Universidad Juárez del Estado de

Durango
Facultad de Ciencias Químicas
Campus Durango

LÍQUIDO
CEFALORRAQ
UÍDEO

Jesus Alberto
de Lara
Analisis
Andrade
Químico
Karen Garza
Clínicos I
Nevarez
Dr. Alejandro
QFB
Avila Olivas
Septimo
Semestre
LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO. epéndimo a razón de 0.35 mL
por minuto o 500 mL al día. Un
¿QUÉ ES? adulto tiene 150 mL de éste y
Es un fluido corporal estéril se renueva cada 3 o 4 horas
e incoloro que se encuentra en por los endotelios de los
el espacio subaracnoideo en el capilares cerebrales.2 El
cerebro y la médula espinal. líquido cefalorraquídeo está
compuesto, principalmente,
Se caracteriza por ser una por: agua, sodio, potasio,
solución salina pura, baja en calcio, cloro, sales
contenido celular y proteínas. inorgánicas (fosfatos) y
Su estudio permite el componentes orgánicos
diagnóstico de diversas (producidos por las células
enfermedades neurológicas, gliales).
como: Infecciones, procesos Se mueve a una velocidad
inflamatorios, enfermedades aproximada de 20 mL por
neurodegenerativas y minuto. Su producción varía
neoplasias primarias o dependiendo de la edad y
secundarias. género. En los recién nacidos
FUNCIÓN. la cantidad de este líquido
varía de 10 a 60 mL, mientras
Su función principal es la de que en el adulto es de entre
amortiguador de la corteza 100 y 150 mL.2
cerebral y la médula espinal,
proteger el sistema nervioso IMPORTANCIA CLÍNICA.
central contra los posibles El líquido cefalorraquídeo
impactos y amortiguar el corresponde a un líquido claro
movimiento hasta en 97% y e incoloro que se produce en
proporcionar nutrientes al el plexo coroideo. Su función
tejido nervioso y eliminar sus principal es mantener
desechos metabólicos; se separados el sistema nervioso
encarga de la eliminación de central de la circulación
residuos. Transporta hormonas sanguínea, con el fin de
y nutrientes, prevenir la entrada mediante
neurotrasmisores, anticuerpos difusión simple de fluidos,
y linfocitos. electrolitos u otras
Contiene pocas proteínas, sustancias. Sus
azúcares y minerales y puede características citoquímicas y
ser un aislante eléctrico de bacteriológicas ayudan en el
la médula espinal. diagnóstico de patologías
infecciosas del sistema
¿DÓNDE SE PRODUCE? nervioso central, permitiendo
distinguir etiología viral de
El líquido cefalorraquídeo es
la bacteriana y en este último
producido en 70% en los plexos
caso determinar el patógeno
coroideos de los cuatro
causante. Adicionalmente sirve
ventrículos cerebrales, sobre
de apoyo en el diagnóstico de
todo los laterales y 30% en el
patologías no infecciosas como El aspecto normal del LCR es
en el caso de hemorragia claro y cristalino. Esta
subaracnoidea. apariencia puede variar,
dependiendo de algunas
patologías, proporcionando
¿CÓMO SE OBTIENE? valiosa información sobre la
significancia clínica, por
Se obtiene mediante punción ejemplo, un líquido turbio o
lumbar, por punción cisternal, de aspecto lechoso, puede
o por punción ventricular indicar un incremento del
(ventriculostomía). Para la contenido proteico o lipídico,
punción lumbar se utiliza una pero también ser indicativo de
aguja de aproximadamente 10 infección por la presencia de
cm, con mandril, mediante un glóbulos blancos. Un líquido
proceso totalmente estéril, sanguinolento puede ser
sobre el cuerpo vertebral de indicativo de hemorragia o de
L4-L5. Lo normal es tomar punción traumática.
