Machine Translated by Google
REVISTA DEL COLEGIO AMERICANO DE CARDIOLOGÍA
Escuche el audio resumen de este
Editor en jefe JAC
manuscrito por
Dr. Valentin Fuster.
VUELO. 70, NO. 22, 2017
ª 2017 POR LA FUNDACIÓN DEL COLEGIO AMERICANO DE CARDIOLOGÍA ISSN 0735-1097/$36.00
PUBLICADO POR ELSEVIER https://doi.org/10.1016/j.jacc.2017.09.1107
Modulación optogenética de
Actividad del nervio simpático cardíaco
para prevenir las arritmias ventriculares
Lilei Yu, MD, PHD,a,b,c Liping Zhou, MD,a,b,c Gang Cao, MD, PHD,d,e Sunny S. Po, MD, PHD,f Bing Huang, MD, PHD,a ,b,c
Xiaoya Zhou, MD, PHD,a,b,c Menglong Wang, MD,a,b,c Shenxu Yuan, MD,a,b,c Zhuo Wang, MD,a,b,c Songyun Wang,
MD ,a,b,c Hong Jiang, MD, PHDa,b,c
RESUMEN
ANTECEDENTES Los estudios han demostrado que la supresión del ganglio estrellado izquierdo (LSG) protege contra las arritmias
ventriculares (VA). La optogenética es una técnica novedosa para regular de forma reversible la actividad de las neuronas objetivo.
OBJETIVOS Este estudio tuvo como objetivo investigar si un LSG silenciado optogenéticamente podría proteger contra los AV inducidos
por la isquemia miocárdica.
MÉTODOS Se usó virus adenoasociado (AAV) como vector para administrar ArchT, una opsina inhibidora sensible a la luz, a las neuronas
LSG. Veinte beagles machos se asignaron al azar al grupo de optogenética (n = 10, AAV2/9-CAG-ArchT-GFP microinyectado en LSG) y al
grupo de control (n = 10, AAV2/9-CAG-GFP microinyectado en LSG). Después de 4 semanas, la función LSG y la actividad neural, la
variabilidad de la frecuencia cardíaca, la duración del potencial de acción ventricular y el período refractario efectivo se midieron en ausencia
o presencia de una iluminación de diodo emisor de luz (565 nm). Se indujo isquemia miocárdica mediante ligadura de la arteria coronaria
anterior izquierda y se registró 1 h de electrocardiografía para análisis de AV.
RESULTADOS ArchT se expresó con éxito en todos los perros. La iluminación transitoria del diodo emisor de luz suprimió
significativamente la función LSG, la actividad neural LSG y los índices nerviosos simpáticos de la variabilidad de la frecuencia cardíaca,
así como el período refractario efectivo prolongado del ventrículo izquierdo y APD90 solo en el grupo de optogenética. La iluminación
de treinta minutos mejoró aún más estos cambios en el grupo de optogenética. Es importante destacar que todos estos cambios volvieron
a la línea de base dentro de las 2 h después de que se apagó la iluminación. Además, los AV inducidos por isquemia fueron suprimidos
significativamente por la iluminación solo en el grupo de optogenética.
CONCLUSIONES La modulación optogenética podría inhibir de forma reversible la actividad neural de la LSG, aumentando así la
estabilidad electrofisiológica y protegiendo frente a las AV inducidas por isquemia miocárdica. (J Am Coll Cardiol 2017;70:2778–90)
© 2017 por la Fundación del Colegio Americano de Cardiología.
El ganglio estrellado (LSG) juega un papel destacado
en la modulación de la electrofisiología ventricular y las
sigue siendo un importante contribuyente a los coches repentinos
Arritmiasmuerte
ventriculares malignas
diac en pacientes con isquemia(VA) arritmias (3–5). La denervación simpática cardíaca
miocárdica (1,2). Está bien establecido que el sistema izquierda se ha aplicado para tratar animales o pacientes
nervioso simpático cardíaco, particularmente el izquierdo con AV potencialmente mortales, como post-miocardio.
Desde el a B
Departamento de Cardiología, Hospital Renmin de la Universidad de Wuhan, Wuhan, China; Instituto de Investigaciones Cardiovasculares,
C D
Universidad de Wuhan, Wuhan, China; Laboratorio Clave de Cardiología de Hubei, Wuhan, China; Centro Biomédico de Huazhong Agri
Universidad cultural, Wuhan, China; Y
Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Agrícola de Huazhong, Wuhan, China; y el
F
Instituto del Ritmo Cardíaco y Departamento de Medicina, Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Oklahoma, Ciudad de Oklahoma, Oklahoma.
Este trabajo fue apoyado por las subvenciones de la Fundación Nacional de Ciencias de la Naturaleza de China (núms. 81530011, 81570463 y 81600395), la Fundación
de Ciencias Naturales de la provincia de Hubei (núms. 2016CFA065, 2016CFA048 y 2016CFB621) y los Fondos de Investigación Fundamental de Ciudad de Wuhan (No.
2016070204010134). Los autores han informado que no tienen relaciones relevantes para el contenido de este documento para revelar. Dres. Yu, Zhou y Cao contribuyeron
igualmente a este trabajo y son primeros autores conjuntos.
Manuscrito recibido el 25 de febrero de 2017; manuscrito revisado recibido el 5 de septiembre de 2017, aceptado el 26 de septiembre de 2017.
Machine Translated by Google
JACC VOL. 70, NO. 22, 2017
5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0
AV refractarios al infarto o tormenta eléctrica, síndrome de QT
prolongado y taquicardia ventricular (TV) polimórfica catecolaminérgica
(6–9). La optogenética es una tecnología novedosa que se usa
ampliamente en el campo de la neurociencia para silenciar o mejorar
la actividad de neuronas genéticamente seleccionadas (10,11).
Cuando ArchT, una opsina inhibidora sensible a la luz, se expresa
genéticamente en células objetivo y se activa mediante iluminación
con la longitud de onda adecuada, induce corrientes hiperpolarizantes,
silenciando así a las células (12–14). En el presente estudio, nuestro
objetivo fue desarrollar un enfoque optogenético novedoso en el que
un virus adeno asociado (AAV) que porta el gen ArchT se transfectó a
las neuronas LSG. La función LSG
y se evaluaron la actividad neural, así como las propiedades
electrofisiológicas ventriculares y los AV en respuesta a desafíos de
isquemia miocárdica.
VER PÁGINA 2791
MÉTODOS
PREPARACIÓN DE ANIMALES. Veinte beagles machos adultos
(peso corporal de 10 a 12 kg) incluidos en este estudio fueron
suministrados por el Centro de Animales Experimentales de la Facultad
de Medicina de la Universidad de Wuhan. Este estudio se realizó de
acuerdo con las recomendaciones de la Guía para el cuidado y uso
de animales de laboratorio de los Institutos Nacionales de Salud. El
protocolo fue aprobado por el Comité de Ética de Experimentos con
Animales de la Universidad de Wuhan.
Todos los perros fueron anestesiados con Na-pentobarbital (30 mg/
kg) y ventilados con aire ambiente mediante un respirador de presión
positiva (MAO01746, Harvard Appa- ratus, Holliston, Massachusetts).
Durante el procedimiento se administraron dosis adicionales de
mantenimiento de 60 mg/h de Na-pentobarbital. Se infundió solución
salina normal a 100 ml/h para reponer las pérdidas espontáneas de
líquidos. Se realizó cateterismo de la arteria femoral izquierda para
monitorear la presión arterial sistémica. La electrocardiografía de
superficie corporal (ECG) se registró con un sistema de laboratorio
basado en computadora (Lead 7000, Jinjiang, Chengdu, China). Se
usó una almohadilla térmica para mantener una temperatura corporal
central de 36,5 a 0,5 °C.
Se hicieron todos los esfuerzos para minimizar las molestias.
INYECCIÓN VIRAL EN LSG. Veinte perros se dividieron aleatoriamente
en el grupo de optogenética y el grupo de control (Figura 1A). El virus
AAV2/9-CAG ArchT-GFP fue elegido para transfectar el LSG.
Se usó una construcción similar (AAV2/9-CAG-GFP) sin ArchT como
control. El virus fue adquirido de OBio (Shanghai, China). Después de
la anestesia, se realizó una toracotomía izquierda en el tercer espacio
intercostal. El LSG fue cuidadosamente expuesto y
Yu et al. 2779
La modulación optogenética suprime los AV
solución de virus (AAV2/9-CAG-ArchT-GFP: 20 ml, 6,25 ABREVIATURAS
Y SIGLAS
1012 genomas de vector/ml; AAV2/9-CAG-GFP:
5,66 1012 20 ml,
genomas de vector/ml)
se inyectaron en 4 sitios usando un 30- G aguja biselada
AAV = virus adenoasociado
(Figura 1B).
APD = potencial de acción
duración
La solución de virus se inyectó a 1 ml/min, utilizando una
APD90 = 90% de duración de la
jeringa Hamilton de 25 ml conectada a una bomba de repolarización
jeringa Harvard PHD (Harvard Apparatus). Después de la
PA = presión arterial
inyección, se cerró el tórax por capas y se administraron
ECG = electrocardiografía
antibióticos (penicilina sódica) durante 3 días después de
ERP = período refractario efectivo
la cirugía.
GFP = proteína fluorescente
IMPLANTACIÓN DEL EMISOR DE LUZ verde
DISPOSITIVO DE DIODO. Cuatro semanas después de AF = alta frecuencia
la inyección viral, se realizó una toracotomía izquierda en VFC = variabilidad de la frecuencia cardíaca
el cuarto espacio intercostal para exponer el corazón y el LED = diodo emisor de luz
LSG. Se insertó e implantó un diodo emisor de luz (LED) LF = baja frecuencia
monocromático acoplado de 2 cm (565 nm, Conver gence LSG = ganglio estrellado izquierdo
Technology, Wuhan, China) en la pared torácica cerca del
NGF = factor de crecimiento nervioso
LSG (Figura 1C). El LED se conectó externamente al
Smax = pendiente máxima de la
sistema LED monocromático (Tecnología de convergencia) curva
para la iluminación. De acuerdo con estudios previos TH = tirosina hidroxilasa
(15,16), el LSG se iluminó con un parámetro de iluminación
AV = arritmia ventricular
fijo (ciclo de trabajo del 40 %, período de 20 Hz, ancho de
VPB = ventricular prematuro
pulso de 20 ms, 3 a 5 mW/mm2 ) para reducir la generación
derrotar
de calor y garantizar al mismo tiempo la eficiencia de TV = taquicardia ventricular
iluminación. Todos los parámetros electrofisiológicos in vivo
se midieron en ausencia o presencia de iluminación LSG.
MEDIDA DE LA FUNCIÓN LSG. Función LSG
se evaluó mediante el cambio máximo de la presión arterial sistólica
(PA) inducido por la estimulación de alta frecuencia (AF) (20 Hz,
duración del pulso de 0,1 ms) usando un estimulador Grass-S88 (Astro-
Med, West Warwick, Rhode Island) como descrito anteriormente
(17,18). Debido a las respuestas variables del cambio de BP a la
estimulación HF en cada perro, aplicamos estimulación HF al LSG en
4 niveles incrementales (nivel 1 ¼ 1 a 4 V; nivel 2 ¼ 5 a 7 V; nivel 3 ¼
7.5 a 10 V; nivel 4 ¼ 10 a 15 V).
MEDICIÓN DE LA ACTIVIDAD NEURAL LSG.
La actividad neuronal del LSG se registró durante 1 minuto. Se insertó
un microelectrodo revestido de tungsteno en el LSG y se conectó un
cable de conexión a tierra a la pared torácica. Las señales eléctricas
generadas por el LSG se registraron utilizando un sistema de
adquisición de datos Power Lab (8/35, AD Instruments, Bella Vista,
Australia) y se amplificaron con un amplificador (DP-304, Warner
Instruments, Hamden, Connecticut) con filtros de paso de banda
configurados. de 300 Hz a 1 kHz y un rango de amplificación de 30 a
50 veces. Neural
Machine Translated by Google

