Bioquímica QI935 - Universidad Tecnológica de Pereira Marzo de 2023

Flujo de masa a través de la membrana.

Autor 1: Mosquera Mosquera Edwin; Autor 2: Peña Ruiz Daniela; Autor 3: Viedma García Daniela
Escuela de tecnología química, Universidad Tecnológica de Pereira, Pereira,
Colombia
Correo: d.pena1@utp.edu.co; e.mosquera@utp.edu.co; daniela.viedma@utp.edu.co

Resumen- El informe presenta el flujo de masa a través de la membrana plasmática el cual se da por
transporte pasivo facilitado, este permite el desplazamiento interno y externo de nutrientes, sustancias y
desechos de la célula dado que, la respiración celular es una serie de procesos mediante los cuales las células
degradan moléculas orgánicas y se produce energía. Se realizó la práctica activando la levadura con los
sustratos de glucosa y glicina, determinando por espectrofotometría visible el consumo de dichas sustancias.
Realizado por el grupo de bioquímica en las instalaciones de la facultad de tecnología química de la UTP.

Palabras claves- Célula; membrana plasmática; energía; transporte pasivo.

Abstract- The report presents the mass flow through the plasma membrane that occurs by passive transport,
which allows the internal and external displacement of nutrients, since cellular respiration is a series of
processes by which cells degrade organic molecules and energy is produced. The practice was carried out
activating the yeast with glucose and glycine. Carried out by the biochemistry group at the facilities of the
chemical technology faculty of the UTP.

Keywords- Cell; plasma membrane; energy; passive transport.

INTRODUCCIÓN
La levadura son microorganismos eucariotas pertenecientes al reino Fungí (hongos). La primera levadura se
originó hace cientos de millones de años.

La membrana plasmática o membrana celular es una bicapa de lípidos ubicada entre la pared celular y el interior
de la célula. Esta membrana semipermeable determina lo que entra y sale de la célula y proporciona una
protección adicional contra los factores ambientales. La membrana se compone de lípidos, esteroles y proteínas,
que confieren la fluidez, flexibilidad y capacidad de gemar para crear células hijas.

La levadura puede conseguir la energía y los nutrientes necesarios para su crecimiento por varios caminos, pero
algunos son más fáciles y beneficiosos para la levadura que otros. Una vez inoculada, la levadura primero gasta
sus reservas de glucógeno y todo el oxígeno disponible para revitalizar sus membranas celulares y alcanzar el
nivel óptimo de permeabilidad y capacidad, para luego poder transportar los nutrientes y azúcares. Las células
absorben el oxígeno rápidamente y posteriormente empiezan a captar los azúcares y nutrientes presentes. La
levadura absorbe la glucosa mediante la difusión facilitada sin gastar energía metabólica. Una de las cosas más
importantes que la levadura aporta a las bebidas fermentadas es el alcohol.

En esta reacción hay muchos pasos individuales, pero podemos dividirla en dos partes principales: conversión
de glucosa en piruvato y posteriormente de piruvato en etanol. Esta reacción ocurre dentro de la célula, en el
fluido denominado citosol. Las enzimas presentes en el citosol catalizan esta y otras reacciones metabólicas que
la siguen. Pero el piruvato no siempre acaba convertido en etanol. De hecho, tiene dos posibles caminos a
seguir: entrar en la mitocondria, donde se convierte en CO2 y agua (respiración aeróbica), o permanecer en el
citosol, donde la célula lo convierte en acetaldehído, y posteriormente en el alcohol.

La levadura utiliza NAD+ en la fase inicial de descomposición de glucosa. Si hay oxígeno, el piruvato producido
en este paso es transportado a la mitocondria, donde entra en el ciclo de Krebs. Durante el ciclo de Krebs se
produce un compuesto rico en energía, denominado el adenosín trifosfato (ATP). El ATP es importante para la
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célula porque le asegura la energía para la síntesis de proteínas y la replicación de ADN, que son fundamentales
en el crecimiento de la población.[1]

METODOLOGÍA

RESULTADOS
Tabla I – Patrones para curva de calibración de glucosa.

Patrón Concentración de Absorbancia

glucosa [ppm] corregida
540nm
1 20 0.003
2 75 0.010
3 300 0.035
4 600 0.052
5 1200 0.082
6 1500 0.093
Blanco 0 0,045

Grafica I – Curva de calibración de glucosa.

