OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE CÉLULAS

PROCARIOTAS

INTEGRANTES:
ARRIETA OTERO KAREN ANDREA
JIMÉNEZ ROQUEME MARIANA
LÓPEZ NARVÁEZ DIVIER DAVID
MURILLO MACHADO YADIS TATIANA
VERGARA ROMÁN ALEXANDRA

DOCENTE:
LÓPEZ BERNAL CRISTIAN ALBERTO

MATERIA:
LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
(BCM)

PREGRADOS:
ENFERMERÍA Y PSICOLOGÍA
SEMESTRES:
1Y2

UNIVERSIDAD DEL SINÚ ELÍAS BECHARA ZAINÚM

SEDE MONTERÍA - CÓRDOBA
AGOSTO 26 DE 2022
 PRELABORATORIO

1. Realiza un diagrama de flujo de la tinción de Gram. Debes colocar el orden

de los colorantes y/o sustancias, indicando el color final que se obtiene
para las Gram positivas y para las Gram negativas?

2. ¿A qué se debe esta diferencia de coloración entre las bacterias Gram + y Gram -?
R// Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de
las bacterias gram positivas y gram negativas

La pared celular de las bacterias gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano,
además de dos clases de ácidos teicoicos: anclado en la cara interna de la pared celular y
unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el
ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglicano (también conocido como
mureína). Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las bacterias gram negativas es
delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición
distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano
unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de
proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.

Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a estas diferencias
constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confiere su
rigidez a la pared celular bacteriana, y las gram positivas lo poseen en mucha mayor
proporción que las gram negativas.

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración se debe a que la membrana

externa de las bacterias gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por ejemplo
la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada
como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por
lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloración azul-violácea. Por el contrario,
las bacterias gram positivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor
proporción de peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sino
que este actúa deshidratando los poros, cerrándolos, lo que impide que pueda escaparse el
complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violeta.
3. ¿En qué consiste la tinción ácido alcohol resistente? ¿Qué
colorantes y/o sustancias se utilizan en esta? Menciona un ejemplo
de bacterias ácido - alcohol resistentes de importancia clínica

R// Ácido-alcohol resistencia es la propiedad física de algunas bacterias a

la resistencia a la decoloración de la fucsina básica (rojo) la cual penetra
en la célula por acción del fenol y el calor.

Las bacterias ácido alcohol resistente son bacterias gram positivas que
resisten la descolonización debes colorantes enérgicos, cómo las
soluciones de etanol en ácido clorhídrico, es un análisis de laboratorio qué
determina si una muestra de tejido, sangre u otras sustancias corporales
está infectada con la bacteria Qué causa la tuberculosis.
Que colorante se utiliza para esta ?
Los ácidos alcohol resistentes se tiñen de color rojo, utiliza la tinción ziehl
Neelsen para la identificación de bacterias ácido alcohol resistente.

La alta concentración de ácido micólico en la pared celular es la causante,

como las bacterias del género Mycobacterium, de la baja absorción y alta
retención de la tinción (fucsina). La forma más común para poder identificar
este tipo de bacterias es a través de la técnica de tinción de Ziehl-Neelsen,
donde la bacteria queda teñida en rojo y se agrega una tinción de contraste
de nombre azul de metileno la cual permite apreciar de mejor forma la
bacteria.

Ejemplos:
° Mycobacterium
° Nocardia
° Clostridium
° Corynebacterium; no son consideradas ácido alcohol resistente Aunque
presenta rasgos comunes con mycobacterium(ácido micolicos y meso-
Daap)
4. Completa el siguiente cuadro. Debes realizar un dibujo de las bacterias,
colocar un ejemplo de esta forma de bacteriana que produzca una
enfermedad frecuente, colocar como se colorean con la tinción de Gram o
si se utiliza otro tipo de coloración cuál es y qué color toma, colocar el
nombre de la enfermedad que produce la bacteria que colocaste como
ejemplo.
EJERCICIO 1. TINCION CON AZUL DE METILENO # 1 (Observada en el
laboratorio)