2780 Yu et al. JACC VOL. 70, NO. 22, 2017

La modulación optogenética suprime los AV 5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0

FIGURA 1 Protocolo de estudio y análisis de expresión de GFP/GFP-ArchT en el LSG

A
Grupo de
(1) (1) + (2) (3) (4)
optogenética (n = 10)

0 semana LED de 4 semanas 30 minutos 1h 2h LAD 30 minutos 1h

inyección de AAV iluminación Oclusión Recolección

de tejido LSG
Grupo control (n
= 10)
(1) función LSG, actividad neuronal LSG (2) HRV, ERP, APD90

(3) actividad neuronal LSG, HRV (4) Grabación de VAs de 1h

B C

D Y
(%)
100 NS

80

60

40

20

optogenética Control

(A) Diagrama de flujo de diseño experimental, (B) representación esquemática de la posición de la microinyección de virus y (C) electrodo de diodo emisor de luz (LED).
(D, E) Los análisis inmunofluorescentes revelaron la expresión exitosa de GFP/GFP-ArchT en el ganglio estrellado izquierdo (LSG) en ambos grupos.
Barra de escala ¼ 100 mm. AAV ¼ virus adenoasociado; APD90 ¼ 90% de duración de la repolarización; DAPI = 40,6 -diamidino-2-fenilindol; ERP ¼ período refractario
efectivo; GFP ¼ proteína fluorescente verde; HRV ¼ variabilidad de la frecuencia cardíaca; LAD ¼ arteria descendente anterior izquierda; PAM ¼ potencial de acción
monofásico; NS ¼ no significativo; TH ¼ tirosina hidroxilasa; VAs ¼ arritmias ventriculares.

