
pueden transportarse en tubos estériles si se van a cultivar antes de las
dos horas. De lo contrario deben inyectarse en frascos, sin introducir
aire. Los raspados, hisopados y piezas de tejido pequeñas pueden
colocarse en tubos que contengan medio de Stuart o Cary-Blair.
• Métodos diagnósticos:
-Coloración de Gram (morfología compatible con anaerobios)
Diagnóstico microbiológico ANAEROBIOS

• Métodos diagnósticos:
-Los medios de cultivo usados pueden ser
sólidos o líquidos, selectivos.
-Incubación en atmósfera libre de oxígeno. Las
jarras o cajas para anaerobiosis son los sistemas
más utilizados para generar una atmósfera
anaeróbica. Consisten en una jarra o caja con
una tapa que cierra herméticamente y contiene
un sobre generador de anaerobiosis.
-Primera observación: 48 hrs  7 días
-Colonias: Gram
-Pruebas bioquímicas: crecimiento en bilis,
catalasa. (automatizado).
-Pruebas moleculares.
Diagnóstico microbiológico ANAEROBIOS