I.

INTRODUCCIÓN

Las células llevan a cabo simultáneamente una gran cantidad de reacciones

químicas necesarias para la vida. Muchos de los productos de esas reacciones
se necesitan inmediatamente, y si no fuera por la participación de las enzimas,
algunas reacciones no se producirían tan rápido.

Las reacciones químicas que se dan en los seres vivos no podrían tener lugar
sin la presencia de los enzimas. Estas macromoléculas, que generalmente son
proteínas, catalizan las reacciones bioquímicas, permitiendo que los sustratos
se conviertan en los productos que necesita la célula. Como todo catalizador,
los enzimas no se consumen en las reacciones que catalizan, pero a diferencia
de otros catalizadores de naturaleza inorgánica, las reacciones que catalizan
son muy específicas: sólo interaccionan con determinados sustratos, y sólo
facilitan el curso de determinadas reacciones.

Un enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos es la catalasa,

necesaria para descomponer el peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico,
que se produce durante el metabolismo celular.

Objetivos:

 Determinar los factores que afecten la actividad enzimática.

 Determinar la actividad enzimática con la renina.
 II. REVISION BIBLIOGRAFICA

El nombre de enzima, que fue propuesto en 1867 por el fisiólogo alemán

Wilhelm Kühne (1837-1900), deriva de la frase griega en zyme, que significa
'en fermento'. En la actualidad los tipos de enzimas identificados son más de
2.000.

Las enzimas, en su mayoría proteínas o RNA (riboenzimas), son catalizadores

químicos que agilizan una reacción que envuelve la formación o rompimiento
de enlaces químicos.
Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razón
por lo cual no se necesitan en grandes cantidades. Las enzimas actúan sobre
los sustratos formando un complejo enzima sustrato esto ocurre en un lugar en
específico conocido como el sitio activo de la enzima. Las enzimas son muy
selectivas porque pocas moléculas pueden interactuar bien con este sitio.

Las enzimas reducen la energía de activación necesaria para llevar a cabo una
reacción; es decir, reducen la barrera de energía que hay que sobrepasar para
que la reacción se lleve a cabo.

Las enzimas trabajan óptimamente bajo condiciones específicas y ciertos

cambios pueden alterar el funcionamiento de la enzima, desactivarla o hasta
destruirla. Algunas enzimas necesitan activadores para cambiar su
conformación de modo que pueda formarse el complejo enzima–sustrato. Estos
activadores se conocen como cofactores y pueden ser tan simples como iones
metálicos. Los cofactores orgánicos se conocen como coenzimas. Las enzimas
pueden afectarse negativamente por inhibidores que impidan la actividad
enzimática. Estos inhibidores pueden afectar el sitio activo de dos maneras:
competitivamente, al bloquear el sitio activo, o no competitivamente, al pegarse
en otro lugar de la enzima y alterar indirectamente la forma del sitio activo.

Acción De Enzimas

La acción enzimática se caracteriza por la formación de un complejo que

representa el estado de transición. El sustrato se une al enzima a través de
numerosas interacciones débiles como son: puentes de hidrógeno,
electrostáticos, hidrófobos, etc, en un lugar específico, el centro activo. Este
centro es una pequeña porción del enzima, constituido por una serie de
aminoácidos que interaccionan con el sustrato.
Con su acción, regulan la velocidad de muchas reacciones químicas implicadas
en este proceso.

Relación entre coenzimas y vitaminas.

Los cofactores enzimáticos son sustancias de diferente naturaleza química,

que participan en las reacciones enzimáticas debido a que las enzimas no
poseen en su estructura todos los grupos funcionales necesarios para llevar a
cabo la catálisis de todas las reacciones metabólicas; los cofactores no son
componentes obligados de todas las reacciones.

Los cofactores pueden ser iones inorgánicos que facilitan la unión enzima-
sustrato o estabilizan la estructura tridimensional de la enzima, o constituyen
por sí los centros catalíticos que ganan eficiencia y especificidad al unirse a las
proteínas.

Las coenzimas son sustancias orgánicas que aún cuando pueden funcionar de
formas muy variadas, lo más frecuente es que lo hagan como transportadores
interenzimàticos o intraenzimàticos, muchas coenzimas son formas funcionales
de las vitaminas.