entre 3 y 4 tubos de líquido
cefalorraquídeo para estudio Correlación clínica. -
bioquímico, inmunológico, Un líquido xantocrómico,
molecular, bacteriológico y término utilizado para
morfológico. describir el LCR con un
El L.C.R. se recoge en tubos sobrenadante rosado,
secos, con un volumen de 2-3 anaranjado o de color
ml enumerándolos según el amarillo, es indicativo de la
orden de obtención de la presencia de productos de la
muestra. degradación de glóbulos rojos,
dependiendo de la cantidad de
El primer tubo se envía a estos presentes en el LCR y el
bacteriología, los siguientes tiempo que han permanecido en
a anatomía patológica y/o a él. El color amarillo da
laboratorio externo, cuenta de una pequeña cantidad
dependiendo de las peticiones de oxihemoglobina; el
del facultativo. No se enviará anaranjado es producto de una
el 1º tubo a bioquímica, pues intensa hemólisis y el
puede aparecer sangre amarillo, producto de la
procedente del pinchazo e conversión de la
inducir al error de pensar que oxihemoglobina a bilirrubina
se trata de una hemorragia. no conjugada. Otras causas de
METODOLOGÍA DE ANÁLISIS. - xantocromía pueden ser debido
a elevados niveles séricos de
El líquido cefalorraquídeo se bilirrubina, carotenos,
analiza en cuanto a sus incremento de concentración
características macroscópicas, proteica y melatonina
citoquímicas y (metástasis cerebral de
bacteriológicas. melanoma).
Examen macroscópico (físico)
Dependiendo de su aspecto, el recomienda que su análisis se
LCR se puede informar como: realice de forma manual. Un
Normal, con xantocromía, aumento de leucocitos puede
hemolizado o con turbidez. ocurrir en infecciones
(virales, bacterianas,
Examen microscópico. – micóticas y parasitarias),
El estudio microscópico del alergias, leucemia, esclerosis
LCR debe ser analizado en la múltiple, hemorragia,
búsqueda cualitativa o traumatismo, encefalitis, y en
cuantitativa de células síndrome de Guillain-Barré1
hematológicas o células Procedimiento para el contaje
malignas. La primera manual del LCR:
determinación a realizar es el
recuento celular, así el 1. Homogenice el LCR mezclando
laboratorio determinará suavemente por inversión el
cuantos leucocitos se tubo que contiene la muestra
encuentran por unidad de para suspender las células
volumen (mm3 o µL), y debe sedimentadas. La agitación
efectuarse lo más pronto vigorosa puede destruir las
posible procurando que no pase células y afectar el recuento
de una hora después de haberse celular.
realizado la punción, ya que
la lisis celular ocurre 2. Use una pipeta para
rápidamente. transferir el LCR a la cámara
de Neubauer. Llene el espacio
Examen directo: previo al entre el cubre-hematímetro y
recuento celular por unidad de la cámara de recuento de
volumen, se realiza el examen glóbulos evitando las burbujas
directo del LCR colocando una de aire. Cargue ambos
gota de líquido entre lámina y retículos de la cámara.
laminilla y se observa al
microscopio en objetivo 40X. 3. Mantenga la cámara de
Se reporta el número de Neubauer en una cápsula de
leucocitos y hematíes Petri con papel filtro húmedo
presentes por campo, en rangos por 5 minutos hasta que los
de dos a tres células. Se leucocitos sedimenten.
recomienda observar el 4. Coloque la cámara de
sedimento del líquido Neubauer en la platina del
(posterior a su microscopio y fíjela con las
centrifugación) para abrazaderas; use objetivo 10X
concentrar algunos elementos de aumento para visualizar el
celulares que puedan estar área de lectura, ajuste la
escasos y no sean claramente iluminación y el condensador
visibles en la observación para obtener un mejor
directa de la muestra. contraste celular. 5. Constate
Contaje celular: como el que la celularidad es
recuento normal de leucocitos semejante en ambos retículos
en el LCR es muy bajo, se de la cámara. Cualquier
discordancia importante o 2. Usar la tinción de May
signo de desecación invalida Grünwald-Giemsa propia del
el recuento. hemograma pero con Giemsa
diluido entre el 1 y 2%, en el
caso que tenga una alta
densidad celular se puede
reducir el tiempo de Giemsa o
usar la técnica sin
modificaciones.