𝑦 = 0.00006𝑥 + 0,0068 𝑬𝒄. 𝟏

Dónde: y = Absorbancia y x = Concentración

Despejando la concentración de la ecuación 1 para

cada muestra tenemos lo siguiente:
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𝑦 − 0.0068 0.025 − 0.0093 1 0 0.451 247.70

𝑋= = 𝑬𝒄. 𝟐 2 30 0.140 64.76
0.00006 0.00006
3 60 0.009 -12.29
= 261.67 𝑝𝑝𝑚 4 90 0.004 -15.23
5 120 0.013 -9.94
Tabla II – Concentración de glucosa determinada para
cada muestra. Tabla V– Titulación de NaOH con HCl 0.1 N.
Concentración Muestra Tiempo Consumo de HCl 0.1 N
de glucosa de NaOH (min) [mL]
Muest Tiempo Absorbanci
determinada 1 0 1.9
ra (min) a corregida
para cada 2 30 1.8
540 nm
muestra [ppm] 3 60 1.3
1 0 0.025 303.33 4 90 1.2
2 30 0.022 253.33
3 60 0.042 586.67 NaOH + CO2 → NaHCO3
4 90 0.030 386.67 (Reacción 1) Formación de bicarbonato de
5 120 0.003 -63.33
sodio.
Tabla III– Patrones para curva de calibración de glicina.
NaHCO3 + HCl → NaCl + H2O + CO2
Patrón Concentración de Absorbancia (Reacción 2) Neutralización.
glicina [ppm] corregida 570 nm
1 25 0.006 CO2 + H2O → H2CO3
2 75 0.064
4 125 0.159 (Reacción 3) Formación de ácido carbónico.
5 175 0.265
6 200 0.320
Blanco 0 0.090 DISCUSIÓN
Se estudió el comportamiento de la levadura
Gráfica 2 – Curva de calibración de glicina.
Saccharomyces cerevisiae en presencia de la
glucosa (carbohidrato) y glicina (aminoácido),
ambos sustratos actúan como activadores de la
levadura. En la tabla II se ilustran los datos que
fueron obtenidos para el consumo de glucosa y
como varia su presencia en el medio, es posible
observar que en la muestra 5 no hay presencia de
glucosa, esto se debe a que fue consumida ya que
al añadir la mezcla glucosa-glicina en la solución
que contiene la levadura se da el proceso de
glucólisis, la cual se conoce como una serie de
𝑦 = 0.0017𝑥 + 0,0299 𝑬𝒄. 𝟑 reacciones que extraen energía de la glucosa al
romperla en dos moléculas de tres carbonos
Despejando la ecuación para hallar la concentración de llamadas piruvato, por lo que, es el primer paso de
glicina de cada muestra se obtuvieron los siguientes la respiración celular [3] .
datos:
También es importante mencionar que, en el caso
Tabla IV– Concentración de glicina determinada para de la glicina, esta disminuye significativamente su
cada muestra. concentración en el medio dado que al ser un
aminoácido precursor de proteínas, puede actuar
Concentració como un regenerador de tejidos o componentes de
n de glicina
Tiemp Absorbanci células siempre y cuando no cambien de forma y
determinada
Muestr o (min) a corregida propiedades[4], teniendo en cuenta que al
para cada
a 570 nm interaccionar con la glucosa la levadura adquiere
muestra
[ppm] un grado de estrés, es ahí donde la glicina juega un
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papel importante ya que es tomada por las células
de levadura para facilitar la síntesis de moléculas
que le permiten atenuar o reparar el daño causado
por el estrés. Entre las moléculas mejor
caracterizadas en esta respuesta están las llamadas
“proteínas de estrés”[5].
Por otro lado, referenciando la tabla V, donde se
ilustran los datos obtenidos en la titulación de las
muestras, el CO2 liberado en el proceso de
respiración celular probablemente no fue
recolectado correctamente ya que no se evidencia
una variación significativa de CO2 , puesto que la
cantidad de ácido consumido debe aumentar, ya
que al realizar la titulación de las muestras se forma
el ion bicarbonato (HCO3-), el cual reacciona con
los H+ liberados por la reacción, formando ácido
carbónico y así elevando el pH de la solución, el
cual actúa como amortiguador, por ende, se
requiere más cantidad de ácido para que haya una
neutralización del pH de la solución, acción que no
se evidenció en la práctica.
Por tal motivo puede decirse que no hubo una
recolección de CO2, probablemente se escapó del
recipiente al no tener un montaje totalmente
hermético, de este modo no fue posible la llegada
del gas al recipiente donde se esperaba ser recogido
con la solución de NaOH.
CONCLUSIÓN
Fue posible evidenciar el flujo de masa a través de
la membrana plástica de las células de la
Saccharomyces cerevisiae, logrando así, a su vez
cuantificar los sustratos y productos obtenidos en
la reacción. Apropiando de este modo los
fundamentos del proceso que se realiza en la célula
como la activación, la respiración y la reparación.
Al igual, se determina que el consumo de glicina es
más rápido que la glucosa gracias a que este actúa
como regenerador de tejidos que se deterioran
gracias a el estrés generado por la activación con
glucosa en donde por medio del proceso de
respiración celular se libera la energía almacenada.
PREGUNTAS GUÍA
1. Explique en términos energéticos ¿Qué es lo que
sucede en el proceso de activación de la lavadura?
Marzo de 2023
La levadura primero gasta sus reservas de
glucógeno y todo el oxígeno disponible para
revitalizar sus membranas celulares y alcanzar el
nivel óptimo de permeabilidad y capacidad, para
luego poder transportar los nutrientes y azúcares.
Es un proceso anabólico tanto como catabólico, se
busca la degradación de nutrientes para poder
extraer la energía que se necesita en el proceso de
fermentación.
2. Mencione una ruta catabólica y una anabólica en
la que intervenga la glucosa. Explíquelas.
La ruta catabólica es la glucólisis y comprende la
conversión de glucosa en piruvato, en este proceso
participan 10 enzimas diferentes que catalizan diez
reacciones secuénciales, las cuales se pueden
dividir en tres etapas:
Etapa 1: Formación de fructosa 1,6-bisfosfato a
partir de glucosa; etapa 2: Formación de triosas
fosfato (gliceraldheido 3-fosfato y dihdrixiacetona
fosfato) a partir de fructosa 1,6-bisfosfato y etapa
3: Formación de piruvato a partir de gliceraldheido
3-fosfato.
La ruta anabólica es la gluconeogénesis, en la cual
la glucosa se sintetiza a partir de compuestos no
glucídicos, tales como aminoácidos, lactato,
piruvato o glicerol las cuales se dan en 3 etapas:
1) Fosforilación del piruvato a fosfoenolpiruvato:
La reacción glucolítica inversa se caracterizaba por
la gran variación negativa de energía libre, que la
convertía en un proceso irreversible. Para solventar
este primer paso se requiere una secuencia de
reacciones en la que participan enzimas
mitocondriales y citoplasmáticos.
2) Hidrólisis de la fructosa-1,6-bisfosfato a
fructosa-6-fosfato. Esta reacción es catalizada por
la fructosa-1,6-bifosfatasa
3) Desfosforilación de la glucosa-6-fosfato a
glucosa libre. Esta reacción catalizada por la
glucosa-6-fosfatasa es realizada en el retículo
endoplasmático de los hepatocitos, y es la misma
que se ha descrito en la glucogenólisis a nivel
hepático, justificando que el hígado pueda liberar a
la corriente sanguínea glucosa libre, procedente de
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su reserva glucogénica o procedente de la ruta
gluconeogénica. [6] [7]
3. ¿Qué sustancias ácidas son las que
predominantemente se producen durante este
proceso y qué procesos de producción industrial se
usa para la producción de este?
[7] Pérez J, Noriega MJ. Jesús Merino y
María José Noriega
Borge. Fisiol Gen. 2006;2:1-7.
https://www.medicapanamericana.c
om/es/libro/principios-de-anatomia-
y-fisiologia

