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Practica 12: Serología

Dra. Nancy Montserrat Alvarez


Principio de aglutinación Técnica o Procedimiento
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente antes de usar.
Agitar el Reactivo A antes de usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.

I- TECNICA CUALITATIVA
Muestra 1 gota (50 ul) Reactivo A 1 gota (50 ul) (PCR-ASO, FR látex )
- Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una suspensión
uniforme en toda la superficie del círculo.
- Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa
y observar macroscópicamente el resultado bajo un haz luminoso dentro
de los 2 minutos.

II- TITULACION
Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas – dobles
consecutivas
a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de los tubos o
pocillos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo Nº 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta
dilución al tubo Nº 2 y mezclar, continuando así las diluciones hasta el
último tubo. Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16,
etc. c) Ensayar cada dilución según la TECNICA I
Practica 12: Serología
HGC Anti estreptolisina O REPORTE
Cálculo de la concentración:
Título x Factor de conversión

ASO (UI/ml)
1:1= 200
La prueba de hCG-Látex es una técnica de aglutinación en porta Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por su 1:2= 400
para la detección directa cualitativa de la hCG en orina. Las reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de 1:4= 800
partículas de látex recubiertas con anticuerpo monoclonal anti- látex. Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan con la
hCG (Nota 1) son aglutinadas por moléculas de hCG presentes en estreptolisina produciendo una aglutinación visible 1:8= 1600
la muestra del paciente macroscópicamente. 1:16= 3200
Factor reumatoide
Factor reumatoide
El FR-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de factores UI/ml
reumatoides (FR) en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana son
aglutinadas por factores reumatoides presentes en la muestra del paciente.
1:1= 12
1:2 = 24
1:4= 48
1:8= 96
IgM actuando como IgG actuando como
anticuerpo anticuerpo 1:16= 192
1:32= 384
IgG actuando como IgG actuando como
antígeno antigeno
Practica 12: Serología

Inmunocromatografia Ejemplo de ensayos:


Los anticuerpos se unen al Determinación de
coloide de selenio-Ags y a los anticuerpos IgG/IgM. Usar
antígenos de ventana en la pipeta capilar (10ul de
superficie. Muestra es suero y suero, plasma o sangre
plasma. Sangre total usa una total. Agregue en
gota de tamp{on. Agregar 50 «sample» mas 4 gotas de
ul de muestra en la superficie diluyente. Leer entre 15 a
absorbente. Leer entre 15-60 20 min
min

La muestra reacciona con la


partícula cubierta con el
anticuerpo anti rotavirus y
anticuerpo anti
adenovirus..Tomar de 3 sitios
La membrana tiene
de la muestra. Diluir 1-2 ml .
acoplado anticuerpos
Transferir 2 gotas dentro del
anti HBSAg en la región
tubo colector que contiene
del test de prueba.
buffer de extracción. Agite y
Agruegar 3 gotas de
mezcle.
muestra de suero o
Romper el tapón verde y
Una muestra que contiene antígeno fluye a través de una membrana porosa de plasma. Debe leerse a
verter 2 gotas al cassette.
los 15 min
nitrocelulosa, y las reacciones positivas se observan a través de una banda coloreada Leer 10-20 min
Practica 12: Serología

Principio de Floculación
Las partículas de carbón tienen adsorbidas sustancias
como colesterol, lecitina y cardiolipina o conocidas como
reaginas plasmáticas en la prueba de RPR
Floculación es una prueba basada en la reacción visible del
antigeno artificial , esto es debido al desarrollo de
anticuerpos que reaccionan mediante la combinación de un
lipoide

Técnica
-Agregue una gota de control positivo, control negativo y
muestra en los pocitos correspondientes
-A cada pocito agruegue una gota de particula de carbón
-Observar aglutinación y hacer la lectura a los dos minutos
-Si es necesario realizar dilución y titular

Reporte
(+) Reactivo 1:4
( -) No reactivo
Practica 11: Serología
RPR. Procedimiento cualitativo y cuantitativo

100 ul sln salina 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64


Diluciones dobles
100 ul de suero
Latex/carbón consecutivas

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