3. Realice la lectura con
lente de inmersión (100 x)
diferenciando las células de
acuerdo al hallazgo de los
leucocitos encontrados.
Fórmula diferencial. - Exprese cada tipo celular en
porcentaje.
Se debe evitar la
clasificación simple en Informar:
porcentaje de mononucleares y Células hematopoyéticas:
polinucleares. neutrófilos (segmentados y
La fórmula diferencial de baciliformes), granulocitos
leucocitos ayuda a establecer inmaduros (metamielocitos,
la línea celular predominante. mielocitos y promielocitos),
Es el caso en que la infección linfocitos variantes de
viral se asocia con aumento de linfocitos (reactivos),
linfocitos, y las infecciones monocitos / macrófagos,
bacterianas y fúngicas se eosinófilos, basófilos,
asocian con un aumento de células plasmáticas,
neutrófilos. La fórmula eritroblastos.
diferencial también puede Células tumorales o blastos.
revelar eosinófilos que se
asocian a alergias; macrófagos Células epiteliales de
con bacterias fagocitadas recubrimiento.
(indicando meningitis).
Para el recuento diferencial
Tinción de May Grünwald – también es útil la
Giemsa citocentrifugación, con la
cual se puede disminuir
1. Centrifugar la muestra significativamente el volumen
(volumen relativo de 0,5 mL) de LCR del orden de 0,1 mL y
de LCR a 1.000 rpm por 4 tiene la ventaja de distribuir
minutos. Separar el los elementos de la muestra en
sobrenadante dejando una una monocapa, permitiendo una
cantidad suficiente para mejor observación.
reconstituir el sedimento y
realizar la extensión, dejar Correlación clínico patológica
secar. del estudio celular.
El estudio de la celularidad más recomendables por su buena
en el LCR nos puede ayudar al precisión, utilización de
diagnóstico de enfermedades escasa cantidad de muestra y
neoplásicas, como tumores del manejo de un adecuado control
sistema nervioso central o de calidad interno. También
extensión meníngea de podrían usarse otras
leucemias y linfomas. metodologías como
cuantificación de proteínas,
EXAMEN BIOQUÍMICO. – por el método de precipitación
El estudio bioquímico del LCR, de ácido sulfosalicílico o
principalmente de la glucosa y tricloroacético.
proteínas, también es de gran Correlación clínica
utilidad en el diagnóstico de patológica.
distintas enfermedades.
Un aumento de la albúmina en
Proteinorraquia. LCR (Q albúmina LCR/albúmina
Un incremento en el contenido suero > 8×10−3) es indicativo
de proteínas en el LCR es de disfunción en la barrera
índice muy confiable de la hematoencefálica y, por lo
existencia de un proceso tanto, compatible con
patológico, debido a que toda enfermedades como meningitis
lesión que afecta el tejido bacteriana o síndrome de
cerebral o la barrera Guillain-Barré.
hematoencefálica, provoca un La presencia de
aumento que puede ser ligero hiperproteinorraquia >
(45 - 75 mg/dL), moderado (75 550mg/dl sin pleiocitosis (<
- 100 mg/dL), marcado (100 - 10 mononucleares /mm3) es muy
500 mg/dL), o muy marcado (500 indicativa, aunque no
- 3.500 mg/dL). diagnóstica, de síndrome de
La disminución de la Guillain-Barré.
concentración de proteínas en La electroforesis de proteínas
el LCR por debajo de 15 mg/dl permite la evaluación de las
puede ser debida a fuga de LCR proteínas que se encuentran en
por causa de un desgarro dural concentraciones elevadas7. La
provocado por un traumatismo o presencia de bandas
punción lumbar previa, o una oligoclonales es típica de la
rinorrea u otorrea de LCR; esclerosis múltiple; un pico
también por el aumento de la monoclonal se relaciona con
presión intracraneal que puede gammapatía monoclonal.
provocar una mayor filtración
de LCR a través de las
microvellosidades aracnoideas.