Acido carbónico: Se utiliza en la industria en forma [8]
gaseosa, para la fabricación de bebidas carbónicas,
jardinería de calidad en invernaderos (aditivo
atmosférico), soldadura al arco. [8]
Acido pirúvico: Utilizadas para la obtención de las
bebidas alcohólicas como la cerveza, el vino o el [9]
wiski. Este proceso es realizado por la levadura
(hongo) del género Saccharomyces el punto de
partida es una glucosa que se transforma en acido
pirúvico. Este acido se descarboxila y se hidrogena
transformándose en etanol. [9]
Ácido Carbónico - EcuRed. Accessed
February 17, 2022.
https://www.ecured.cu/Ácido_Carbó
nico
Proyecto Biosfera. Accessed February
17,2022.
http://recursos.cnice.mec.es/biosfera
/alumno/2bachillerato/micro/ampliaf
ermenta.htm

REFERENCIAS
[1] “Levadura y su papel en el proceso de
elaboración.”
https://canalupe.com/wiki/levadura-
y-su-papel-en-el-proceso-de-
elaboracion/

[2] F. Te and O. D. E. L. A. Pr, “Práctica No

1: Flujo de masa a través de la
membrana.,” no. 1, pp. 1–5.

[3] Khan Academy, “Glucólisis.”

[4] Neurociencias, “Glicina

(neurotransmisor): qué es y cómo
actúa sobre el organismo,” Arturo
Torres, 2017.

[5] J. Luis Folch-Mallol, A. Garay-Arroyo,

F. Lledías, and A. A. Covarrubias
Robles, “edigraphic.com La respuesta
a estrés en la levadura
Saccharomyces cerevisiae
MICROBIOLOGÍA MICROBIOLOGÍA.”

[6] National G, Pillars H. METABOLISMO DE

CARBOHIDRATOS. (c).