la actividad, caracterizada por la amplitud y la frecuencia registradas,
se definió como desviaciones con una relación señal/ruido de 3:1 y se
determinó manualmente como se describió anteriormente (17–19).
MEDICIÓN DEL EFECTIVO VENTRICULAR
que consta de 8 estímulos consecutivos (S1-S1, 330 ms de duración
del ciclo) seguidos de un estímulo prematuro (S2).
El intervalo S1-S2 se redujo inicialmente de 250 ms por decrementos
de 10 ms y luego 2 ms hasta
se logró la refractariedad. El ERP se definió como el

PERIODO REFRACTARIO. Catéteres multielectrodo

el intervalo S1-S2 más largo que no pudo capturar los ventrículos
(17,18,20).
fueron suturados en 3 sitios epicárdicos en el ventrículo izquierdo.
El período refractario efectivo ventricular (ERP) se determinó a partir REGISTRO DEL POTENCIAL DE ACCIÓN MONOFÁSICO.

de los siguientes 3 sitios: vértice del ventrículo izquierdo, base del
ventrículo izquierdo y ventrículo izquierdo medio (el sitio en el medio
del vértice y la base del ventrículo izquierdo). El ERP en cada sitio se
determinó mediante estimulación programada
Los potenciales de acción monofásicos del ventrículo izquierdo se
registraron en 3 sitios epicárdicos (vértice del ventrículo izquierdo, el
sitio en el medio del vértice y la base del ventrículo izquierdo, y la base
del ventrículo izquierdo) utilizando un catéter Ag-AgCl hecho a medida.
Una dinámica
Machine Translated by Google
JACC VOL. 70, NO. 22, 2017
5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0
Se realizó un protocolo de estimulación en estado estacionario (S1-
S1) para determinar las propiedades de restitución de la duración del
potencial de acción (APD). El tren de pulsos se entregó en una
duración de ciclo inicial que fue ligeramente más corta que la duración
del ciclo sinusal y se mantuvo durante 30 s para garantizar un estado
estable. Luego se tomó una interrupción de 2 minutos para minimizar
los efectos de la memoria de estimulación.
Posteriormente, se administró otro tren de pulsos con la duración del
ciclo de estimulación reducida en 10 ms hasta que apareció la
alternancia de APD. La alternancia de APD se definió como el cambio
en la duración de la repolarización del 90 % (APD90) $10 ms por $5
latidos consecutivos.
Los registros de potencial de acción monofásicos fueron analizados
por el sistema de estación de trabajo LEAD 7000 (Lead 7000, Jinjiang).
El APD90 se definió como la duración de la repolarización del 90%, y
el intervalo diastólico fue el intervalo de tiempo desde el punto APD90
anterior hasta el tiempo de activación del siguiente latido.
Como se describió en estudios previos, las curvas de restitución
dinámicas de APD se construyeron trazando cada APD90 contra el
intervalo diastólico anterior utilizando Origin 8.0 (OriginLab,
Northampton, Massachusetts).
La pendiente del intervalo diastólico más corto se definió como la
pendiente máxima de la curva (Smax) (18,20,21).
MEDICIÓN DE LA VARIABILIDAD DE LA FRECUENCIA CARDÍACA. Cinco
Se registraron segmentos de electrocardiograma de minutos para
analizar la potencia espectral de la variabilidad de la frecuencia
cardíaca (VFC) utilizando el algoritmo autorregresivo. Se determinaron
las siguientes variables espectrales de potencia: la HF, la baja
frecuencia (LF) y la relación LF/HF (18).
MEDICIÓN DE LA ISQUEMIA MIOCÁRDICA INDUCIDA
ARRITMIAS VENTRICULARES. Se indujo isquemia miocárdica mediante ligadura de la
arteria coronaria descendente anterior izquierda a aproximadamente 2 cm de distancia de
su origen. Se registró el ECG durante la primera hora de isquemia para analizar la
incidencia y duración de las AV según las Convenciones de Lambeth.
Los AV se clasificaron como latidos ventriculares prematuros (PVP),
taquicardia ventricular (TV) no sostenida y TV sostenida y fibrilación
ventricular (18,22).
TINCIÓN HISTOPATOLOGICA. Al final de
experimento, el LSG fue resecado para la tinción histopatológica. Los
tejidos se fijaron en paraformaldehído al 4%, se incluyeron en parafina
y se seccionaron en rodajas de 4 mm .
Se utilizó tinción de inmunofluorescencia doble para tirosina hidroxilasa
(TH) (Abcam, Cambridge, Reino Unido) con proteína fluorescente
verde (GFP) (Abcam), c-fos (Abcam) y factor de crecimiento nervioso
(NGF) (Abcam). Los núcleos se tiñeron con 4,6-diamidino-2-fenilindol.
Yu et al. 2781
La modulación optogenética suprime los AV
ANÁLISIS ESTADÍSTICO. Todas las variables continuas
se presentaron como el SEM medio y se probaron para una distribución
normal utilizando la prueba de normalidad de Shapiro-Wilk. Las
variables continuas medidas a diferentes
los puntos de tiempo se compararon en los 2 grupos (Figuras 2 a 5)
utilizando un análisis de varianza de medidas repetidas de 2 vías
seguido de la prueba post hoc de Tukey. Para su análisis tológico y
AV (VPB, TV no sostenida), se utilizó una prueba t de Student no
pareada para comparar las medias entre los 2 grupos. Para las
variables categóricas, la incidencia de TV sostenida y fibrilación
ventricular entre los 2 grupos se comparó mediante la prueba exacta
de Fisher. Todos los datos se analizaron con el software GraphPad
Prism versión 6.0 (GraphPad Software, La Jolla, California) y se
consideró estadísticamente significativo p < 0,05.
RESULTADOS
VERIFICACIÓN DE EXPRESIÓN ArchT EN LSG. LSG
los cortes se cotiñeron con anti-TH para marcar las neuronas
simpáticas y con anti-GFP para marcar la expresión ArchT de GFP/
GFP. Los resultados mostraron que GFP se expresó principalmente
en las neuronas THþ en el LSG tanto en los grupos optogenéticos
como de control, verificando la transfección exitosa de GFP/ArchT en
neuronas simpáticas de LSG (Figura 1D). La cuantificación de la
superposición entre las células THþ y GFPþ reveló que el 91,82 1,88
% de las células GFPþ eran THþ en el grupo de optogenética y el
90,24 1,22 % de las células GFPþ eran THþ en el grupo de control
(Figura 1E).
MODULACIÓN OPTOGENÉTICA SIGNIFICATIVAMENTE
INHIBIDA LA FUNCIÓN LSG. La función LSG (evaluada por el cambio
máximo de PA sistólica en respuesta a la estimulación eléctrica de
LSG) (Figura 2A) se atenuó significativamente por transitorios y 30
minutos de iluminación LED en el grupo de optogenética, y la curva de
respuesta de voltaje-PA se aplanó significativamente por modulación
optogenética transitoria o sostenida (Figuras 2D y 2E). Por ejemplo, el
cambio de PA sistólica máxima durante la estimulación LSG a un
voltaje de nivel 4 (10 a 15 V) disminuyó de 60,9 ± 2,1 % a 37,6 ± 1,8
% con iluminación LED transitoria y disminuyó aún más a 20,0 ± 0,8
% después de 30 min de
iluminación. Dos h después de que se encendió la iluminación
apagado, la función LSG se recuperó al nivel de referencia antes de
la iluminación (62,0 2,5%) (Figura 2G).
Sin embargo, no se observaron cambios significativos en el cambio de
PA sistólica máxima o en la curva de respuesta de voltaje-PA en el
grupo de control (Figuras 2B a 2G).
MODULACIÓN OPTOGENÉTICA SIGNIFICATIVAMENTE
INHIBIÓ LA ACTIVIDAD NEURONAL DE LSG. Durante la iluminación (565 nm), el
registro de la actividad neuronal in vivo mostró una inhibición evidente de la actividad
neuronal de LSG.
Machine Translated by Google

