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El efecto del detergente como agente contaminante sobre la actividad


fotosintética y el contenido de clorofila en las hojas de judía

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BojovićSrdjan InstitutodeFísica Bratimir


UniversidaddeBelgrado Miljko Panic Belgrado
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Vol.2, No.5, 395-399 (2010) Salud
doi:10.4236/health.2010.25059

El efecto del detergente como agente


contaminante sobre la actividad fotosintética y
el contenido de clorofila en las hojas de judía
Branislav R. Jovanić1 *, Srdjan Bojović2 , Bratimir Panić1 , Božidar Radenković3
, Marijana Despotović 3
1Instituto
de Física, Universidad de Belgrado, Zemun, Serbia; *Autor correspondiente: branislav.jovanic@ipb.ac.rs
2Institutode Investigación Biológica "Siniša Stanković", Belgrado, Serbia
3Facultad de Ciencias de la Organización, Belgrado, Serbia

Recibido el 28 de octubre de 2009; revisado el 10 de enero de 2010; aceptado el 12 de enero de 2010.

anticuadas o nuevas. Las fuentes de contaminación


RESUMEN pueden ser, lo que a menudo se ignora, algunos procesos
domésticos en el entorno urbano, como la preparación de
El trabajo investiga los efectos del detergente los alimentos o la higiene personal.
de uso doméstico sobre la actividad
fotosintética y el contenido de clorofila en hojas
de frijol intactas. Las plantas fueron regadas
durante 21 días con una solución de detergente
de uso doméstico de 0,60 g r/l. Se estableció
que la actividad del aparato fotosintético en la
hoja de la planta PhACNorm [%] disminuye
exponencialmente con la duración del
tratamiento/riego de la planta. Al final del
tratamiento (21 stdías), la actividad del aparato
fotosintético en la hoja de la planta dosificada
no superaba el 45% de la de la planta de control
(las que no fueron tratadas con solución
detergente). Al aumentar la duración del
tratamiento de la planta, la concentración de
clorofila modificada ΔChl Norm[%] aumentó de
forma no lineal en las hojas de la planta. El
cambio más alto de ΔChl Norm[%] se observó en
el día 21 sty ascendió al 12%.

Palabras clave: Clorofila; Detergente;


Planta; Fotosíntesis; Contaminación;
Agua

1. INTRODUCCIÓN
Las altas tecnologías y los procesos tecnológicos van
siempre acompañados de productos que contaminan el
medio ambiente en mayor o menor medida. Muy pocos
de estos productos no son contaminantes. Por ello, el
estudio del medio ambiente es cada vez más importante
para la supervivencia del mundo vegetal y animal y, en
última instancia, de la propia humanidad. Hay que tener
en cuenta que no hay que buscar un culpable de la
contaminación ambiental sólo en las tecnologías

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higiene. El objeto de este estudio es una investigación
sobre la contaminación del agua resultante de los
procedimientos higiénicos domésticos cotidianos.
Apenas hay hogares que no tengan una lavadora
conectada con tuberías al alcantarillado para verter el
agua usada con detergente. Las aguas usadas se vierten
al río o al lago más cercano y con ellas el detergente.
Sin duda, con el tiempo la concentración de detergente
en el río o lago aumenta y la consecuencia directa es un
cambio dramático en la biosfera. En Teherán se
observó una importante contaminación de las aguas
subterráneas [1]. Hay otros numerosos ejemplos de ríos
y lagos contaminados con detergentes industriales. Por
ejemplo, se descubrió que las aguas del Mar Caspio y
los ríos Volga Terek y Sulak estaban muy
contaminados con una alta concentración de
detergentes [2]. El río Аsa, en Nigeria, está muy
contaminado con detergentes industriales [3].
Asimismo, la zona costera del Mar de Okhotsk y la
Bahía de Avacha están contaminadas con detergentes
[4]. Independientemente de que se trate de agua de río
o de lago, se utiliza en jardinería para regar las
hortalizas destinadas al consumo humano. Sin duda,
esta agua provocará cambios en los vegetales que
pueden tener un efecto adverso en las personas que los
consumen.

2. MATERIAL Y MÉTODOS

2.1. Métodos
Las semillas de judías (Phaseolus vulgaris L.) se
cultivaron durante 3 semanas. Se colocaron en una
cámara de crecimiento ajustada a las mismas
condiciones de cultivo (humedad, iluminación,
temperatura, nutrición del suelo). Las plántulas se
regaron diariamente con agua del grifo durante todos
los periodos investigados. Tras este periodo, las plantas
se dividieron en dos grupos: control y estrés. Las
condiciones de cultivo también se identificaron para las
muestras de control y de estrés y la única diferencia fue
la presencia o ausencia de detergente en el suelo.
Concentración de detergente de uso doméstico en el
agua