Las vitaminas son sustancias químicas que deben ser ingeridas por el
organismo para su normal crecimiento y desarrollo. Es un hecho comprobado
que muchas vitaminas, especialmente las hidrosolubles, tienen importancia
funcional por ser componentes de la estructura de las coenzimas, por ello
muchas veces se habla de forma coenzimaticas de determinada vitamina. En la
porción vitamínica de la coenzima en general radica el grupo funcional
especifico de la coenzima, aquel que es transformado por la acción de la
enzima, pero es necesario tener presente que no todas las vitaminas forman
parte de coenzimas, ni todas las coenzimas contienen una vitamina en su
estructura.
Regulación de actividad enzimática:

Cuando un sistema o proceso es capaz de variar su comportamiento como

respuesta a cambios que se produzcan en su entorno, de forma que la
respuesta directa o indirectamente tiende a modificar el estímulo para volver a
la situación inicial se dice que este sistema está regulado.

La regulación enzimática se refiere a la posibilidad que tienen las enzimas de

variar la velocidad de las reacciones que aquellas catalizan al producirse
determinados cambios en el medio; esa posibilidad viene dado por
características estructurales de las enzimas y que son una vez más
manifestaciones del vínculo que existe entre la estructura y la función de las
biomoléculas.

Los cambios de velocidad observados durante el proceso de adaptación son

debido a cambios cuantitativos o cualitativos de los centros activos, y
atendiendo a esto las formas básicas de la regulación enzimática se
manifiestan por variación en la cantidad o la actividad de las enzimas

Efecto De La Concentración De Enzima

La actividad de una enzima se puede estudiar in vitro, bajo condiciones

controladas añadiéndole una enzima a un substrato. Sí se trabaja con la
condición de que la concentración del substrato sea saturante, variando
entonces la concentración de enzima, se observa que aumenta el producto de
la reacción, a pH y temperatura constantes.
 Si se mantiene la concentración de la enzima constante y variando la
concentración de substrato se obtiene una curva hiperbólica como la de la
figura. Al principio un aumento de la concentración de substrato produce un
aumento rápido de la velocidad de reacción, pero si se sigue aumentando la
concentración de substrato, la velocidad de reacción comienza a disminuir y a
muy altas concentraciones de substrato se observa que no cambia la velocidad
de reacción, se dice que los centros activos de la enzima se encuentran
saturados. La velocidad de reacción que se obtiene a esa alta concentración de
substrato se define como la velocidad máxima (V) de la reacción enzimática
bajo las condiciones especificadas. La concentración de substrato (S), a la
semivelocidad máxima de reacción (V/2) se puede determinar de la figura y
representa la constante de Michaelis o Km, la cual es una característica para
cada enzima. La inversa de Km, o 1/Km, mide aproximadamente la afinidad de
la enzima por el substrato. Mientras más pequeño sea el valor de Km, mayor
será la afinidad de la enzima por el substrato. Si varias enzimas compiten en el
metabolismo por el mismo substrato, éste será transformado preferentemente
por la enzima con mayor afinidad.

La ecuación de Michaelis describe la relación cuantitativa entre la velocidad de

reacción y la concentración de substrato [S], si se conoce Vmax o Km:

V=

En donde:
v= es la velocidad de reacción observada a una concentración de substrato
determinada [S]
Km= constante de Michaelis en moles/lítro
Vmax= velocidad máxima a concentración saturante de substrato.
Si v= Vmax/2; entonces 

Km+[S] = 2[S]

Km =[S]

De tal forma que podemos concluir que Km es igual a la concentración de

substrato a la semivelocidad máxima de reacción.

Efecto Del pH Sobre La Actividad Enzimática

Sabiendo que las enzimas son proteínas, cualquier cambio brusco de pH

puede alterar el carácter iónico de los grupos amino y carboxilo en la superficie
proteica, afectando así las propiedades catalíticas de una enzima. A pH alto o
bajo se puede producir la desnaturalización de la enzima y en consecuencia su
inactivación. La fosfatasa ácida es más activa a pH 5,0, mientras que la
fosfatasa alcalina lo es a pH 9,0. Muchas enzimas tienen máxima actividad
cerca de la neutralidad en un rango de pH de 6 a 8.

