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Henry Jurado-Gámez2
Verónica Jarrín-Jarrín3
1
Proyecto financiado por la Vicerrectoría de Postgrados y Relaciones Internacionales (VIPRI) de la Universidad de Nariño.
2
Ph.D. en Ingeniería de Alimentos. Universidad de Nariño, Facultad de Ciencias Pecuarias, Departamento de Producción
y Procesamiento Animal, Programa de Zootecnia - Grupo de Investigación Fise-Probiotec. Pasto, Colombia. Correo
electrónico: henryjugam@gmail.com
3
M.Sc. Universidad de Nariño, Facultad de Agroindustria, Programa de Agroindustria. Pasto, Colombia. Correo
electrónico: Jarrin.veronica@gmail.com
ISSN 1657-9550 (Impreso) ISSN 2462-960X (En línea) Recibido: mayo 27 de 2015 - Aceptado: octubre 19 de 2015.
DOI: 10.17151/biosa.2015.14.2.5 Biosalud, Volumen 14 No. 2, julio - diciembre, 2015. págs. 49 - 62
Henry Jurado-Gámez, Verónica Jarrín-Jarrín
sought to determine the kinetic parameters determined. Results: Growth of 1.2x109 and
of growth of Lactobacillus lactis and its effect 4.1x109 CFU/ml at 1.2% bile and 0.5% bile salt
on Escherichia coli, Salmonella typhimurium, was obtained; 1.1x10 11, 2.1x1010 and 1.0x1010
Clostridium perfringens and Staphylococcus aureus. CFU/ml for 2.5, 4.5 and 7 pH respectively;
Materials and Methods: The growth of the and 1.7x1013 and 1.4x1013 CFU/ml for 45 and
lactic strain was evaluated at concentrations 38°C. The lactic strain showed resistance to
of 0.5, 1 and 2% bile salts; 1 and 1.5% bile; Cephalothin and Dicloxacilin; C. perfringens,
three levels of pH (2.5, 4.5 and 7) and two to Penicillin and Dicloxacillin; S. typhimurium
temperatures (38 and 45°C). Susceptibility of all and E. coli to Cephalothin; and S. aureus, to
strains to Dicloxacillin, Cefepime, Cephalothin, Dicloxacillin. L. lactis inhibited E. coli and C.
Ciprofloxacin, Gentamicin and Penicillin was perfringens, and the supernatant included S.
also evaluated using Kirby-Bauer technique. aureus. Conclusion: It is concluded that L. lactis
Inhibition of L. lactis and its supernatant in E.coli, present adequate growth in conditions in vitro
S. typhimurium, S. aureus and C. perfringens and and inhibited E. coli, C. perfringens and S. aureus
the following parameters were determined and but not S. typhimurium.
estimated: growth, pH, sugar consumption,
acidity and protein consumption during the Key words: probiotic, growth, microbial
kinetic fermentation in MRS. Peptides present antagonism, pathogenic bacteria, Lactobacillus
in the L. lactis supernatant through HPLC were lactis.
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Figura 1. Halo de inhibición de Dicloxacilina sobre E. coli.
La prueba de inhibición de L. lactis mostró Tabla 2. Efecto de inhibición de L. lactis sobre las
susceptibilidad de C. perfringens y E. coli en bacterias patógenas.
las tres concentraciones (25, 50 y 100 µl); S.
tiphymurium a 100 µl; y S. aureus no fue inhibida CEPAS 25 µl 50 µl 100 µl
en ninguna de las concentraciones (Tabla 2 y S. aureus 0,833 0,667 1,167
Figura 2).
C. perfringens 3,333 4,667 5,000
S. tiphymurium 1,667 1,500 2,000
E. coli 3,000 2,667 4,500
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Cinética de crecimiento de Lactobacillus lactis y determinación del efecto probiótico en cepas patógenas1
Cilindros
Filtrado Sin filtrar
Concentración
CEPAS 50 µl 75 µl 100 µl 50 µl 75 µl 100 µl
S. aureus 2,833 4,167 3,167 1,667 2,167 2,333
C. perfringens 0,500 1,167 1,167 0,167 0,000 0,500
S. tiphymurium 0,667 0,500 2,833 2,333 0,000 0,000
E. coli 1,333 0,333 1,167 0,833 0,333 0,833
Sensidiscos
Filtrados Sin filtrar
Concentración
CEPAS 50 µl 75 µl 100 µl 50 µl 75 µl 100 µl
S. aureus 2,000 2,333 3,167 1,833 2,167 1,833
C. perfringens 2,000 1,750 1,750 0,750 1,750 1,000
S. tiphymurium 2,250 1,500 2,000 2,250 2,750 1,000
E. coli 1,750 1,250 1,500 3,500 2,750 3,500
No se encontró correlación entre los dos métodos Los resultados de la cinética de fermentación,
usados (sensidisco, cilindro) para evaluar la el pH, la acidez, el azúcar y proteína medidos
inhibición del sobrenadante (Corr: 0,2658; durante el tiempo de fermentación se observan
p-value: 0,2092). en la Figura 3.
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Figura 3. Cinética de fermentación, pH, azúcar, acidez y proteína de L. lactis en medio MRS.
La fase exponencial de L. lactis se obtuvo a las valor de 0,0339 para acidez (R2: 0,794; p-value:
14 h 24 min con un crecimiento de 1,3 x 1013 0,00437); -0,3834 para azúcar (R2: 0,530; p-value:
ufc/ml en el medio MRS; durante este periodo 0,03849); -0,1936 para pH (R2: 0,735; p-value:
se observó un valor de 4,26 en el pH; 0,806% en 0,0084); y -0,0050 para proteína (R 2: 0,023;
la acidez, 1,24 mg/L de proteína y 2,70 mg/L p-value: 0,741). Los datos de la cinética de
de azúcar. El análisis de regresión mostró un crecimiento se pueden observar en la Tabla 4.
Medio MRS
Fase Lat 0
Vel. Esp. Crec. (μ h )
-1
14,48
Fin Fase Log (h) 14:24
Tiem. Dupl. (min) 2,87
Incr. Cel. Total 2,50E+09
Incr. Cel. Final 3,30E+13
% Azúc. Cons. Total (g/L) 92,41%
% Azúc. Cons. Fin. Total (g/L) 60,26%
% Prot. Cons. Total (g/l) 31,48%
% Prot. Cons. Fase Log (g/l) 9,69%
r2 = 0,772
La prueba de viabilidad de la bacteria láctica El análisis del sobrenadante de L. lactis por HPLC
a dos temperaturas mostró crecimientos mostró una cadena de péptidos VAL-TIR-VAL en
adecuados con valores de 1,7 x 1013 y 1,4 x 1013 el tiempo 11,842 con una concentración de 0,66
ufc/ml para 45 y 38°C respectivamente, a las 14 mg/ml de muestra (figuras 4 y 5; tablas 5 y 6).
h 24 min (fase exponencial).
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REFERENCIAS
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