2782 Yu et al. JACC VOL. 70, NO. 22, 2017

La modulación optogenética suprime los AV 5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0

FIGURA 2 Efectos de la modulación optogenética en la función LSG

B C D
80 0 semana 80 4 semanas 80 LED transitorio

60 60 60

*
40 40 40 *
*

20 20 20 *

0 0 0
123 4 123 4 123 4
Nivel de voltaje de estímulo Nivel de voltaje de estímulo Nivel de voltaje de estímulo

Y F
80 LED de 30 minutos 80 1h LED apagado G80 _ 2h LED apagado

60 60 60
*
*
40 40 * 40

†
20 † 20 20
†
†
0 0 0
1 2 3 4 1 2 3 4 123 4
Nivel de voltaje de estímulo Nivel de voltaje de estímulo Nivel de voltaje de estímulo

optogenética Control

(A) Ejemplos representativos de elevación de la presión arterial (BP) con estimulación LSG. (B a E) La iluminación LED transitoria y sostenida de 30 minutos disminuyó
significativamente la función LSG en el grupo de optogenética. (F, G) La función LSG disminuida se recuperó a la línea de base dentro de las 2 h después de que se
apagó la iluminación LED. *p < 0,05 frente a 4 semanas después de la inyección viral; †p < 0,05 frente a LED transitorio. Abreviaturas como en la Figura 1.

actividad por modulación optogenética transitoria (Figura
3A). La Figura 3B mostró ejemplos representativos de
registros de actividad neuronal de LSG en diferentes
momentos en ambos grupos. La modulación optogenética
transitoria disminuyó significativamente la frecuencia y la
amplitud de la actividad neuronal de LSG (frecuencia: 47
4 impulsos/min frente a 29 4 impulsos/min; amplitud:
0,114 0,012 mV frente a 0,063 0,005 mV; p < 0,05) en el
grupo de optogenética (Figuras 3C y 3D). Treinta minutos
de iluminación disminuyeron aún más el LSG
actividad neural (frecuencia: 11 3 impulsos/min; amplitud:
0,015 0,006 mV). Además, se recuperó
la actividad
a laneuronal
línea dede
base
LSG
dentro de las 2 h después de que se apagó la iluminación
(frecuencia: 45,5 impulsos/min; amplitud: 0,114 0,013
mV). Sin embargo, no se observaron cambios significativos
en el grupo de control (Figuras 3C y 3D). Además, el
aumento de la actividad neural de LSG inducido por la
isquemia se vio significativamente atenuado por la
modulación optogenética en el grupo de optogenética
(frecuencia: 98,6 impulsos/min).
Machine Translated by Google

JACC VOL. 70, NO. 22, 2017 Yu et al. 2783

5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0 La modulación optogenética suprime los AV

FIGURA 3 Efectos de la modulación optogenética en la actividad neuronal de LSG

C D
*
120 * 0.25
0.20
90
0.15 #
60 # *
0.10 *
* *
30 0.05 †
†

0
0
0 semana 4 semana
0 semana 4 semana
Isquemia Isquemia
1h LED apagado
2h LED apagado
1h LED apagado
2h LED apagado

LED transitorio
30min LED LED transitorio
30min LED

Optogenética de control

(A, B) Ejemplos representativos de inhibición optogenética de la actividad neuronal de LSG y (C, D) análisis cuantitativo de la actividad neuronal de LSG en 2
grupos. La iluminación LED transitoria y sostenida disminuyó significativamente la frecuencia y la amplitud de la actividad neuronal de LSG en el grupo de
optogenética. (C, D) La actividad neuronal disminuida de LSG se recuperó a la línea de base dentro de las 2 h después de que se apagó la iluminación LED.
Además, el aumento de la actividad neural de LSG inducido por isquemia también se vio atenuado por la modulación optogenética en el grupo de optogenética. *p <
0,05 frente a 4 semanas después de la inyección del virus. †p < 0,05 frente a LED transitorio. #p < 0,05 frente al grupo control. Abreviaturas como en la Figura 1.

vs. 53 5 impulsos/min; amplitud: 0,198 0,017 mV frente a 0,114 disminuyó significativamente por iluminación transitoria o de 30 min.
0,01 mV; p < 0,05) (Figuras 3C y 3D). Además, todos estos cambios volvieron a la línea base dentro de
MODULACIÓN OPTOGENÉTICA SIGNIFICATIVAMENTE las 2 h posteriores a la iluminación (Figuras 5A y 5C). Sin embargo,
ESTABILIZÓ LA ELECTROFISIOLÓGICA VENTRICULAR no se encontraron cambios significativos en la LF o la relación LF/

PROPIEDADES. La figura 4A muestra ejemplos representativos HF en el grupo de control. De manera similar, el enfoque

de registros de potencial de acción en el grupo de optogenética. La optogenético atenuó significativamente el aumento inducido por
isquemia en la LF y la relación LF/HF y atenuó significativamente la
modulación optogenética transitoria prolongó significativamente
ERP (Figuras 4B a 4D) y APD90 (Figuras 4E a 4G) y disminuyó disminución inducida por isquemia en la HF (Figuras 5A a 5C).

