BACILOS GRAM EGATIVOS

OBJETIVO
Conocer las caractersticas bacteriologas epidemiolgicas, determinantes de
patogenicidad, cuadros clnicas e identificacin por el laboratorio de bacterias de
importancia clnica como enterobacterias (bacilos fermentadores de glucosa) y bacilos
gram negativos no fermentadores de glucosa.

1. BACILOS FERMETADORES DE GLUCOSA:

ETEROBACTERIAS

Para este tema debe desarrollar los siguientes puntos con base en la bibliografa dada al
final del presente texto.

1. Clasificacin: Los gneros que contienen las especies ms virulentas para el
hombre son: Escherichia, Shigella, Salmonella, Klebsiella, Proteus y Yersinia,
otros como Enterobacter, Serratia, Morganella y Providencia ms frecuentemente
causales de infecciones intrahospitalarias
2. Describir morfologa y tincin al Gram y caractersticas de crecimiento y
metabolismo
3. Nombrar los determinantes de patogenicidad
4. Definir y explicar los siguientes trminos
a. Enterobacterias oportunistas
b. Enterobacterias enteropatgenas: nombrar las bacterias que siendo
enterobacterias se encuentran en este grupo
Nombrar los cuadros clnicos causados por las enterobacterias oportunistas y las
enteropatgenas


2. BACILOS NO FERMENTADORES DE GLUCOSA:
PSEUDOMONAS Y BACTERIAS NO FERMENTADORAS RELACIONADAS

Introduccin

Pseudomonas y bacilos relacionados constituyen una mezcla de patgenos oportunistas
de los vegetales, animales y el hombre. Existe un gran nmero de gneros que incluyen
bacilos no fermentadores, pero relativamente son pocos los que se aslan con cierta
frecuencia.
A Continuacin se expone una lista de gneros bacilos Gram negativos no fermentadores
con significado clnico
Pseudomonas
Stenotrophomonas
Alkaligenes
Acinetobacter
Burholderia
Eikenella
Flavobacterium
Moraxella
Actinobacillus
Cardiobacterium

PSEUDOMOAS
Son organismos ubicuos que se encuentran en el suelo, materia orgnica en
descomposicin, vegetacin y agua. Sin embargo, tambin se encuentra en el medio
hospitalario en reservorios hmedos como alimentos, flores cortadas, instrumental, pisos,
baos, equipo de terapia respiratoria e incluso en soluciones desinfectantes.
La amplia distribucin ambiental de estas bacterias esta favorecida por sus simples
requerimientos nutricionales para su desarrollo, incluso son capaces de crecer en el agua
destilada. Tienen capacidad de crecer prcticamente en cualquier medio y de resistir la
mayora de los antimicrobianos empleados habitualmente.
El agua hirviendo y la desecacin destruyen estas bacterias.
En general las infecciones por Pseudomonas tienen carcter primariamente oportunista.
La especie de Pseudomonas mas frecuentemente asociada con enfermedad humana es
la. Pseudomonas aeruginosa Puede causar del 10 al 20% de infecciones
intrahospitalarias compartiendo o reemplazando incluso al Staphylococcus aureus como
principal patgeno en pacientes con fibrosis quistica, con enfermedades neoplsicas o
quemaduras severas.

FISIOLOGIA Y ESTRUCTURA.
Pseudomonas son bacilos gram negativos que se mueven por medio de flagelos polares,
aerobios, no esporulados.
El trmino NO FERMENTADORES est referido a que utilizan pocos hidratados de
carbono (glucosa entre otros) mediante metabolismo oxidativo y NO por va fermentativa.
Esto se evidencia por el abundante desarrollo en 24 horas en TSI (agar triple azcar
hierro) pero no acidifican la profundidad de este medio.
El oxigeno acta como aceptor final de electrones y la enzima citocromo oxidasa presente
en Pseudomonas sirve para diferenciarlas de las enterobacterias.
Algunas Pseudomonas producen pigmentos difusibles como piocianina (azul verdoso),
Fluorescena (amarillo) y piorrubina (rojo-pardo).
Cuando crecen en agar sangre son beta hemolticos y oscurecen el medio donde crecen.
Su temperatura ptima de crecimiento es de 35C pe ro puede hacerlo a 42C.
El gnero Pseudomonas se compone de varias especies diferentes que se distinguen por
su propiedades bioqumicas y genticas.