El pH per se no afecta la actividad enzimática, sino la concentración de

protones. Los protones además de alterar la estructura de la enzima y el
substrato, pueden participar también en la reacción como substrato o producto.
En esos casos, la concentración de protones afecta directamente la velocidad
de la reacción.
ENZIMA pH OPTIMO
Pepsina 1,5
Tripsina 7,7
Catalasa 7,6
Arginasa 9,7
Fumarasa 7,8
Ribonucleasa 7,8
Efecto De La Temperatura

Un aumento en la temperatura provoca un aumento de la velocidad de reacción

hasta cierta temperatura óptima, ya que después de aproximadamente 450 C
se comienza a producir la desnaturalización térmica. Las enzimas de muchos
mamíferos tienen una temperatura óptima de 370 C, por encima de esa
temperatura comienzan a inactivarse y se destruyen Sin embargo existen
especies de bacterias y algas que habitan en fuentes de aguas termales y en el
otro extremo ciertas bacterias árticas tienen temperaturas óptimas cercanas a
00 C.

Efecto De Activadores

Ciertas enzimas se encuentran como aproenzimas o zimogenos que son

inactivos.

El tripsinógeno es convertido en tripsina por la misma acción de la tripsina, que

remueve un hexapéptido. 
           Tripsinógeno      Tripsina + Val (Asp)4 lisina

Otra forma de activación consiste en mantener los grupos SH reducidos. Estos

grupos pueden formar parte de centros activos de ciertas enzimas. Si se oxidan
estos grupos a -S-S- la enzima se inactiva. Así tenemos que la enzima
papaína, se inactiva después de exponerla al oxígeno; pero cuando se le
añade un reductor apropiado la enzima se reactiva. Los grupos -S-S- se
convierten en -SH, activándose la enzima.
 III. MATERIALES Y METODO

3.1 Materiales:

 1 Litro de lecha fresca

 Renina
 Almidon
 Carbonato de calcio
 Refrigerante
 Cocina eléctrica
 Termómetro
 Vasos precipitados

3.2 Procedimiento

 Parte 1

Llenar en 3 vasos 80ml de leche

Luego llevar a refrigeración por 15 min.

Una vez retirada de la refrigeración añadir la renina + sal + agua

Nuevamente llevar a refrigeración por 15min.

 Parte 2

Llenar en 3 vasos 80ml de leche

Lo llevamos a 37ºC

Seguidamente agregaremos la renina + agua

 Parte 3

Llenar en 2 vasos 80ml de leche

Lo llevamos a 60ºC es decir a un grado de ebullición

1 Vaso precipitado
Agregar Renina + sal

2 Vaso precipitado
Agregar Carbonato de
calcio+ Renina + sal

 Parte 4

Llenamos agua en 2 vasos precipitados y diluimos el almidón, en este caso el

chuño.

1 Vaso precipitado
Agregamos la
enzima tialina

2 Vaso precipitado
- Lo llevamos a temperatura
-Luego agregamos la amilasa salival ‘’tialina’’
 IV. RESULTADOS

 Parte 1

Se observa que la actividad enzimática ha descendido por la temperatura a la

que se expuso.

 Parte 2

Se puede observar que se ha coagulado pero de una manera lenta debido a

que no encontraba en una temperatura adecuada.

 Parte 3

Se puede observar que en donde se agrego solamente la renina mas sal no

coagulo

A comparación de donde se agrego carbonato de calcio + renina + sal que si

coagulo con una mayor rapidez a las demás.
  Parte 4

Se nota la diferencia que cuando el almidón es lleva a una temperatura esta se

compacta.
 V. CONCLUSIÓN

 Con esta práctica se ha permitido entender mejor el concepto de enzima

y los factores que afectan a su actividad.

 La leche se altera de manera a la que se encuentre referente a su

temperatura, para que así con ayuda de la renina de pueda llevar a cabo
la reacción enzimática

 La actividad enzimática de la renina también se altera, de manera que

se acelera con facilidad cuando se encuentra a su temperatura
adecuada que en su caso es 70ºC.

VI. BIBLIOGRAFIA

 Lehninger Albert L. Principios de Bioquímica. Ed. Omega,

S.A./Barcelona, 1991. Cap9 Enzimas. Pag. 209-216.
 http://academic.uprm.edu/~jvelezg/lab7-2.pdf
 http://www.cac.es/cursomotivar/resources/document/2010/1.pdf
 http://www.monografias.com/trabajos12/enzim/enzim.shtml
 http://www.monografias.com/trabajos28/actividad-enzimatica/actividad-
enzimatica.shtml
 http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/enzimas/