Smax (Figuras 4H a 4J) del ventrículo izquierdo en el grupo de

optogenética (Figuras 4A a 4I). La iluminación de treinta minutos
mejoró aún más estos cambios. Además, todos estos cambios
electrofisiológicos volvieron al nivel de referencia dentro de las 2
horas posteriores a que se apagó la iluminación.
En particular, no se observaron cambios significativos en ERP,
APD90 o Smax en el grupo de control.
MODULACIÓN OPTOGENÉTICA DISMINUIDA SIGNIFICATIVAMENTE
LOS ÍNDICES SIMPÁTICOS DE HRV. En el grupo de optogenética, tanto la LF como
la relación LF/HF fueron
MODULACIÓN OPTOGENÉTICA DISMINUIDA SIGNIFICATIVAMENTE
AV INDUCIDAS POR ISQUEMIA MIOCÁRDICA. Todos los perros
desarrollaron elevación del segmento ST en el ECG o cambios en
la onda T poco después de la oclusión de la arteria anterior
izquierda. Se realizó una iluminación LED sincrónica en el grupo de
optogenética y se mantuvo durante 1 hora. AV inducidos por
isquemia miocárdica aguda (Figura 6A). En comparación con el
grupo de control, la modulación optogenética disminuyó
significativamente el número de VPB y la TV no sostenida en el
grupo de optogenética.
Machine Translated by Google

2784 Yu et al. JACC VOL. 70, NO. 22, 2017

La modulación optogenética suprime los AV 5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0

FIGURA 4 Efectos de la modulación optogenética sobre las propiedades electrofisiológicas del ventrículo izquierdo

B LVB C LVM D LVA

200 200 200
† † †
* * * *
180 180 180 *
(ms)
ERP

160 160 160

140 140 140

120 120 120

4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado 4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado 4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado

Y F GRAMO

260 LVB LVM LV

260 260
* † * † †
240 * * *
240 240
APD90
(ms)
220 220 220

200 200 200

180 180 180

4 semanas

4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado 4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado Transitorio LED
LED
30min
1h LEDapagado 2h
apagado
LED

H I j
LVB LVM LVA
1.00 1.00 1.00
* * *† * *
0.75 † 0.75 0.75 †
Smax

0.50 0.50 0.50

0.25 0.25 0.25

0 0 0

4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado 4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado 4 semanas Transitorio
LED 30min LED
1h LED apagado
2h LED apagado

Optogenética de control

(A) Ejemplos representativos de grabaciones de potencial de acción en el grupo de optogenética. (B a G) La modulación optogenética prolongó significativamente la ERP y la APD90 del

ventrículo izquierdo, y (H a J) disminuyó la pendiente máxima de la curva de restitución (Smax) en el grupo de optogenética.

Todos estos cambios se recuperaron a la línea de base dentro de las 2 h después de que se apagó la iluminación. *p < 0,05 frente a 4 semanas después de la inyección del virus. †p <

0,05 frente a LED transitorio. LVA ¼ vértice del ventrículo izquierdo; LVB ¼ base del ventrículo izquierdo; LVM ¼ la mediana del ventrículo izquierdo; PCL ¼ de duración del ciclo de

estimulación; otras abreviaturas como en la Figura 1.

(Figuras 6B y 6C). La incidencia de TV sostenida o MODULACIÓN OPTOGENÉTICA SIGNIFICATIVAMENTE

fibrilación ventricular en el grupo de optogenética también DISMINUYE LA EXPRESIÓN DE NGF Y

fue menor que en el grupo control (2 de 10 [20 %] frente C-FOS EN EL LSG. Las figuras 7A y 7B muestran
a 7 de 10 [70,0 %]; p < 0,05) (Figura 6D). ejemplos representativos de inmunofluorescencia doble.
Machine Translated by Google

JACC VOL. 70, NO. 22, 2017 Yu et al. 2785

5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0 La modulación optogenética suprime los AV

FIGURA 5 Efectos de la modulación optogenética en la variabilidad de la frecuencia cardíaca

( ms2) 3,0 LF B AF C LF/HF

(ms2) 3.0
*
2.0 *
#
2.0 1.5 # 2.0
* #
* *
† 1.0
* *
1.0 1.0
0.5 †

0.0 0.0 0.0

Optogenética de control

(A, C) La modulación optogenética disminuyó significativamente la baja frecuencia (LF) y la proporción de LF y alta frecuencia (HF) en el grupo de
optogenética. Todos estos cambios se recuperaron a la línea de base dentro de las 2 h después de que se apagó la iluminación LED. (A a C) Además, la
modulación optogenética atenuó el aumento inducido por la isquemia en la LF y la relación LF/HF, y la disminución de la HF. *p < 0,05 frente a 4 semanas
después de la inyección viral. †p < 0,05 frente a LED transitorio. #p < 0,05 frente al grupo control. Diodo emisor de luz LED ¼.

tinción de NGF/c-fos con TH en ambos grupos. El análisis
cuantitativo mostró que NGF y c-fos en el LSG se redujeron
significativamente más en el grupo de optogenética que en el
grupo de control (NGF: 65,2 4,3 % frente a 18,9 2,4 %, p < 0,05;
c-fos: 73,1 4,5 % vs 22,2 2,6%, p < 0,05) (Figuras 7C y 7D).
DISCUSIÓN
DESCUBRIMIENTOS IMPORTANTES. En el presente estudio,
demostramos una modulación optogenética efectiva y reversible
para inhibir la actividad neural de LSG y suprimir los AV inducidos
por isquemia. Encontramos que el LED transitorio
la iluminación activó la bomba ArchT expresada en las neuronas
LSG, lo que inhibió significativamente la función y la actividad
neuronal de LSG. El componente simpático de HRV fue suprimido.
También se mejoró la estabilidad de las propiedades
electrofisiológicas ventriculares, medidas por la curva de restitución
ERP y APD. Dichos efectos se mejoraron aún más con 30 minutos
de iluminación. Además, todos los cambios antes mencionados
volvieron al nivel de referencia dentro de las 2 h posteriores a que
se apagó la iluminación. Es importante destacar que el aumento
de la actividad neuronal de LSG y los AV después de los desafíos
de isquemia miocárdica también se redujeron significativamente
por la modulación optogenética. Hasta donde sabemos, este es
el primer estudio que aplica la tecnología optogenética a las
neuronas autonómicas cardíacas para suprimir las arritmias in
vivo.
Actualmente, las aplicaciones cardíacas de la optogenética se
centraron en el control de diferentes tipos de células cardíacas
para estimulación cardíaca, desfibrilación o
investigación sobre cardioversión, terminación de arritmias y
comunicación celular (23–29). Se han utilizado animales
transgénicos y el método de transferencia de genes basado en
AAV para expresar las proteínas sensibles a la luz in vitro e in
vivo para facilitar el control optogenético.
Wengroski et al. (30) investigaron el control optogenético de la
liberación de norepinefrina de las neuronas simpáticas cardíacas
y sus efectos sobre la función mecánica y eléctrica cardíaca.
Expresaron las neuronas simpáticas cardíacas canalrodopsina-2
del canal optogenético activado por la luz para que las fibras
simpáticas pudieran activarseen
mediante
Losestimulación
resultados revelaron
optogenética.
que la exposición a la activación óptica de las fibras simpáticas
cardíacas aumentó significativamente la liberación de norepinefrina,
la frecuencia cardíaca y la fuerza contráctil; potenciales de acción
acortados; e hizo que el corazón fuera más susceptible a la
arritmia con mayor incidencia y gravedad. Este estudio proporcionó
un modelo innovador y nuevos resultados que contribuyen a
el mecanismo de activación simpática cardiaca y arritmia.
En vista del importante papel del sistema nervioso simpático
cardíaco en la génesis y el mantenimiento de la arritmia, la
denervación simpática cardíaca izquierda se ha aplicado para
tratar los AV refractarios posisquemia o tormenta eléctrica, el
síndrome de QT prolongado y la TV polimórfica catecolaminérgica
(6– 9). Sin embargo, existen algunos efectos secundarios
asociados con esta operación traumática e irreversible, como
sequedad de manos unilateral, sudoración anormal y dolor en el
pecho (31). En el presente estudio, aplicamos un
Machine Translated by Google