FACTORES DE VIRULENCIA.
Las Pseudomonas poseen varios factores de virulencia entre los que se incluyen
componentes estructurales, toxinas y enzimas. Siendo difcil establecer el papel de cada
factor en la patogenia de la enfermedad, se cree que la virulencia de Pseudomonas es
multifactorial.
Pilis o fimbrias. Median la adherencia al epitelio respiratorio.
Cpsula. La cpsula polisacrida protege a la bacteria de la fagocitosis. Ayuda a la
colonizacin del epitelio respiratorio en pacientes con fibrosis quistica o enfermedades
respiratorias crnicas.
Diseminacin. Debido a la movilidad por su flagelo polar.
Enzimas: Fosfolipasa C.
Proteasas: Elastasa.
Proteasa alcalina.
Fosfolipasa C: Descompone lpidos y leitina lo que facilita la destruccin tisular.
Elastasa: Cataliza la destruccin de las firas elsticas delas paredes de los vasos
Sanguneos,lo que produce lesiones hemorrgicas (ectima gangreoso) que se encuentra
en las infecciones deseminadas por P. aeruginosa.
Proteasa alcalina: Producen destruccin tisular, inactivacin de anticuerpos e
inactivacinde neutrfilos.
Toxinas: Exotoxinas: Exotoxina A
Exotoxina S
Enterotoxina
Endotoxinas
Exotoxina A: Importante factor de virulencia producido por P.aeruginosa. Bloquea la
sntesis de protenas de las clulas eucariticas, de forma similar a la toxina diftrica, pero
la exotoxina A es menos txica.
Exotoxina S: Tambin inhibe sntesis proteica pero sta es termo estable.
Enterotoxina: Responsable de la diarrea asociada a infeccin intestinal.
Endotoxina: Asociada a Sepsis por la presencia de Lpidos A.

SINDROMES CLINICOS:
La P. aeruginosa puede infectar casi cualquier tejido corporal.

1. LESIONES LOCALIZADAS: Se puede encontrar infectando quemaduras y heridas,
tejido corneal, vas urinarias o pulmonares. Desde una lesin localizada puede
diseminarse por va hematgena produciendo sepsis o infecciones focales en otros
tejidos.
2. BACTERIEMIAS Y ENDOCARDITIS. La bacteriemia por P: aeruginosa clnicamente
es indistinguible de otras bacteriemias por bacterias Gram negativas, aunque es de
elevada mortalidad.
Es comn en pacientes con neutropenia, diabetes mellitus, quemaduras extensas y
neoplasias malignas hematolgicas.
La mayora de las bacteriemias se producen a partir de infecciones del tracto
respiratorio bajo, infecciones urinarias, la piel y tejidos blandos (quemaduras
infectadas.)
La endocarditis por P. aeruginosa es ms comn en adictos a drogas intravenosas.
Afecta ms a la vlvula tricspide y es de curso crnico
3. INFECCIONES PULMONARES. Las infecciones por P. aeruginosa pueden ir desde
simple colonizacin o traqueobronquitis hasta bronconeumona necrotizante grave. La
infeccin pulmonar por esta bacteria en pacientes con fibrosis qustica se asocia a la
exacerbacin de la enfermedad subyacente y en pacientes con neutropenia y otras
formas de inmunosupresin, debido al empleo de equipos de terapia respiratoria
contaminados.
4. INFECCIONES DEL OIDO: P. aeruginosa se asocia con otitis externa (odo de
nadador) con un factor de riesgo como es la natacin, tambin se asocia a formas
ms graves como son la otitis externa maligna y la otitis media crnica.
5. INFECCIONES DE QUEMADURAS: La colonizacin de quemaduras por P.
aeruginosa, seguida por lesin vascular localizada y necrosis tisular e incluso
bacteriemia no es infrecuente en pacientes con quemaduras graves. La superficie
hmeda de las quemaduras y la ausencia de respuesta neutrfila frente a la invasin
tisular, predispone a las infecciones por esta bacteria.
6. OTRAS INFECCIONES: P. aeruginosa tambin se asocia con infecciones del sistema
nervioso central, sistema msculo esqueltico, tracto gastrointestinal e infeccin del
tracto urinario observado en pacientes con catteres vesicales permanentes.

