FACULTAD DE MEDICINA HUMANA QUÍMICA

Por Liudmila Nevsgoda Banatskaya

PROCEDIMIENTOS COMUNES DE
LABORATORIO

INTRODUCCIÓN
Esta separata tiene como objetivo dar a conocer cuáles son las operaciones
más comunes en el laboratorio así como sus posibilidades y optimizaciones y,
en algunos casos, las nuevas tendencias en el modo de trabajar.
Paralelamente, será muy importante la adquisición, por parte del alumnado, de
buenos hábitos de trabajo en el laboratorio de manera que se utilicen como
pauta para poder desarrollar correctamente los experimentos prácticos que se
le exigirán en cursos superiores.

Las personas que trabajen en el laboratorio deben utilizar material muy diverso,
diseñado cada uno para una función específica y poder alcanzar un objetivo
concreto.  El progreso de la técnica estos últimos años ha hecho que en los
laboratorios existan nuevos recursos que hacen el trabajo del químico más fácil
y rápido. No obstante, la utilización de material clásico como son las balanzas,
embudos, probetas, pipetas, etc., es imprescindible tanto en la síntesis de
productos químicos como durante la preparación de la muestra para
introducirla en un aparato.

Así pues, el primer objetivo será el conocimiento de este material, sus nombres
y la aplicación o aplicaciones que tienen diferentes versiones de un mismo
utillaje según el tipo de trabajo que se deba realizar. Una vez conocido el
material de laboratorio el siguiente objetivo será ver como se utiliza este
material en lo que podríamos denominar operaciones básicas de laboratorio.
En esta fase, el alumnado debe aprender la manera correcta de trabajar y
conocer los problemas que pueden surgir en la manipulación de los diferentes
aparatos, así como su mantenimiento.
Las principales operaciones básicas de laboratorio son:

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PRECIPITACIÓN:
La precipitación es un proceso rápido de obtención de un sólido a partir de una
disolución. Puede realizarse por una reacción química, por evaporación del
disolvente, por enfriamiento repentino de una disolución caliente, o por cambio
de polaridad del disolvente. El sólido así obtenido se denomina precipitado y
puede englobar impurezas. En general será necesario recristalizar
posteriormente.
La precipitación encuentra aplicación en la separación de un componente de
una mezcla de compuestos, ya sea por reactividad o bien por distinta
solubilidad en un determinado disolvente.

DECANTACIÓN:
La decantación puede utilizarse para separar mezclas de sólidos y líquidos
cuando no se utilice la filtración. Consiste en dejar reposar la suspensión hasta
que, por gravedad, se depositen las partículas sólidas en el fondo del
recipiente. Después se trasvasa con cuidado el líquido a otro recipiente
procurando que no pasen las partículas sólidas.

CENTRIFUGACIÓN:
La centrifugación es una técnica de separación que se utiliza para aislar o
concentrar partículas suspendidas en un líquido aprovechando la diferente
velocidad de desplazamiento según su forma, tamaño o peso al ser sometidas
a una fuerza centrífuga. La fuerza centrífuga es la que se ejerce sobre un
cuerpo cuando éste gira alrededor de un eje.

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La centrifugación se utiliza para separar partículas en suspensión en el seno de

un líquido o partículas en disolución, siendo éste el caso donde se encuentran
más aplicaciones. Así, se utiliza habitualmente en biología, ya que permite
separar células, orgánulos sub celulares o macromoléculas.

PESADA:
Las balanzas son instrumentos destinados a equilibrar la fuerza de la gravedad
que actúa sobre la masa de un cuerpo con la que actúa sobre otro que se toma
como referencia.
Las balanzas se caracterizan por su exactitud y por su sensibilidad. La
primera cualidad se refiere a la propiedad que posee cualquier instrumento
físico para suministrar el resultado de una medida con un valor coincidente con
el verdadero; ello implica que el error sea lo más reducido posible. El término
exactitud se toma con frecuencia como equivalente al de precisión. La
sensibilidad está determinada por la aptitud de determinar con exactitud
resultados de valores muy reducidos, y puede expresarse como la diferencia
entre valores extremos de varias medidas de la misma magnitud.

