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INFORME DE COMPONENTE 1601-2021

Nombre del estudiante:

Grupo colaborativo:
Nombre del Tutor:

Práctica 1. Determinación de la concentración de carbohidratos


y proteínas
Actividad 1. Determinación de la concentración de glucosa por un
método enzimático colorimétrico
Código del experimento 226
1. Registre los valores de absorbancia a 505nm medidos
luego de preparar cada una de las muestras.

Absorbancia
Tubo
505nm
0 0
1 0,044
2 0,147
3 0,237
4 0,51
5 0,813
6 0,756
7 0,374
8 0,187
9 0,015
10 0,028
11 0,048

2. Gráfica de la curva Patrón

Volumen
Masa de Volumen Concentración
Absorbanci de Volumen
Tubo glucosa de solución de glucosa
a 505nm glucosa total (µℓ)
(mg) salina (µℓ) (mg/dl)
(µℓ)
0 0 0 0 1000 1000 0
1 0,044 30 0,003 970 1000 0,3
2 0,147 90 0,009 910 1000 0,9
3 0,237 150 0,015 850 1000 1,5
4 0,51 300 0,03 700 1000 3
5 0,813 500 0,05 500 1000 5
f(x) = NaN x + NaN
R² = 0 A vs CG
6600tán11a5660

6600tán9a5660

Absorbancia a 505 nm
6600tán7a5660

6600tán5a5660

6600tán3a5660

6600tán1a5660

6600tán28a5660
6600tán28a5660 6600tán1a5660 6600tán3a5660 6600tán5a5660
Concentración de glucosa (mg/dℓ)

3. Concentración de glucosa en los tubos 6 a 11

Registre los cálculos realizados

Para poder hallar la concentración de los tubos 6 y 11, se necesita de la ecuación


lineal de la aproximación de la línea recta de la gráfica de los tubos 0 a 5.

A=0,1646∗CG−0,0016

Tubo 6:

A=0,1646∗CG−0,0016
A +0,0016
CG=
0,1646
0,756+0,0016
CG=
0,1646
CG=4,603mg/dl

Tabla de los tubos del 6 al 11:

Concentración
Absorbancia
Tubo de glucosa
505nm
(mg/dl)
6 4,603 0,756
7 2,282 0,374
8 1,146 0,187
9 0,101 0,015
10 0,180 0,028
11 0,301 0,048
4. Concentración de glucosa en las muestras de partida A y B

Concentración
Muestra
(mg/dl)
A 57,290
B 0,461

Registre los cálculos realizados

Volumen Concentración
Concentración Masa de
Absorbancia de muestras de
Tubo glucosa glucosa
505nm muestras A partida A y B
(mg/dl) (mg)
y B (µℓ) (mg/dl)
6 4,603 0,756 0,046 80,000 57,533
7 2,282 0,374 0,023 40,000 57,047
8 1,146 0,187 0,011 20,000 57,290
9 0,101 0,015 0,001 200,000 0,504
10 0,180 0,028 0,002 400,000 0,450
11 0,301 0,048 0,003 700,000 0,430
Capturas de los datos:
Actividad 2 Determinación de la glucemia (concentración de glucosa en
sangre)
Código del experimento 043
1. Registre los valores de absorbancia a 505nm medidos luego de preparar cada
una de las muestras

Absorbancia
Tubo
505nm
0 0
1 0,347
2 0,337
3 0,331
4 -
5 -
6 0,477
7 0,218
8 0,097
9 0.327
10 0,18
11 0,069
2. Concentración de glucosa en la muestra Patrón

Promedio
absorbancias Tubos 0,338
1a3
Registre los cálculos realizados para hallar la concentración de
glucosa

Volumen
Masa de Volumen de Concentración
Absorbancia de Volumen
Tubo glucosa solución de glucosa
505nm glucosa total (µℓ)
(mg) salina (µℓ) (mg/dl)
(µℓ)

0 0 0 0 20 20 0
1 0,347 20 0,02 0 20 100
2 0,337 20 0,02 0 20 100
3 0,331 20 0,02 0 20 100

Se calcula el coeficiente de extinción con los datos de la tabla anterior, sabiendo que
este es el mismo en todos los ensayos ya que se mantiene constante:
-el grosor de celda es 1 cm.
- la absorbancia de la muestra es el promedio
A=ε∗l∗c
mg
0,338=ε∗1 ( cm)∗100
dl
0,338
ε=
mg
100 ∗cm
dl

( )
−1
−3 mg
ε =3,38∗10 ∗cm
dl

3. Concentración de glucosa en los tubos 6 a 11 empleando la ecuación de Lambert-


beer.