2786 Yu et al. JACC VOL. 70, NO. 22, 2017

La modulación optogenética suprime los AV 5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0

FIGURA 6 Efectos de la modulación optogenética en los AV inducidos por isquemia miocárdica

A B
VPB
40

30

20 #

#
10 #
#

0
15 30 45 60 (min)
Tiempo después de la oclusión LAD

Control optogenética

C D TSV/FV
nTSV
#
20 10

8
15
2/10
6
(20,0%)
10
4 7/10
# (70,0%)
5
2

0 0
Control optogenética Control optogenética
Sin TSV/FV TSV/FV

(A) Ejemplos representativos de VA inducidos por isquemia. (B) El análisis cuantitativo de la incidencia de AV inducida por isquemia mostró que
la modulación optogenética disminuyó significativamente el número de latidos ventriculares prematuros (VPS) y (C) la taquicardia ventricular no
sostenida (nSVT), y (D) la incidencia de TV sostenida (SVT). ) y fibrilación ventricular (FV) en el grupo de optogenética. Abreviaturas como en la
Figura 1.

intervención novedosa y reversible, optogenética, para modular la
actividad neuronal de LSG. La proteína inhibidora sensible a la luz
utilizada en nuestro presente estudio es ArchT, una nueva bomba de
protones hacia el exterior impulsada por la luz que es sensible a la
iluminación con luz verde. Cuando se expresa genéticamente en
El AAV es uno de los vectores de terapia génica más utilizados
con expresión génica estable y segura, baja inmunogenicidad y
ausencia de toxicidad (35,36). Por ejemplo, el serotipo 9 de AAV fue
eficaz en la transducción de las neuronas en el sistema nervioso
autónomo entérico.

neuronas y se activa mediante iluminación LED, ArchT descarga H+ sistema (37,38). Por lo tanto, elegimos AAV2/9 para transfectar LSG
en el entorno extracelular, lo que provoca hiperpolarización y y administrar la proteína ArchT en las neuronas LSG. Además,
silenciamiento neural (12–14). inyectamos directamente vectores AAV2/9 en el LSG para que la
infección viral

Recientemente, varios estudios han investigado el efecto inhibitorio
de ArchT sobre la actividad neural del ganglio de la raíz dorsal y el
dolor neuropático. Los resultados
mostró que ArchT podría activarse en la raíz dorsal
neuronas ganglionares después de la administración del vector viral,
induciendo así un gran flujo de salida de H+, produciendo
hiperpolarización, reduciendo la excitabilidad de las neuronas
expresadas por opsina y reduciendo la hipersensibilidad al dolor
mecánico en un modelo de dolor neuropático.
Además, la activación de ArchT se puede activar o desactivar
ajustando la iluminación (32–34).
y la expresión de ArchT podría estar limitada localmente en LSG. Los
resultados del presente estudio demostraron que ArchT se expresó
con éxito en el LSG, y que la infección viral o la transferencia de
genes con AAV2/9 no alteró la función ni la actividad neuronal del
LSG.
Investigamos el efecto de la inhibición optogenética de las
neuronas LSG y evaluamos este efecto inhibitorio de LSG sobre la
electrofisiología ventricular y los AV en caninos normales y con
isquemia miocárdica.
Las grabaciones neuronales directas mostraron que ArchT
Machine Translated by Google

JACC VOL. 70, NO. 22, 2017 Yu et al. 2787

5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0 La modulación optogenética suprime los AV

FIGURA 7 Efectos de la modulación optogenética sobre la expresión de c-Fos y NGF en el LSG

(%)
A C
100

80

60
Porcentaje
fos
de
c-

Expresión
neuronas
TH+
en

40
#
20

0
Control optogenética

B D (%)
100

80

Porcentaje
NGF
de

60
Expresión
neuronas
TH+
en

40
#
20

0
Control optogenética

(A, B) Coincidencia inmunofluorescente representativa de c-fos/factor de crecimiento nervioso (NGF) con TH en LSG en ambos grupos. (C, D) El análisis cuantitativo
mostró que la modulación optogenética reguló significativamente a la baja la expresión de c-fos/NGF en las neuronas THþ en el LSG en el grupo de optogenética. #p <
0,05 frente al grupo control. Abreviaturas como en las Figuras 1 y 2.

la activación por iluminación LED inhibió significativamente la
actividad neural de la LSG en caninos normales y con isquemia
miocárdica. La función LSG medida por el cambio máximo de PA
sistólica en respuesta a la estimulación eléctrica LSG también fue
inhibida por la activación de ArchT. Además, la expresión de NGF y
c-fos disminuyó significativamente por la activación sostenida de
ArchT con iluminación LED, lo que puede ser la base del efecto
inhibidor prolongado de la modulación optogenética en la actividad
neuronal de LSG. Todos estos resultados implican que la activación
de ArchT con iluminación podría resultar en una inhibición de la
actividad neural de LSG, estabilizando así las propiedades
electrofisiológicas ventriculares y suprimiendo la
AV inducidos por isquemia.
Una preocupación para la iluminación LED a largo plazo es la
generación de calor. Las investigaciones han revelado que una
intensidad de potencia óptica de 10 mW/mm2 no provocó cambios
de temperatura detectables (16). En vista de la gran sensibilidad a
la luz de ArchT, la intensidad de la luz (3 a 5 mW/mm2 ) utilizada en
este estudio fue pequeña para evitar cualquier daño térmico a LSG
y tejidos colaterales.
Es importante destacar que la reversibilidad de la función LSG
medida y la actividad neuronal, así como las propiedades
electrofisiológicas después de que se apagó la iluminación LED,
indican fuertemente que la lesión térmica de la neurona LSG juega
un papel insignificante en los hallazgos que observamos.
IMPLICACIONES CLÍNICAS. Más recientemente, Montgomery et al.
(15) y Park et al. (16) informaron sobre el desarrollo de dispositivos
optogenéticos inalámbricos implantables que combinaban diminutas
interfaces neuronales blandas con sistemas de control y potencia de
radio inalámbricos estirables totalmente implantables. Estos
diminutos y delicados dispositivos se pueden implantar con técnicas
mínimamente invasivas y modular optogenéticamente la médula
espinal y el sistema nervioso periférico. La optogenética puede
convertirse potencialmente en una nueva tecnología mínimamente
invasiva controlada por el paciente para el tratamiento de
enfermedades cardiovasculares relacionadas con la hiperactividad
del sistema nervioso simpático cardíaco (Ilustración central).
Por ejemplo, el paciente puede encender la iluminación LED antes
del estrés físico o emocional para evitar los AV o la terapia con
desfibrilador.
Machine Translated by Google

