INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA GENERAL
Práctica REACCIONES ENZIMÁTICAS DE ÓXIDO-REDUCCIÓN Mejía
Regalado Gabriel, Ortega Corona Diana Valeria 4QV2
Introducción
Una reacción redox (o de oxidación-reducción)
es un tipo de reacción química en donde se
transfieren electrones entre dos especies. Se
dice que hay una transferencia de electrones
cuando hay un cambio en el número de
oxidación entre los reactivos y los productos.
Las enzimas intervienen, gracias a su
coenzima, en reacciones de transferencia de
electrones (óxido-reducción) o de radicales, con
formación de enlaces covalentes. Las enzimas
intervienen, gracias a su coenzima, en
reacciones de transferencia de electrones
(óxido-reducción) o de radicales, con formación
de enlaces covalentes. Figura 1. Tubos en los que se llevo a cabo las
Objetivos reacciones.

• Obtener el sobrenadante conocido y Tabla 2. Coloraciones obtenidas en cada uno

etiquetarlo como Coenzima NAD de los tubos
• Obtener la deshidrogenasa láctica Tubo Tubo Tubo Tubo Tubo
Resultados 1 2 3 4 5
incoloro Azul Azul Azul Transición
claro entre azul
Tabla 1. Procedimiento al cual fueron e incoloro
sometidos cada uno de los tubos.

Discusión
En el desarrollo de la practica se utilizo lactato,
el cual fue agregado para modificar el equilibrio
de la reacción garantizando que la reacción
fuera de lactato a piruvato, también KCN quien
aseguro la dirección de la reacción al formar
cianohidrina, el azul de metileno sirvió como
indicador de oxido reducción, la coenzima
NADH+ también fue una de las sustancias que
se utilizaron, la LDH es la enzima que llevo a
cabo la reacción.
De acuerdo con la metodología que se llevo a Bibliografía
cabo descrita en la tabla 1, se obtuvo una serie
- Voet D. Fundamentos de bioquímica: La vida
de tonalidades, asi como ausencia de color las
a nivel molecular (2009). Buenos Aires: Editorial
cuales se observan en la figura 1, por lo que a
Panamericana.
continuación indicaremos.
- Nelson, D. L., Cuchillo Foix, C. M., Lehninger,
En el tubo 1 el lactato paso a piruvato por medio
A. L., & Cox, M. M. (2005). Lehninger: Principios
de la coenzima NAD+, la cual esta oxidada y
de Bioquímica (4a. ed.). Barcelona: Omega.
conforme se lleva a cabo la reacción paso a su
estado reducido, a su vez reduce al azul de - Stryer L., Berg J. M. y Tymoczko J.L. 2004.
metileno por lo que se ve incoloro. Bioquímica. 5ª. Ed. Reverté. España
Dado que en el tubo 2 se agrego lactato y KCN
la reacción se esta llevando a cabo de lactato a
piruvato, pero no en la misma cantidad ya que
no se agregó coenzima NAD+, sin embargo al
utilizar extracto crudo de musculo, este contiene
cantidades de enzima y coenzima, por lo que
tiene una menor intensidad de color azul.
En el tubo 3 al no agregar lactato la reacción no
favorece la formación de piruvato, por lo que la
reacción ocurre de piruvato a lactato,
obteniendo la enzima oxidada por esta razón
obtuvimos una coloración azul.
En tubo 4 al no contener la enzima no se lfue
posible que se llevara a cabo la reaccion, sin
embargo por ser un extracto esta pudo llevarse
a cabo en menores cantidades.
El tubo 5 dependió del momento en el que se
observara, podía ser azul o incoloro ya que al
no contener cianuro de potasio que reaccione
con el piruvato para formar cianhidrina de
piruvato y garantizar asi que las
concentraciones de piruvato sean siempre
bajas, llego a un punto en que el equilibrio
químico se desplazo y se favoreció la formación
de lactato, por lo que el azul de metileno paso
de su forma reducida a oxidada.
Conclusión
El lactato en presencia de LDH produce
piruvato, reduce al azul de metileno volviéndolo
incoloro y oxidando al sustrato.
El cianuro de potasio produce la cianohidrina
piruvato haciendo la reacción irreversible.