Registre los cálculos realizados


A=ε∗l∗c
A
c=
ε∗l
En donde, A hace referencia a la absorbancia de la muestra, “l” el grosor de celda y
ε al coeficiente de extinción.

( )
−1
−3 mg
ε =3,38∗10 ∗cm
dl
l=1 cm
Entonces para cada de muestra se aplica la ecuación con sus respectivos
parámetros y se hallan las concentraciones:

4. Concentración de glucosa en las muestras de partida A y B

Muestra Concentración
(mg/dL)
A
B

Registre los cálculos realizados

Capturas de los datos:


Actividad 3. Determinación de la concentración de proteínas
por un método colorimétrico: método de Lowry
Código del experimento 034
1. Registre los valores de la concentración y absorbancia a 580nm
medidos luego de preparar cada una de las muestras patrón de los
tubos 0 - 5

Tubo Absorbancia Concentración


580nm de proteína
0
1
2
3
4
5

Registre los cálculos realizados para hallar la concentración de la


proteína patrón

2. Gráfica de la curva Patrón (concentración vs absorbancia)


3. Concentración de proteína en los tubos 6 a 11
Tubo Concentración
(mg/dL)
6
7
8
9
10
11
Registre los cálculos realizados

4. Concentración de proteína en las muestras de partida A y B

Muestra Concentración
(mg/dL)
A
B
Registre los cálculos realizados

Capturas de los
Conclusiones
Práctica 2. Separación electroforética de isoenzimas de LDH
sobre acetato de celulosa.
Código del experimento
Muestra Tira A
Muestra Tira B
1. Registra la imagen de la tinción de la tira y densitograma de
cada una de las tiras

A2. partir de que tejido se ha preparado la muestra

Tejido Tira A
Imagen de densitometría y tinción del tejido seleccionado

Tejido Tira B
Imagen de densitometría y tinción del tejido seleccionado

Conclusiones
Práctica 3. Ensayo de Cinética enzimática: Determinación de
la actividad gamma-glutamiltranspeptidasa en una muestra
de orina
Actividad gammaGT.
Código del experimento
1. Medida del curso de la reacción enzimática cubeta 2

Tiempo Absorbancia 405nm


(min)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
2. Medida del curso de la reacción enzimática cubeta 3

Tiempo Absorbancia 405nm


(min)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
2. Gráfica de la absorbancia vs tiempo de reacción para cada
muestra
3. Concentración de la actividad enzimática de cada muestra

Cubeta Concentración de la actividad enzimática


2
Registre 3
los cálculos realizados a partir de la pendiente de la recta

Conclusiones

Práctica 4. Ensayo de viabilidad celular (actividad


metabólica) por reducción del compuesto MTT
1. Preparación de las soluciones registre la tabla y los cálculos
realizados para la preparación de las disoluciones de peróxido
de hidrógeno
2. Imagen de la distribución de los tratamientos en la placa de
cultivo

3. Registro de las absorbancias en cada tratamiento

Tratamiento Pocillo Absorbancia % de


viabilidad
Replica 1
Control Replica 2
negativo Replica 3
Replica 1
Control Replica 2
positivo Replica 3
Replica 1
0.01mM Replica 2
Replica 3
Replica 1
0.05mM Replica 2
Replica 3
0.1mM Replica 1
Replica 2
Replica 3
Replica 1
0.5mM Replica 2
Replica 3
Replica 1
1mM Replica 2
Replica 3
Replica 1
5mM Replica 2
Replica 3
4. Grafica % de viabilidad vs concentración peróxido de
hidrógeno

5. Calcule la concentración a la cual el 50% de las células están


vivas

Conclusiones

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