2788 Yu et al. JACC VOL. 70, NO. 22, 2017

La modulación optogenética suprime los AV 5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0

ILUSTRACIÓN CENTRAL La modulación optogenética inhibe la actividad neuronal de LSG y suprime

Arritmias ventriculares

Yu, L. et al. J Am Coll Cardiol. 2017;70(22):2778–90.

(A) Demostramos por primera vez que la optogenética podría inhibir de forma reversible la actividad neural del ganglio estrellado izquierdo (LSG) y suprimir las arritmias
ventriculares (VA) inducidas por la isquemia miocárdica. (B) La optogenética inalámbrica puede convertirse en una nueva tecnología mínimamente invasiva controlada por el
paciente para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares relacionadas con la hiperactividad del sistema nervioso simpático cardíaco. Diodo emisor de luz LED ¼.
Machine Translated by Google

JACC VOL. 70, NO. 22, 2017 Yu et al. 2789

5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0 La modulación optogenética suprime los AV

LIMITACIONES DEL ESTUDIO. Este estudio investigó la modulación
optogenética de la actividad neuronal de LSG. Como estudio de prueba de
concepto, solo investigamos la eficacia de la modulación optogenética
mediante la transfección de LSG con AAV en un título y una dosis fijos. Se
justifican más estudios de dosis-efecto para investigar la correlación entre la
eficiencia de transfección y la modulación neural. Debido a la limitación de
LED
suprimir los AV inducidos por la isquemia miocárdica.
La optogenética puede convertirse en una nueva tecnología
mínimamente invasiva activada por el paciente para el tratamiento
de enfermedades cardiovasculares relacionadas con la hiperactividad
del sistema nervioso simpático cardíaco.
DIRECCIÓN PARA CORRESPONDENCIA: Dr. Hong Jiang, Departamento
de Cardiología, Hospital Renmin de la Universidad de Wuhan, No. 238 Jiefang

dispositivo e instrumentos de grabación neuronal, solo pudimos Road, Distrito de Wuchang, Ciudad de Wuhan, Provincia de Hubei 430060,

realizar iluminación LED y grabación neuronal síncrona bajo PR

anestesia. Además, solo hicimos un estudio a corto plazo de la China. Correo electrónico: hong-jiang@whu.edu.cn.
modulación optogenética de la actividad neural de LSG y los AV
PERSPECTIVAS
inducidos por isquemia en un modelo canino de isquemia miocárdica
aguda. Los dispositivos optogenéticos inalámbricos implantables y
los instrumentos de registro neural están garantizados para investigar COMPETENCIA EN CONOCIMIENTO MÉDICO: En un canino

el control preciso de la optogenética en el sistema nervioso autónomo modelo de isquemia miocárdica, la modulación optogenética silenció reversiblemente

cardíaco y los AV en modelos ambulatorios de isquemia miocárdica la actividad nerviosa simpática del ganglio estrellado y suprimió significativamente

crónica. los AV.

PERSPECTIVA TRANSLACIONAL: Se justifican más estudios

explorar la seguridad y eficacia de la modulación optogenética inalámbrica de la

CONCLUSIONES
inervación autonómica cardíaca y su potencial utilidad terapéutica en el hombre.

La tecnología optogenética podría modular de forma reversible y

controlada la actividad neuronal de LSG y, por lo tanto,

REFERENCIAS

1. John RM, Tedrow UB, Koplan BA, et al. Arritmias
ventriculares y muerte súbita cardiaca.
Lancet 2012;380:1520–9.
2. Priori SG, Blomstrom-Lundqvist C, Mazzanti A, et al.
Guía ESC 2015 para el tratamiento de pacientes con
arritmias ventriculares y la prevención de la muerte súbita
cardíaca: Grupo de trabajo para el tratamiento de pacientes
con arritmias ventriculares y la prevención de la muerte
súbita cardíaca de la Sociedad Europea de Cardiología
(ESC). Avalado por: Asociación Europea de Cardiología
Pediátrica y Congénita (AEPC).
Eur Heart J 2015;36:2793–867.
3. Schwartz PJ, Vanoli E. Arritmias cardíacas eli
citado por la interacción entre la isquemia miocárdica
aguda y la hiperactividad simpática: un nuevo modelo
experimental para el estudio de fármacos antiarrítmicos.
J Cardiovasc Pharmacol 1981;3:
1251–9.
4. Puddu PE, Jouve R, Langlet F, Guillen JC, Lanti M,
Reale A. Prevención de la fibrilación ventricular
7. Vaseghi M, Gima J, Kanaan C, et al. Denervación corteza de primate humano. Front Syst Neurosci 2011;
simpática cardiaca en pacientes con arritmias ventriculares 5:18.
refractarias o tormenta eléctrica: seguimiento a medio y
15. Montgomery KL, Yeh AJ, Ho JS, et al. Optigenética
largo plazo.
totalmente interna sin alimentación inalámbrica para
Ritmo cardíaco 2014;11:360–6.
circuitos cerebrales, espinales y periféricos en ratones.
8. Collura CA, Johnson JN, Moir C, Ackerman MJ. Métodos nacionales 2015;12:969–74 .
Denervación simpática cardíaca izquierda para el
16. Park SI, Brenner DS, Shin G, et al. Sistemas
tratamiento del síndrome de QT largo y la taquicardia
optoelectrónicos miniaturizados suaves, estirables y
ventricular polimórfica catecolaminérgica mediante cirugía
totalmente implantables para optogenética inalámbrica.
torácica asistida por video. Ritmo cardíaco 2009;6:752–9.
Nat Biotechnol 2015;33:1280–6.
17. Wang S, Zhou X, Huang B, et al. La estimulación de la
9. Wilde AA, Bhuiyan ZA, Crotti L, et al. Denervación
médula espinal protege contra las arritmias ventriculares
simpática cardíaca izquierda para la taquicardia ventricular
al suprimir la actividad neural del ganglio estrellado
polimórfica catecolaminérgica. N Engl J Med 2008;358:2024–
izquierdo en un modelo canino de infarto agudo de
9.
miocardio. Ritmo cardíaco 2015;12: 1628–35.
10. Deisseroth K. Optogenética. Métodos nacionales 2011,
8: 26–9.
18. Wang S, Zhou X, Huang B, et al. La estimulación
11. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth electromagnética no invasiva de baja frecuencia del
K. Optogenética en sistemas neuronales. ganglio estrellado izquierdo reduce la arritmia ventricular
Neurona 2011;71:9–34.
inducida por infarto de miocardio. Representante científico

posisquémica tardía después de la ganglionectomía tardía 12. Tsunematsu T, Tabuchi S, Tanaka KF, Boyden ES, 2016;6:30783.