En general en todos los métodos de análisis químicos es necesario determinar

la masa (pesar) exacta en alguna etapa, y para esto se utiliza una balanza
analítica de precisión de 0,1 mg. En otras ocasiones no es necesario conocer

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la masa de una manera tan precisa, y entonces se utilizan balanzas monoplato

que son más resistentes y de menor precisión.

USO DE MECHERO BUNSEN:

Tipos de llama:
1.- Sin entrada de aire. Llama reductora.
2.- Poca entrada de aire.
3.- Mucha entrada de aire.
4.- Máxima entrada de aire. Llama oxidante.

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FILTRACIÓN:
Se denomina filtración al proceso a través del cual se separan partículas
sólidas de un líquido utilizando un filtro. La técnica consiste en verter la mezcla
sólido-líquido que se quiere tratar sobre un filtro que permita el paso del líquido
pero que retenga las partículas sólidas.
El líquido que atraviesa el filtro se denomina filtrado.
El filtro, en general, es de papel poroso, pero puede ser de otros materiales que
permitan el paso de líquidos. En cualquier caso es necesario seleccionar la
porosidad del filtro según el diámetro de las partículas que se quieren separar..
Según la fuerza impulsora que ayuda a que el líquido pase a través del filtro, la
filtración puede clasificarse en:
 Filtración por gravedad
 Filtración al vacío
Filtración por gravedad:
Fundamento: la única fuerza impulsora para que el líquido atraviese el filtro es
la gravedad.  Es el método más sencillo y tradicional.
Utilidad: separar un sólido de un líquido cuando lo que se quiere recuperar es
el líquido. Ofrece la máxima superficie de filtración de manera que ésta es más
rápida.
Material: soporte, aro metálico, embudo cónico, papel de filtro en forma cónica
o de pliegues, recipiente para recoger el líquido (erlenmeyer, matraz, vaso de
precipitados), varilla de vidrio.
Montaje del filtro en el embudo:

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Plegado del papel filtro:

Procedimiento:
El objetivo es hacer pasar la suspensión a través del filtro y recoger el líquido
filtrado. Primero se coloca el papel de filtro dentro del embudo y éste se sitúa
sobre el recipiente de recogida, sostenido por el aro metálico. El filtro se puede
mojar con la misma clase de disolvente que contiene la suspensión. A
continuación se vierte lentamente la suspensión sobre el filtro con la ayuda de
una varilla de vidrio, de forma que no se derrame el contenido. Finalmente, las
partículas sólidas retenidas en el filtro pueden lavarse con pequeñas porciones
de disolvente (el mismo que contiene líquido filtrante).

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Filtración al vacío:
Fundamento: la fuerza impulsora para que el líquido atraviese el filtro es la que
ejerce la presión atmosférica cuando aplicamos el vacío al sistema. Es el
método más rápido y a veces permite la filtración de aquellas suspensiones en
las que la fuerza de gravedad no es suficiente para el proceso.
Utilidad: separar un sólido de un líquido, cuando lo que se quiere recuperar es
el sólido. Ofrece la mínima superficie de filtración para recoger mejor el sólido.
El hecho de aplicar la succión con vacío permite acelerar la velocidad de
filtración.
Material: soporte, pinza metálica, embudo de Büchner, papel de filtro circular
(de un tamaño que cubra la base del embudo sin sobrepasarla), matraz de
Kitasato, adaptador de goma o de caucho, varilla de vidrio, conexión a un 
sistema de vacío (bomba de succión, trompa de agua). El embudo de Büchner
y el papel de filtro pueden sustituirse por una placa de filtración

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SECADO:
Secar o desecar es la eliminación de agua de un sólido, líquido o gas. El
secado o la desecación es la operación que consiste en separar mediante
procedimientos no mecánicos un líquido de un sólido que lo retiene
físicamente.
 Las condiciones para secar productos sólidos dependen de la cantidad de
sólido, de la naturaleza del disolvente que se quiere eliminar y de la
sensibilidad del producto al calor y a la atmósfera.
Las muestras cristalinas de compuestos estables húmedos con disolventes no
tóxicos y volátiles a temperatura ambiente (como por ejemplo agua o etanol) se
pueden secar al aire colocando los cristales entre hojas de papel desecante
hasta que sólo queden trazas de disolvente (que se detecta por el olor o por el
aspecto). Finalmente se acaban de secar en una estufa eléctrica a la
temperatura adecuada.