1. Células procariotas. Dibuja lo observado en el laboratorio y responde

las siguientes preguntas:
1.1 Objetivo: 100x

1.2 Aumento: 1000x

1.3 Tamaño aproximado:
1.4¿Qué forma bacteriana observas? = Bacilos Gram-
1.5 ¿Cuál es la importancia clínica del género Klebsiella?
R// Klebsiella pneumoniae es la especie de mayor relevancia clínica dentro del género bacteriano Klebsiella,
compuesto por bacterias Gram negativas de la familia Enterobacteriaceae, que desempeñan un importante papel
como causa de las enfermedades infecciosas oportunistas. El género fue llamado así en honor a Edwin Klebs, un
microbiólogo alemán de finales del siglo XIX.
Klebsiella pneumoniae, dentro de este género bacteriano, está implicada principalmente en infecciones
nosocomiales.1​ Es el agente causal de infecciones del tracto urinario, neumonías, sepsis, infecciones de tejidos
blandos, e infecciones de herida quirúrgica. Son especialmente susceptibles los pacientes ingresados en unidades
de cuidados intensivos, neonatos, pacientes con EPOC, diabetes mellitus o alcohólicos.
Causa alrededor del 1% de las neumonías bacterianas y puede causar condensación hemorrágica extensa del
pulmón. Además, en ocasiones provoca infección del aparato urinario y bacteriemia a partir de lesiones focales en
pacientes debilitados que puede terminar con la vida del paciente. Algunas de las complicaciones más frecuentes
son el absceso pulmonar y el empiema. También suele encontrarse en las infecciones de la toracotomía para
realización de by pass o revascularización coronaria.

EJERCICIO 2. TINCION CON AZUL DE METILENO #2 (Tinción Observada en el video)

2. Células procariotas. Coloca una foto de la tinción de azul de metileno
del Video y responde las siguientes preguntas:

2.1 ¿Qué forma bacteriana observas?

R// Coco Gram +
2.2 ¿Cuál es el Aumento de la preparación?: 1000X

2.3 Menciona dos ejemplos de cocos de importancia

clínica o industrial
R// Ejemplos de cocos y enfermedades que causan:
1. Streptococcus pyogenes -- amigdalitis.
2. Streptococcus pneumoniae: neumonía.
3. Neisseria gonorrhoea: gonorrea.
4. Neisseria meningitidi: meningitis.
5. Streptococcus mutans: caries.

Tinción compuesta: COLORACIÓN DE GRAM

1. Coloque la lámina con la muestra sobre un soporte de coloración.

2. Cubra el extendido con cristal violeta y déjelo actuar por un minuto.
3. Lave con agua de chorro y escurra.
4. Agregue Lugol y déjelo actuar por un minuto.
5. Lave con agua de chorro y escurra.
6. Agregue alcohol etílico o alcohol acetona por un minuto o hasta que se decolore
completamente la lámina.
7. Lave con agua de chorro y escurra.
 8. Examine el frotis, si la muestra permanece coloreada use nuevamente el
decolorante por 30 seg.
9. Lave con agua de chorro y escurra.
10. Cubra el extendido con fucsina o Safranina y déjelo actuar por un minuto.
11. Lave con agua de chorro y escurra.
12. Permita que se seque completamente a temperatura ambiente.
13. Observe al microscopio en 100X, no olvide usar aceite de inmersión.

EJERCICIO 3. Tinción de GRAM#1 (Observada en el laboratorio)

3. Células procariotas. Dibuja lo observado en el laboratorio y responde
las siguientes preguntas:
3.1 Objetivo: 100x_

3.2 Aumento: 1000x

é
3.3 ¿Qué forma bacteriana observas? = Coco

3.4 ¿Se trata de una bacteria GRAM+ ó GRAM –?

R// Bacteria GRAM-
3.5 ¿Por qué es importante diferenciar las bacterias en GRAM+ y GRAM-?
R// Las bacterias grampositivas se clasifican por el color que adquieren después de
aplicarles un proceso químico denominado tinción de Gram. Las bacterias grampositivas
se tiñen de azul cuando se les aplica dicha tinción. Otras bacterias se tiñen de rojo, son
las gramnegativas. Saber si las bacterias son grampositivas o gramnegativas ayuda a su
profesional de la salud a identificar el tipo de infección y los antibióticos más eficaces.