estelar derecha o izquierda en perros. Circulación 1988;
77: 935–46.
5. García-Calvo R, Chorro FJ, Sendra M, et al. Los efectos
de la manipulación selectiva del ganglio estrellado sobre
la refractariedad y la excitabilidad ventricular.
Pacing Clin Electrofisiol 1992;15:1492–503.
6. Schwartz PJ, Stone HL. Estelectomía izquierda en la
prevención de la fibrilación ventricular causada por
isquemia miocárdica aguda en perros conscientes con
infarto de miocardio anterior. Circulación 1980; 62:1256–
65.
Tominaga M, Yamanaka A. El silenciamiento prolongado
19. Zhou X, Zhou L, Wang S, et al. El uso de la estimulación
de las neuronas de orexina/hipocretina mediante el uso
del nervio vago no invasivo para inhibir la aceleración del
de arquerodopsina induce el sueño de ondas lentas en ratones.
nódulo sinusal inducida simpáticamente: un enfoque
Behav Brain Res 2013;255:64–74.
terapéutico potencial para la taquicardia sinusal inapropiada.
13. Chow BY, Han X, Dobry AS, et al. Silenciamiento J Cardiovasc Electrofisiol 2016;27:217–23.
neuronal óptico genéticamente orientable de alto
rendimiento mediante bombas de protones impulsadas por
20. Huang B, Yu L, He B, et al. La denervación simpática
luz. Naturaleza 2010;463:98–102.
del corazón y el riñón induce efectos similares sobre las
14. Han X, Chow BY, Zhou H, et al. Un silenciador neural propiedades electrofisiológicas ventriculares.
óptico de alta sensibilidad a la luz : desarrollo y aplicación EuroIntervention 2015;11: 598–604.
al control optogenético de no
Machine Translated by Google
2790 Yu et al.
La modulación optogenética suprime los AV
21. He B, Lu Z, He W, et al. Efectos de la ablación de
plexiglás ganglionar sobre las propiedades electrofisiológicas
ventriculares en corazones normales y después de una
isquemia miocárdica aguda. Int J Cardiol 2013;168:86–93.
22. Walker MJ, Curtis MJ, Hearse DJ, et al. Las
convenciones de Lambeth: directrices para el estudio de
las arritmias en el infarto isquémico y la reperfusión .
Cardiovasc Res 1988;22:447–55.
23. Arrenberg AB, Stainier DY, Baier H, Huisken J.
Control optogenético de la función cardiaca. Ciencia
2010;330:971–4.
24. Nussinovitch U, Gepstein L. Optogenética para
estimulación cardíaca in vivo y resincronización
terapias Nat Biotechnol 2015;33:750–4.
25. Bruegmann T, Boyle PM, Vogt CC, et al.
La desfibrilación optogenética acaba con la arritmia
ventricular en corazones de ratones y simulaciones
humanas . J Clin Invest 2016;126:3894–904.
26. Crocini C, Ferrantini C, Coppini R, et al. Diseño
optogenético de patrones de estimulación basados en
mecanismos para la desfibrilación cardíaca. Representante
científico 2016;6:35628.
27. Herron TJ, Lee P, Jalife J. Imágenes ópticas de voltaje
y calcio en células y tejidos cardíacos. círculo
Res. 2012, 110: 609–23.
28. Nyns EC, Kip A, Bart CI, et al. Terminación optogenética
de las arritmias ventriculares en el
corazón completo: hacia el manejo biológico del ritmo
cardíaco . Eur Heart J 2017;38: 2132–6.
29. Wang Y, Lin WK, Crawford W, et al. Control
optogenético del ritmo cardíaco mediante estimulación
selectiva de cardiomiocitos derivados de células Pnmtþ en
corazón murino. Representante científico 2017;7:
40687.
30. Wengrowski AM, Wang X, Tapa S, Posnack NG,
Mendelowitz D, Kay MW. La liberación optogenética de
norepinefrina de las neuronas simpáticas cardíacas altera
la función mecánica y eléctrica. Cardiovasc Res
2015;105:143–50 .
31. Antiel RM, Bos JM, Joyce DD, et al. Calidad de vida
después de la denervación simpática cardíaca izquierda
videoscópica en pacientes con canalopatías/cardiomiopatías
cardíacas potencialmente mortales . Ritmo cardíaco
2016;13:62–9.
32. Li B, Yang XY, Qian FP, Tang M, Ma C, Chiang LY. Un
nuevo enfoque analgésico para inhibir optogenética y
específicamente la transmisión del dolor utilizando el
promotor TRPV1. Cerebro Res 2015; 1609: 12–20.
33. Boada MD, Martin TJ, Peters CM, et al. Los
mecanorreceptores de conducción rápida contribuyen al
comportamiento de abstinencia en ratas normales y con
lesiones nerviosas . Dolor 2014;155:2646–55.
JACC VOL. 70, NO. 22, 2017
5 DE DICIEMBRE DE 2017:2778 – 9 0
34. Daou I, Beaudry H, Ase AR, et al. El silenciamiento
optogenético de los aferentes positivos para Nav1.8 alivia
el dolor inflamatorio y neuropático. eNeuro 2016;3.
35. Mason MR, Ehlert EM, Eggers R, et al. Comparación
de serotipos de AAV para la administración de genes a las
neuronas del ganglio de la raíz dorsal. Mol Ther 2010;18:
715–24.
36. Towne C, Pertin M, Beggah AT, Aebischer P, Decosterd
I. Transferencia génica mediada por el virus adenoasociado
recombinante serotipo 6 (rAAV2/6) a neuronas nociceptivas
a través de diferentes vías de administración. Dolor Mol
2009; 5:52.
37. Benskey MJ, Kuhn NC, Galligan JJ, et al.
Entrega de genes dirigidos al sistema nervioso entérico
usando AAV: una comparación entre serotipos y
mutantes de la cápside. Mol Ther 2015;23:
488–500.
38. Dayton RD, Wang DB, Klein RL. La llegada de AAV9
amplía las aplicaciones para la administración de genes en
el cerebro y la médula espinal. Expert Opin Biol Ther
2012;12: 757–66.
PALABRAS CLAVE silenciamiento neural del ganglio
estrellado izquierdo, optogenética, arritmia ventricular