DESTILACIÓN:
El proceso de la destilación consiste en calentar un líquido hasta que sus
componentes más volátiles pasen a fase vapor y, posteriormente, enfriar el
vapor hasta recuperar estos componentes en forma líquida mediante un
proceso de condensación (conversión de fase vapor a fase líquida por
enfriamiento del vapor).

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MANIPULACIÓN DE TUBOS DE ENSAYO:

Calentar el tubo de ensayo en el punto donde se encuentra el menisco del
líquido, siempre agitando y acercando y alejando el tubo continuamente de la
llama del bunsen para que no hierva incontroladamente.
No calientes tubos de ensayo que contengan más de un tercio del volumen del
líquido. No dirijas nunca la boca del tubo de ensayo hacia uno mismo o hacia
otras personas cercanas.

MEDIDA DE VOLÚMENES:
Para realizar una lectura correcta del volumen de líquido utilizando una
probeta, pipeta o bureta, es necesario que los ojos del observador estén a la
altura del menisco del líquido tal, como se puede observar en la imagen
siguiente:

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La lectura correcta de volumen medido se hace en la marca a la que el

menisco toca tangencialmente: Por ejemplo, el volumen que se registra en la
imagen es de 8.8 mililitros.

TITULACIÓN
La titulación es un método para determinar la cantidad de una sustancia
presente en solución. Consiste en adición controlada de una solución (ácida o
básica), contenida en la bureta, a solución (básica o ácida, respectivamente),
contenida en un erlenmeyer, hasta que ocurre la neutralización completa entre
ellas. Una de las dos soluciones es de concentración conocida con exactitud y
se llama solución patrón. La otra es la que se analiza y cuya concentración se
está determinando. El procedimiento implica tener cuidado en el uso correcto
de la bureta (lavado, llenado y enrace a cero), asi como destreza en determinar
el momento en el viraje de color, señal de llegar al punto de equivalencia.

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En el caso ideal, la adición se detiene cuando se ha agregado la cantidad de

reactivo determinada en función de un cambio de coloración en el caso de
utilizar un indicador interno, y especificada por la siguiente ecuación de la
titulación.
NA VA = NB VB
A este punto se le llama punto de equivalencia.

En términos generales, la reacción entre cantidades equivalentes de ácidos y

bases se llama neutralización o reacción de neutralización, la característica de
una reacción de neutralización es siempre la combinación de hidrogeniones
que proceden del ácido, con hidroxilos procedentes de la base para dar

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moléculas de agua sin disociar, con liberación de energía calorífica como calor
de neutralización y formación de una sal.
En las titulaciones se pueden utilizar indicadores internos. Los indicadores son
compuestos orgánicos de estructura compleja que cambian de color en
solución a medida que cambia el pH.

EVAPORACIÓN:
Con frecuencia es necesario reducir el volumen de una disolución que contiene
un soluto no volátil.

El vidrio de reloj apoyado

a una varilla permite que
el vapor escape y proteja
la disolución restante de
una contaminación
accidental. El empleo de
ganchos de vidrio para
proporcionar espacio
entre el borde del vaso y
un vidrio de reloj
convencional es menos
satisfactorio que el uso
del vidrio de reloj, como
se muestra en la figura.

