UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHOMANN

Facultad De Ciencias De La Salud - Escuela De Farmacia Y Bioquímica

UNIVERSIDAD NACIONAL
JORGE BASADRE DE GROHMANN
Facultad de Ciencias de la Salud
Escuela Profesional de Farmacia y Bioquímica

ANALISIS CLINICOS II-PRACTICA N°11

Determinación de proteína C reactiva - Factor
reumatoideo
APELLIDOS Y NOMBRES:
Choque Mamani, Doris 2017-125038
PROFESORA:
MGR. Q.F. Nelson Arteaga Téllez

TACNA-PERÚ
2021
PRACTICA N°11
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA - FACTOR REUMATOIDEO
I. OBJETIVOS
Determinar la proteína C reactiva.
Identificar y determinar el factor reumatoideo.
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II. INTRODUCCIÓN

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA

Su nombre se debe a la capacidad para precipitar los polisacáridos C de los
neumococos. Es una de las llamadas proteínas de fase aguda y se incrementa en suero,
en una gran variedad de enfermedades inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular.
La PCR se encuentra comúnmente aumentada en: artritis reumatoidea activa,
infecciones virales, tuberculosis, fiebre reumática activa, infarto agudo de miocardio,
etc. También se la puede hallar luego de una operación quirúrgica y en gran porcentaje
luego de transfusiones sanguíneas. La determinación de PCR no sólo indica la
intensidad de la enfermedad sino también la respuesta del paciente a un tratamiento
dado.

La PCR se detecta en suero por reacción con un anticuerpo específico adsorbido sobre
un soporte inerte de látex. La PCR se une a los anticuerpos adsorbidos produciendo la
aglutinación de las partículas de látex.

FACTOR REUMATOIDEO
Los FR de tipo IgM están presentes en el 85-90% de los adultos con artritis
reumatoidea, aunque no es específico de la enfermedad puesto que también se han
encontrado en individuos sanos (en un 3 a 5% de los casos).

El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de gamma-

inmunoglobulina o fracción II de Cohn (que en este caso es el
antígeno) adsorbida sobre un soporte inerte de látex-poliestireno. Este
antígeno se une a los FR (anti-IgG) produciendo una aglutinación de
las partículas de látex poliestireno, visible macroscópicamente.

III. MATERIALES
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA FACTOR REUMATOIDEO
C REACTIVA
Provisto Provisto
 placas de plástico o vidrio fondo  placas de plástico o vidrio fondo
negro negro.
 1 tapa gotero de 25 ul
No provisto
No Provisto  Palillo o varilla de vidrio.
 pipetas y micropipetas capaces de  Cronómetro.
dispensar los volúmenes indicados  Material volumétrico adecuado.
 palillos mezcladores descartables  Fuente de luz.
 cronómetro
 lámpara o fuente de luz

IV. PROCEDIMIENTO

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA

Toma de muestra (Suero)

a. Recolección: obtener suero de la manera usual.
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b. Aditivos: no se requieren.
c. Sustancias interferentes conocidas: los sueros marcadamente lipémicos o
contaminados pueden dar resultados falsamente positivos.

Reactivos
a. REACTIVOS PROVISTOS
 Reactivo A: suspensión de partículas de látex-poliestireno
sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR.
 Control Positivo*: dilución de proteínas séricas conteniendo
proteína C reactiva.
 Control Negativo*: dilución de proteínas séricas no reactiva.
b. REACTIVOS NO PROVISTOS
 Solución fisiológica.

Procedimiento
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente antes de usar. Agitar
el Reactivo A antes de usar

I-TECNICA CUALITATIVA
 Colocar en la placa:
 Muestra o Control 25 ul
 Reactivo A 1 gota (25 ul)
 Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una suspensión
uniforme en toda la superficie del círculo.
 Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa
y observar macroscópicamente el resultado bajo un haz luminoso
dentro de los 2 minutos

II- TITULACION
Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en 8 tubos
de Kahn.
a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de
los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo N.º 1 y mezclar.
c) Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo N.º 2 y
mezclar, continuando así las diluciones hasta el último
tubo.
d) Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8,
1:16, etc.
e) Ensayar cada dilución según la TECNICA I.
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FACTOR REUMATOIDEO

Toma de muestra (Suero)

a. Recolección: obtener suero de la manera usual. No deben usarse muestras
inactivadas por calor.
b. Aditivos: no se requieren.
c. Sustancias interferentes conocidas: hemólisis y ciertas proteínas (distintas
del factor reumatoideo) pueden ser causa de resultados erróneos.

Reactivos
a. REACTIVOS PROVISTOS
 Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliestireno de
0,20 micrones de diámetro, que tienen adsorbidas moléculas
termo agregadas de gamma-inmunoglobulina o fracción II de
Cohn.
 Control Positivo: dilución de suero humano positivo. Equivale
a 2 (+).
 Control Negativo: dilución de suero humano negativo.
b. REACTIVO NO PROVISTO
 Solución fisiológica.

Procedimiento
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente antes de usar.

I- TECNICA CUALITATIVA
 En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta al equipo,
colocar:
 Muestra 1 gota (50 ul)
 Reactivo A 1 gota (50 ul)
 Mezclar con palillo o varilla de vidrio hasta obtener una suspensión
uniforme en toda la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente,
disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y observar
macroscópicamente el resultado dentro de los dos minutos bajo un haz
luminoso.
II- TECNICA SEMICUANTITATIVA
Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas, en 6 tubos
de Kahn.
a) Colocar 0,4 ml de solución fisiológica al primer tubo y 0,2 ml de
solución fisiológica a los 5 restantes.
b) Agregar 0,1 ml (100 ul) de suero al tubo No 1 y mezclar. Transferir 0,2
ml de esta dilución al tubo No 2 y mezclar, continuando de esta forma
las diluciones hasta el último tubo. Las diluciones así obtenidas
equivalen a 1:5; 1:10; 1:20; 1:40; 1:80; 1:160.
c) Ensayar cada dilución según la Técnica Cualitativa.