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE
Los métodos rutinarios más PROTEÍNAS TOTALES EN ORINA Y
frecuentes para cuantificar el LCR; POR EL MÉTODO ROJO
contenido proteico del LCR son PIROGALOL.
los métodos turbidimétricos y
nefelométricos, además son los Fundamento. –
Las proteínas presentes en la 5. Leer la absorbancia (A) del
muestra reaccionan en medio Patrón y la muestra, frente al
ácido con el rojo pirogalol y Blanco de reactivo. El color
el molibdato, formando un es estable como mínimo 30
complejo coloreado. La minutos.
intensidad del color formado
es proporcional a la Cálculos. –
concentración de proteínas en ( A ) Muestra−( A ) Blanco
la muestra ensayada. [conc . Patron]
( A ) Patron−Blanco
Reactivos. –

Glucorraquia:
La concentración de glucosa en
el LCR es el resultado de un
proceso dinámico de equilibrio
con la glucosa plasmática a
Material. – través de transporte activo en
las células endoteliales y
● Espectrofotómetro o simple difusión a través de un
analizador para lecturas a gradiente de concentración
598nm. entre el plasma y el LCR.
● Cubetas de 1,0 cm de paso de
luz. La concentración normal oscila
● Equipamiento habitual de entre 50 -80 mg/dL; en
laboratorio. pacientes con glucosa sérica
entre 70 - 120 mg/dL se estima
Procedimiento. – que es aproximadamente igual
al 60 - 80% del valor hallado
1. Condiciones del ensayo:
en sangre. Por ello, se
Longitud de onda: . . .598
recomienda determinar
nm Cubeta: . . . . 1 cm paso
conjuntamente glicemia y
de luz Temperatura: . .
37ºC / 15-25ºC glucorraquia empleando los
métodos habituales para la
2. Ajustar el cuantificación de glucosa.
espectrofotómetro a cero
Correlación clínica
frente a agua destilada.
patológica.
3. Pipetear en tubos de
Concentraciones elevadas de
ensayo.
glucosa en el LCR son siempre
consecuencia de
concentraciones elevadas en
plasma y suele estar
relacionada con la Diabetes
4. Mezclar e incubar 5 min a mellitus y otros estados del
37ºC ó 10 min a temperatura paciente que cursen con
ambiente (15-25ºC). elevación de la misma.
La disminución de la Reactivo de trabajo (RT):
concentración de glucosa en el Disolver (🡪) el contenido de
LCR puede deberse a una un vial de R 2 Enzimas en un
deficiencia en el mecanismo de frasco de R 1 Tampón. Tapar y
transporte activo, una mayor mezclar suavemente hasta
utilización de la glucosa por disolver su contenido.
el SNC, tejidos, leucocitos, Estabilidad: 1 mes en nevera
eritrocitos, microorganismos o (2-8ºC) o 7 días a Temperatura
a la existencia de una ambiente (15-25ºC).
hipoglicemia prolongada. Los
hallazgos de bajos niveles de Material. –
glucosa en LCR, acompañado de ● Espectrofotómetro o
un incremento en el recuento analizador para lecturas a
de leucocitos y un alto 505 nm.
porcentaje de neutrófilos, son
● Cubetas de 1,0 cm de paso de
indicativos de meningitis
luz.
bacteriana.
● Equipamiento habitual de
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE laboratorio.
GLUCOSA; POR EL MÉTODO TRINDER. Procedimiento. –
GOD-POD.
1. Condiciones del ensayo:
Fundamento. – Longitud de onda: . . .505nm
La glucosa oxidasa (GOD) Cubeta: . . . . 1 cm paso de
cataliza la oxidación de luz Temperatura: . . 37ºC /
glucosa a ácido glucónico. El 15-25ºC
peróxido de hidrógeno (H2O2), 2. Ajustar el
producido se detecta mediante espectrofotómetro a cero
un aceptor cromogénico de frente a agua destilada.
oxígeno, fenol-ampirona en
presencia de peroxidasa (POD): 3. Pipetear en tubos de

La intensidad del color ensayo.

formado es proporcional a la
concentración de glucosa
presente en la muestra 4. Mezclar e incubar 5 min a
ensayada. 37ºC ó 10 min a temperatura
ambiente (15-25ºC).