EJERCICIO 4. TINCION DE GRAM #2

CELULA PROCARIOTA
4. Coloca una foto de lo segunda tinción de GRAM observada en el video y
responde las preguntas.

4.1 ¿Que formas morfológicas bacterianas

observas?
R// Bacilos Gram+
4.2 ¿El género Salmonella sp es GRAM + ó
GRAM -?
R// El género Salmonella pertenece a la familia
Enterobacteriaceae, son bacilos gram negativos
(GRAM-), generalmente móviles por flagelos
perítricos, anaerobios facultativos y no esporulados.

4.3 ¿El género Lactobacillus sp es GRAM + ó
GRAM -?
R// Los Lactobacillus spp. son el principal grupo de
BAL y se caracterizan por producir ácido láctico
como producto del metabolismo de los
carbohidratos. Este género tiene una morfología de
bacilos o cocobacilos, Gram positivos y no
formadores de esporas.
4.4 ¿Cuáles son las principales características de
Salmonella sp?
R// Salmonella es un bacilo Gram negativo que hace
parte de la familia Enterobacteriaceae, actualmente
contempla cerca de 2700 serovares. Con excepción
de la serovariedad Gallinarum-Pollorum, son móviles
gracias a la presencia de flagelos perítricos
EJERCICIO 5. TINCION DE GRAM #3
CELULA PROCARIOTA
5. Coloca una foto de la tercera tinción de GRAM observada en el video y
responde las preguntas.

5.1 ¿Que formas morfológicas bacterianas obsevadas?

R// La forma morfológica de las bacterias observadas son
BACILOS, Además de la forma de vara y la esférica, las bacterias
Gram negativas también tienen forma de espiral (espiroquetas).
Las bacterias Gram negativas representan muchas dolencias,
incluidas muchas enfermedades transmitidas por los alimentos,
cólera, gonorrea e infecciones urinarias

5.2 ¿Clasifica las bacterias observadas según forma

morfológica y tinción de GRAM?
R// Según su morfología son Bacilos y son tinción de
Gram negatias (GRAM-)
 WEBGRAFÍA

1. Bush, L. M. (s/f). Introducción a las bacterias grampositivas. Manual MSD versión para
público general. Recuperado el 27 de agosto de 2022, de
https://www.msdmanuals.com/es-es/hogar/infecciones/infecciones-bacterianas-bacterias-
grampositivas/introducci%C3%B3n-a-las-bacterias-grampositivas

2. Cosmética, D., Dcmq, Q., Rodríguez, P. A., & Arenas, R. (s/f). Hans Christian Gram y
su tinción Hans Christian Gram and His Staining. Medigraphic.com. Recuperado el 25 de
agosto de 2022, de https://www.medigraphic.com/pdfs/cosmetica/dcm-2018/dcm182n.pdf

3. Esaú López-Jácome, L., Hernández-Durán, M., Colín-Castro, C. A., Ortega-Peña, S.,

Cerón-González, G., Franco-Cendejas, R., Cendejas, R. F., & México-Xochimilco, C. (s/f).
Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología. Medigraphic.com. Recuperado el
25 de agosto de 2022, de https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf

4. Roldán, L. F. (2020, marzo 23). Tipos de bacterias. ecologiaverde.com.

https://www.ecologiaverde.com/tipos-de-bacterias-2633.html

5. Tinción de Gram. (s/f). Medlineplus.gov. Recuperado el 26 de agosto de 2022, de

https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/tincion-de-gram/

6. Wikipedia contributors. (s/f-a). Ácido-alcohol resistencia. Wikipedia, The Free

Encyclopedia. https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=%C3%81cido-
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7. Wikipedia contributors. (s/f-b). Tinción de Gram. Wikipedia, The Free Encyclopedia.

https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Tinci%C3%B3n_de_Gram&oldid=145305378