EPIDEMIOLOGIA
Las infecciones por P: aeruginosa se producen sobre todo en pacientes con las defensas
alteradas como son:
Pacientes con quemaduras.
Pacientes con enfermedades neoplsicas o alteraciones metablicas.
Pacientes sometidos a instrumentaciones y/o manipulacin.
Tratamientos prolongados con antimicrobianos, radioterapia, quimioterapia.
Drogadictos intravenosos.

La transmisin de paciente a paciente a travs del personal hospitalario es mas
significativo que su transmisin por aire

DIAGNOSTICO POR EL LABORATORIO.
TINCION DE GRAM: Bacilos gram negativo.
CULTIVO: Crece bien en agar sangre con colonias grandes, en forma de ojo de
pescado,color blancogrisaceas.
En agar MacConkey con colonias lactosa negativa, pequeas.
En agar Muller Hinton P. aeruginosa produce un pigmento visible llamado piocianina.
IDENTIFICACION: Se realiza mediante la prueba de la citocromooxidasa que da positiva.
Inoculacin en SIM para observar movilidad.
Inoculacin en agar TSI cuya lectura es K/K lo que demuestra que no hay proceso de
fermentacin en este medio de cultivo.
Prueba de OXIDACION FERMENTACION (O-F): Se usa el medio de cultivo denominado
O-F que contiene glucosa y azul de bromotimol como indicador de pH. Como la
mayora de los Bacilos gram negativos No fermentadores producen cido sumamente
dbil. Este medio contiene una concentracin relativamente mayor de hidratos de
carbono para aumentar la produccin de cidos permitiendo que estos cidos se
difundan por todo el medio, facilitando la visualizacin del viraje del indicador de pH.
Tcnica para realizar la prueba OF: Se usan dos tubos que se inoculan por picadura y a
uno de ellos se le agrega aceite mineral. Tras incubacin de 24 horas la produccin de
cido se detecta en el medio por el viraje de color de verde a amarillo.

Son tres las reacciones que se esperan a partir de la utilizacin de la glucosa en este
medio:
-.Proceso fermentativo de la glucosa: Si el tubo cerrado (con aceite mineral) y el tubo
abierto viran a amarillo, o sea reaccin cida en ambos tubos.
-.Proceso oxidativo de la glucosa: Si slo el tubo abierto tiene reaccin cida.
-.No se utiliza la glucosa: Ninguno de los dos tubos presenta reaccin cida.


REPASO
Complete los siguientes cuadros y flujograma con el fin de reforzar el aprendizaje.

ESPECIE Gram Catalasa Coagulasa Fermentacin
del manitol
DNasa
S. aureus


S. epidermidis


S. saprophyticus






GUIA BIBLIOGRAFICA PARA CONSULTAR






1. Jawetz, Ernest. Microbiologa mdica. 17. ed. Editorial Appleton and Larg. 2002
2. Murray, Patrick R. Microbiologa mdica, 2da ed. Editorial Harcourt Brace, Espaa,
1.997
3. Vlez, Hernn y col. Fundamentos de Medicina. Enfermedades Infecciosas. 6. ed.
Editorial Corporacin para Investigaciones Biolgicas. Medelln 2003.
4. Banfi A., W Lederann, J. Cofr, J. Cohen. Enfermedades infecciosas en Pediatria. Ed.
Mediterraneo. Chile. 1998.
5. Wilson Walter R. Diagnstico y tratamiento de enfermedades infecciosas. 1 ed.
Editorial Manual Moderno; Mxico, 2002
6. Forbes, Betty et al. Diagnstico Microbiolgico. 11a ed. Editorial Mdica
Panamericana; Argentina, 2004
7. Liebana Urea Microbiologia Oral Editorial Mc Graw Hill Interamericana 2002
8. Mandell, Gerald. Enfermedades Infecciosas. Principios y prctica, Vol, 2. ed. Editorial.
Mdica Panamericana, 1997
9. http://www.monografias.com/trabajos16/microbiologia-clinica/microbiologia-
clinica.shtml#BACTER


Prueba de laboratorio GRAM Serogrup
Lancefield
Bacitracina Optoquina CAMP Agar Bilis
Esculina
Nombre Bacteria
Streptococos
pyogenes

S. pneumoniae
S. agalactiae
S. bovis