Reactivos. –
5. Leer la absorbancia (A) del
Patrón y la muestra, frente al
Blanco de reactivo. El color
es estable como mínimo 30
minutos.

Preparación: Cálculos. –
 ( A ) Muestra−( A ) Blanco concentraciones aumentadas de
[conc . Patron] LDH, así como en algunas
( A ) Patron−Blanco
meningitis víricas, donde
Lactato Deshidrogenasa (LDH). podría constituir un signo de
– mal pronóstico. También
hallamos aumentos de esta
la LDH se encuentra magnitud en procesos
distribuida en casi todos los neurológicos en los que se
tejidos del organismo debido a produce muerte celular
esto, su concentración en (Enfermedad de Huntington).
sangre se eleva en muchos
procesos: infarto agudo de DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE
miocardio, alteraciones LACTATO POR EL MÉTODOS LDH-L.
hepáticas y renales, anemia
Fundamento. –
hemolítica, traumatismos,
neoplasias, etc. Al El método se basa en el
encontrarse también en el siguiente esquema de reacción:
cerebro, puede aumentar su
concentración en alteraciones
del SNC como las meningitis.
El intervalo de referencia de
la concentración catalítica de
La velocidad de formación de
LDH en el LCR es 5-25 UI/L
NADH es directamente
(una décima parte de la que se
proporcional a la actividad
encuentra en plasma) y procede
catalítica de la LDH y se
del paso por difusión pasiva
determina midiendo el aumento
desde la sangre a través de la
de la absorbancia a 340nm. Las
barrera hematoencefálica,
concentraciones del ensayo
difusión desde el tejido
están optimizadas de acuerdo a
cerebral dañado y de los
los procedimientos de
elementos celulares
referencia para la medición de
(bacterias, leucocitos y
la actividad catalítica de las
células tumorales) que
enzimas a 37°C descriptos por
contienen LDH.
la Federación Internacional de
Correlación clínico patológica Química Clínica (IFCC)

Las concentraciones Reactivos provistos. –

catalíticas elevadas de LDH
A. Reactivo A: solución de
ayudan en el diagnóstico
metilglucamina (MEG) 400 mM y
diferencial de las meningitis
lactato 61 mM; pH 9,4 a 37o C.
bacterianas y víricas, ya que
B. Reactivo B: solución
casi 90% de las meningitis
conteniendo NAD 61 mM.
bacterianas la concentración
de esta enzima se encuentra PROCEDIMIENTO (Analizador
elevada. Cuando se produce una automático). –
contaminación de la muestra
por punción traumática también Cuando se implemente la
podemos encontrar técnica en un analizador en
particular, siga las influenzae), bacilos
instrucciones de trabajo del Grampositivos (Listeria), etc.
mismo.
Otras tinciones:
En una cubeta mantenida a la
temperatura elegida, colocar: Tinta china:
La prueba de tinción de tinta
china o nigrosina se emplea al
realizar un examen de
microscopía directa de las
cápsulas de muchos
Incubación durante 120 microorganismos. Su función
segundos a 37o C. principal es facilitar la
detección del cryptococos
[LDH] = (∆A/min) x factor; neoformans, un hongo que puede
εNAD/NADH = 6230 M-1 cm-1 Los provocar complicaciones
analizadores Wiener lab. médicas como la meningitis.
calculan automáticamente la
actividad de LDH de cada Tinción de Ziehl-Neelsen:
muestra. La tinción de ZN es una
ESTUDIO MICROBIOLÓGICO. – técnica de tinción diferencial
utilizada para la
Existen distintas pruebas de identificación de
laboratorio para la microorganismos patógenos,
identificación de agentes tales como Mycobacterium
microbiológicos, unas de tuberculosis; así como algunos
detección rápida útiles para protozoarios del género
un diagnóstico inicial y otras Apicomplexa (coccidios
más tardías para un intestinales) entre otros. La
diagnóstico definitivo. Sin coloración de ZN es la técnica
lugar a dudas, las más apropiada para ser
microbiológicas tienen gran utilizada en todos los
importancia en el análisis del laboratorios de los países de
LCR. América Latina. Es la
Tinción de Gram: es una recomendada por la OMS y la
técnica de identificación Unión Internacional Contra la
rápida que bien realizada es Tuberculosis y Enfermedades
positiva en 75-90 % de los Respiratorias (UICTER) por ser
casos. Según la morfología y la que asegura resultados
el resultado de la tinción, se reproducibles con un
puede identificar al agente entrenamiento sencillo y
etiológico. Se pueden resulta la más
encontrar cocos Gramnegativos económica (2). Los resultados y
(meningococo), cocos confiabilidad de esta prueba
Grampositivos (neumococo y dependen de la ejecución y de
estafilococo), bacilos la calidad de los reactivos,
Gramnegativos (Haemophilus siendo esto crucial para el
control de la TB.