A menudo resulta difícil controlar la evaporación por la tendencia de algunas

disoluciones a sobrecalentarse localmente. El burbujeo que resulta puede ser
suficientemente vigoroso para ocasionar una pérdida parcial de la disolución.
Un calentamiento cuidadoso y suave reducirá al mínimo el peligro de esa
pérdida. Cuando se permite su uso, las perlas de vidrio también disminuyen el
burbujeo.
Durante la evaporación se pueden eliminar algunas especies no deseadas. Por

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ejemplo, se pueden eliminar de una disolución los cloruros y nitratos agregando

ácido sulfúrico y evaporando hasta que se observe la formación y eliminación
de humos blancos de trióxido de azufre (esta operación debe hacerse en una
campana de extracción). La urea es útil para eliminar el Ion nitrato y los óxidos
de nitrógeno de las disoluciones ácidas. La eliminación de cloruro de amonio se
logra por la adición de ácido nítrico concentrado y la evaporación de la
disolución hasta un volumen pequeño. El Ion amonio se oxida rápidamente por
calentamiento; entonces la disolución se evapora a sequedad.
En general, los constituyentes orgánicos se eliminan de una disolución
mediante la adición de ácido sulfúrico y calentamiento en una campana, hasta
la aparición de humos de trióxido de azufre; este proceso se conoce como
combustión húmeda. Se puede agregar ácido nítrico al final del calentamiento
para acelerar la oxidación de los restos de materia orgánica.

DILUCIÓN DE LAS SOLUCIONES:

Las disoluciones concentradas que no se utilizan normalmente, se guardan en

el almacén del laboratorio. Con frecuencia estas disoluciones "de reserva" se
diluyen antes de utilizarlas. La dilución es el procedimiento que se sigue
para preparar una disolución menos concentrada a partir de una más
concentrada.
Por Ejemplo:
Suponga que se desea preparar 1.00 litro de una disolución de KMnO 4 0.400 M
a partir de una disolución de KMn0 4 1.00 M. Para ello se necesitan 0.400 moles
de KMn04. Puesto que hay 1.00 moles de KMn0 4 en 1.00 litro (o 1000 ml) de
una disolución 1.00 M, en 0.400 X 1000 ml o 400 ml, de la misma disolución,
habrá 0.400 moles de KMn04:
Número de moles de soluto antes y después de dilución, es el mismo. Como el
número de moles del soluto viene ser el producto de molaridad (M) por
volumen en litros de solución, podemos construir la ecuación siguiente:
M soluc. conc. x V,l soluc. conc. = M soluc. dil. x V,l soluc. dil.
De esta ecuación podemos determinar el volumen de la solución concentrada
necesaria para diluir 1.00 litro:
M soluc. dil. x V,l soluc. dil. 0.40 mol/l x 1.00 l
V,l soluc. conc. = =

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M soluc. conc. 1.00 mol/l

Por tanto, se deben tomar 0.40 l o 400 ml de la disolución de KMnO 4 1.00 M y

diluirlos hasta 1000 ml, adicionando agua (en un matraz volumétrico de 1 litro).
Este método da 1.00 litro de la solución deseada de KMnO 4 0.400 M.

Al efectuar un proceso de dilución, conviene recordar que al agregar más

disolvente a una cantidad dada de la disolución concentrada, su concentración
cambia (disminuye) sin que cambie el número de moles de soluto presente en
la disolución.

EXTRACCIÓN:
En esta práctica, se asume que el extracto obtenido por extracción soxhlet
corresponde al contenido graso de la muestra. Se determina su masa, una vez
libre de disolvente, por pesada (método gravimétrico). Muchas veces, la
extracción Soxhlet se usa como primer paso de una purificación o separación.
La extracción de muestras sólidas con disolventes, generalmente conocida
como extracción sólido-líquido o lixiviación, es un método muy utilizado en la
separación de analitos de muestras sólidas.
Los métodos tradicionales de extracción sólido-líquido pueden dividirse en dos
grandes grupos.
1. Métodos que necesitan un aporte de calor,
2. Métodos que no requieren un aporte de calor: agitación con ultrasonidos y
agitación simple.
La extracción Soxhlet ha sido (y en muchos casos, continua siendo) el método
estándar de extracción de muestras sólidas más utilizado desde su diseño en el
siglo pasado, y actualmente, es el principal método de referencia con el que se
comparan otros métodos de extracción. Esta técnica clásica es utilizadad como
método oficial para la extracción continua de sólidos.
El equipo Soxhlet consta de un balón esmerilado de fondo redondo (2), en el
que se coloca el solvente extractor (1), conectado con la cámara de extracción
(4), que contiene en su estructura el tubo de desvio lateral (3), por el cual
asciende el vapor del solvente al calentarlo. El vapor sube al refrigerante de
reflujo (9), acoplado con la conexión esmerilada (8) con la cámara de