V. RESULTADOS
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DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA (Interpretación de

resultados)
Negativo: suspensión homogénea.
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos.
Se califica de 1 a 4 +.
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible
macroscópicamente.
La concentración aproximada de PCR en la muestra puede ser calculada por la
fórmula siguiente:
PCR (mg/l) = Título x Sensibilidad de la reacción (6 mg/l)
 Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. Su concentración de PCR es
de 2 x 6 = 12 mg/l.

VALORES DE REFERENCIA
Hasta 6 mg/l.

FACTOR REUMATOIDEO (Interpretación de resultados)

TÉCNICA CUALITATIVA
Negativo: suspensión homogénea.
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos minutos. Se califica de 1 a
4 (+), siendo:
 4+: aglutinación franca
 3+: moderada aglutinación
 2+: ligera aglutinación
 1+: aglutinación débil

TÉCNICA SEMICUANTITATIVA (TITULACIÓN)

Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible
macroscópicamente.
La concentración aproximada de factor reumatoideo en la muestra puede ser
calculada por la fórmula siguiente:
FR (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (1 UI/ml)

 Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:40. Su concentración en FR es

de 40 x 1 = 40 UI/ml.

VALORES DE REFERENCIA: No están claramente establecidos. Se consideran

patológicos valores superiores a 20-30 UI/ml.
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VI. CONCLUSIONES
Cuando existe un nivel alto de esta proteína puede aumentar la incidencia de
enfermedades cardiacas, que, a su vez, puede inducir un paro cardiaco.
Mecanismos relacionados de la PCR en los núcleos de las células sinoviales,
sugieren que estas pueden promover la eliminación de células y membranas
dañadas.
La extracción tanto de la PCR como de la PCT resulta útil para la
diferenciación de los pacientes con SIRS que tienen origen infeccioso y,
asimismo, la presencia de leucocitos y PCR positiva aumenta el valor
predictivo de una apendicitis aguda.
La artritis reumatoide es una enfermedad autoinmune que causa inflamación
crónica de las articulaciones y otras áreas del cuerpo.
No existe una cura para la artritis reumatoide. Sin embargo, el tratamiento
consiste en educar al paciente, darle descanso, ejercicio, protección a las
articulaciones y medicamentos.
Los factores reumatoideos (FR) son un grupo heterogéneo de autoanticuerpos
dirigidos contra el fragmento Fc de la IgG.

VII. RECOMENDACIONES

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA C REACTIVA

Los niveles normales de proteína C reactiva se incrementan en 6 horas y llegan
al máximo en 48 horas. Su vida media es constante y, por lo tanto, su nivel está
determinado principalmente por la tasa de producción.
Medir o cuantificar el nivel de proteína C reactiva puede ser útil para
determinar la efectividad de un tratamiento o conocer lo avanzada que esta una
enfermedad.

FACTOR REUMATOIDEO
Los factores reumatoideos presentes en la muestra son capaces de aglutinar las
partículas de látex recubiertas con γ-globulina humana.
No podemos determinar la cantidad de FR que presenta el suero, al menos por
este método, pero sabemos que la presencia de aglutinación indicaría una
concentración de FR igual o superior a 8 UI/ml

VIII. IMPORTANCIA EN LA PROFESIÓN

La PCR, es una de las llamadas proteínas de fase aguda y se incrementa en suero, en
una gran variedad de enfermedades inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular.
Su determinación es importante debido a que aumenta rápidamente al comienzo de la
enfermedad, 14 a 26 horas luego de la inflamación o injuria tisular y desaparece en la
etapa de recuperación, apareciendo sólo durante la fase activa del proceso inflamatorio.
Los FR se encuentran en un 70-80% de los pacientes adultos con artritis reumatoidea,
en un 10% de jóvenes con artritis reumatoidea juvenil y en una variedad de otras
enfermedades del tejido conectivo tales como: LES, síndrome de Sjögren, esclerosis
sistémica, polimiositis, etc. Los FR son más encontrados en pacientes con artritis
reumatoide y por ello representan la determinación serológica más requerida para el
diagnóstico de dicha enfermedad. Su hallazgo aislado no determina la presencia de la
enfermedad y es sólo uno de los tantos criterios necesarios (clínicos, radiológicos y de
laboratorio) para el diagnóstico de artritis reumatoide.
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IX. BIBLIOGRAFÍA

CAMACHO, J. (2017). Obtenido de https://www.youtube.com/watch?

v=QChpB_k3ee

MERO, F. (28 de NOVIEMBRE de 2017). Obtenido de

https://www.slideshare.net/FlornellaML/proteina-creactiva-capaz-de-aglutinar-
y-opsonizar-bacterias-as-como-activar-el-complemento

WIENER-LAB. (2015). Obtenido de https://www.wiener-

lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum
%20espanol/pcr_latex_directo_maxi_sp.pdf

WIKIPEDIA. (02 de AGOSTO de 2014). Obtenido de

https://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna_C_reactiva

MEDICA. (2015). Obtenido de https://www.meditip.lat/salud-de-la-a-

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RAUL. (05 de DICIEMBRE de 2016). Obtenido de

https://pipetealo.wordpress.com/2016/12/05/fr-latex/

WIENER. (2010). Obtenido de https://www.wiener-

lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum
%20espanol/fr_latex_turbitest_aa_sp.pdf