La tinción ZN se fundamenta en proporciona el diagnóstico
la estructura de las paredes etiológico definitivo.
celulares de las micobacterias
que contienen lípidos y otros Determinación de antígenos
ácidos grasos (ácidos bacterianos: técnicas rápidas
micólicos) de elevado peso de coaglutinación o
molecular, que les confieren aglutinación de látex. Estas
la propiedad de resistir la técnicas permiten la detección
decoloración con alcohol- de antígenos bacterianos
ácido, después de la tinción solubles en el LCR. No son
con colorantes básicos diagnósticas y tienen un alto
calientes, por lo que se costo por lo que es dudosa la
denominan bacterias ácido relación costobeneficio
resistentes o ácido-alcohol REFERENCIAS. -
resistentes.
1. Análisis del líquido
La tinción se basa en colocar cefalorraquídeo.
carbol-fucsina y calentar la Medlineplus.gov. Published
preparación ligeramente para 2017. Accessed October 14,
solubilizar las ceras, lípidos 2021.
y otros ácidos grasos de la https://medlineplus.gov/span
pared celular para que permita ish/pruebas-de-laboratorio/a
el paso libre del colorante, nalisis-del-liquido-
el cual tiene una enorme cefalorraquídeo/
afinidad por los ácidos
micólicos presentes en la 2. AARP herramienta de salud.
pared. Al enfriar con agua, AARP. Published 2021.
los componentes de la pared Accessed October 14, 2021.
vuelven a solidificar, https://healthtools.aarp.org
resistiendo la acción abrasiva /es/health/analisis-de-
del alcohol-ácido, donde el liquido-cefalorraquideo-lcr
azul de metileno se utiliza 3. Lilia M, Suck T. Líquido
como contra-tinción. cefalorraquídeo
En esta técnica se emplean Cerebrospinal fluid
tres productos: Carbol Fucsina Correspondencia. Artículo de
Fenicada (Fucsina Básica), revisión Patología.
Solución de Azul de Metileno 2018;56(4):281-287.
al 1% y Solución de Alcohol https://www.revistapatologia
Ácido (soluciones que .com/content/250319/2018-
conforman el Kit de Ziehl 4/9-IF-Li_quido.pdf
Neelsen) 4. Corominas C, Ferrer E, Gómez
Cultivo: la muestra de LCR se M, Ma P, Ruiz V. PROTOCOLO
debe cultivar durante al menos de ENFERMERÍA PARA LA
72 h a 35 ºC para obtener un PUNCIÓN LUMBAR.
resultado adecuado. La https://www.chospab.es/publi
positividad del cultivo caciones/protocolosEnfermeri
a/documentos/
 187cf7ed62e33f0c26adb4007c91
2e22.pdf
5. www.6tems.com. Bioquímica
Clínica / Sustratos -
SPINREACT. Spinreact.com.
Published 2021. Accessed
November 22, 2021.
https://www.spinreact.com/es
/lista-productos/bioquimica-
clinica.html
6. Triana-Alonso F, Requena D,
Gil A. CITOQUÍMICO DEL
LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO:
RECOMENDACIONES PARA SU
ANÁLISIS, INTERPRETACIÓN Y
REPORTE DE RESULTADOS. Co
munidad y Salud Año.
2020;18(2).
http://servicio.bc.uc.edu.ve
/fcs/cysv18n2/art07.pdf