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extracción y que tiene las conexiones para la entrada (10) y salida (11) de agua
para la refrigeración, se condensa en el refrigerante y gotea sobre un cartucho
con el material que contiene el soluto a extraer (5). Cuando en la cámara de
extracción el solvente se acumula hasta el mismo nivel (6) del tubo de
desembalse (7), ocurre el trasvase del solvente de nuevo, al balón (2). El
trabajo se repite constantemente, es por ello que la extracción se denomina
continua.

El balón se calienta en una cocinilla o con una manta eléctrica, evitando el uso
de llama directa, especialmente, si trabajamos con el solvente muy volátil e
inflamable.

EXTRACCIÓN DISCONTINUA :
La decantación es un proceso físico de separación de mezclas, especial para
separar mezclas heterogéneas, estas pueden ser exclusivamente líquido –
líquido ó sólido – líquido.

Esta técnica se basa en la diferencia de densidades entre los dos

componentes, que hace que dejándolos en reposo se separen quedando el
más denso arriba y el más fluido abajo.

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La decantación (del latín decantatĭo, -ōnis) es un método físico de separación

de mezclas heterogéneas, formadas por dos líquidos inmiscibles y de diferente
densidad. Es necesario dejarla reposar para que el líquido se sedimente, es
decir, descienda y sea posible su extracción.
Método
La decantación se basa en la diferencia de densidad entre los dos
componentes que hace que al dejarlos en reposo, ambos se separen hasta
situarse el menos denso en la parte superior del envase que los contiene. De
esta forma, es posible vaciar el contenido más denso por la parte inferior del
envase y transferirlo a un nuevo envase o filtro (si así lo requiere). Y es
realizada con un decantador, el cual permite la separación de las mezclas
heterogéneas, es decir, las mezclas que no se unen.
Un ejemplo es el agua y el aceite. En el proceso de decantación, las partículas
cuya densidad es mayor que el agua sedimentan en la superficie del
decantador por acción de la gravedad. A este proceso se le llama
desintegración másica de los compuestos o impurezas; las cuales son
componentes que se encuentran dentro de una mezcla, en una cantidad
mayoritaria. El dispositivo para la extracción por decantación se llama pera de
decantación.

CRISTALIZACIÓN:
El método de cristalización es separar un soluto sólido para separarlo de un
disolvente haciendo que cristalice el soluto, (inverso al proceso de la disolución
Este método se utiliza para separar una mezcla de sólidos que sean solubles
en el mismo disolvente pero con curvas de solubilidad diferentes.

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Una vez que la mezcla esté disuelta, puede calentarse para evaporar parte de
disolvente y así concentrar la disolución.
Para el compuesto menos soluble la disolución llegará a la saturación debido a
la eliminación de partes de disolvente y precipitará.
Todo esto puede irse precediendo sucesivamente e ir disolviendo de nuevo los
distintos precipitados (esto recibiría el nombre de cristalización fraccionada)
obtenidos para irlos purificando hasta conseguir separar totalmente de dos
sólidos. Cada nueva cristalización tiene un rendimiento menor, pero con este
método puede alcanzarse el grado de pureza que se desee.
Normalmente, cuando se quieren separar impurezas de un material, como su
concentración es baja la única sustancia que llega a saturación es la deseada y
el precipitado es prácticamente puro. La cristalización es el proceso inverso de
la disolución.
Una forma simple de explicación sería la siguiente.
Técnica que consiste en hacer que se cristalice un soluto sólido con objeto de
ser separado del disolvente en el que este disuelto. Para ello conviene
evaporar parte del disolvente o dejar que el proceso ocurra a temperatura
ambiente. Si hay un enfriamiento rápido se obtiene pequeños cristales, cuando
es lento los cristales son de mayor tamaño.

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