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utilizado para el riego fue de 0,60 g r/l. Las muestras de con la cantidad de contenido de clorofila en las hojas de la
control se regaron con agua sin detergente. Por lo tanto, planta de frijol [7]. Por lo tanto, el contenido de clorofila
cualquier diferencia entre los espectros de fluorescencia se determinó utilizando: a) los espectros de fluorescencia
y la curva inducida de fluorescencia para las plantas de la judía y b) la relación entre el contenido de clorofila y
estresadas frente a las de control sólo podría ser el la relación de intensidad de fluorescencia FIR definida
resultado de la presencia de detergente. como la relación de la intensidad de fluorescencia medida
En todos los experimentos, las hojas de la planta en
permanecen intactas (el corte es un estrés adicional) y
podemos realizar varias mediciones en la misma planta
en cualquier momento. En el resto del texto, los
subíndices (S) y (C) denotan las condiciones de estrés o
de control (sin estrés), respectivamente. Las actividades
fotosintéticas se determinaron mediante el conocido
método Kautczhy. Las mediciones de la fotosíntesis de
las plantas adaptadas a la luz, mediciones no destructivas
del rendimiento cuántico potencial (Fv/Fm), se tomaron
utilizando un fotodiodo conectado con una tarjeta AD de
14 bits para recoger la fluorescencia modulada. Delante
del fotodiodo se colocó un filtro de interferencia de 690
nm 5 nm. La fuente de excitación para la curva de
inducción de fluorescencia fue un LED de alta
intensidad de 470 nm/12 mW. Los granos se
transfirieron a un laboratorio a oscuras durante 5
minutos para su adaptación antes de medir la cinética de
fluorescencia a 690 nm [5]. Cada punto de la Figura 1 y
la Figura 2 representa el valor medio de 15 mediciones
en diferentes hojas, lo que satisface completamente la
exigencia de que la precisión de la medición y el cálculo
de los valores [ΔChl(a,b) y PhAc Norm] sea superior al
1% [6].
Para la excitación de las hojas y la obtención de los
espectros de fluorescencia se irradió la hoja con un LED
de alta potencia (470 nm/12 mW). La entrada de la fibra
se colocó a 15 mm de la superficie de la hoja. El
diámetro del haz del LED sobre las hojas era
~10 mm. El haz de luz LED se dirigió siempre hacia la
superficie superior de las hojas en un ángulo de 90 del
eje de la hoja, y la fibra óptica se colocó en un ángulo de
90 con respecto a la superficie de las hojas en el mismo
lado. La radiación de fluorescencia emitida por la hoja
intacta se recogió y se dirigió a través de una fibra óptica
(N.A. de 0,22 y diámetros de 1000 µm) que se acopló a
un espectrómetro CCD portátil de 2048 elementos
(AVANTES 1000 PC). La recogida de datos y el
procesamiento del espectro se realizaron en tiempo real
con el microordenador y el software comercial OOI Base
(AVANTES Inc.). Los resultados de cada grupo de
judías representan una media de la medición de diez
hojas. Las mediciones de fluorescencia duraron 1,5
minutos para cada hoja medida.
El contenido de clorofila Chl(a,b) en la hoja de judía
se determinó a partir de la espectroscopia de
fluorescencia obtenida experimentalmente y de la
conocida relación entre el contenido de clorofila y la
ración de intensidad de fluorescencia. Es bien sabido que
la relación de los dos picos de fluorescencia de la
clorofila (F 730/F690 ) en las hojas se correlaciona bien
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730 nm (F 730) y 690 nm (F 690) FIR = FIR 690/FIR 730.
Para la judía, la correlación lineal (r2 = 0,954) entre el
contenido de clorofila(a,b) y la FIR es Chl(a,b) = 42,93
- 12 FIR y se obtuvo a partir de los datos de la
literatura [5]. Para eliminar los errores que pueden
aparecer debido a las diferencias en los contenidos
individuales de clorofila en diferentes muestras de
judías, introdujimos un cambio relativo de la
clorofila(a,b):
Chl(a, b) Chl(a, b) UVChl(a, b) C12FIR FIRUVC

FIR Cy FIRUV son la relación de intensidad de


fluorescencia para la planta de control que no fue
expuesta a la radiación UV y la planta que fue expuesta
a la radiación UV. Este método tuvo éxito en el
experimento con una calabaza expuesta a la radiación
γ-nuclear [8].

Figura 1. Cambio en el contenido de clorofila ΔChl(a,b) en


las hojas de judía durante el riego con agua que contiene
detergente.

Figura 2. Cambio de la actividad fotosintética normalizada


PhAcNorm en las hojas de judía en función del tiempo de
exposición a la radiación con detergente.

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enzima nativa perdió el 50% de la actividad después de 20
3. RESULTADOS minutos de incubación [10]. El efecto del detergente en las
plantas varía según la forma en que se exponga la planta a
Para evitar los efectos de la edad de la planta en la él. Por ejemplo, cuando se regó la judía con una solución
concentración de clorofila, las plantas de control y las al 0,01% (p/v) del detergente zwitteriónico no
dosificadas tenían la misma edad. Para evitar la desnaturalizante [3-{3-cholamidopropyl}-dimetilamonio]-
determinación de la concentración real de clorofila, se 1-propanosulfonato) al 0,01% (p/v) se indujo el pelo de la
determinó la reducción relativa de la concentración de raíz
clorofila: se marcó la concentración de clorofila en las
plantas dosificadas ΔChlNorm en comparación con las
muestras de control de la misma edad que no fueron
tratadas con detergente. La reducción de la
concentración de clorofila en los valores marcados ΔChl
Norma lo largo del tiempo de tratamiento con detergente
se muestra en la Figura 1. La figura 1 muestra que con
el tiempo el cambio relativo de la concentración de
clorofila aumenta rápidamente hasta alcanzar su máximo
en el decimoséptimo día con un 11,5%
aproximadamente. Obviamente, en este periodo el
detergente tiene un efecto adverso sobre la clorofila
destruyéndola constantemente. Después de esto, el
cambio relativo de la concentración de clorofila se
mantiene estable en el mismo valor. Este patrón puede
explicarse con la hipótesis de que la planta se adaptó a
las condiciones poco favorables y desarrolló un
mecanismo para mantener la concentración reducida de
clorofila.
Al determinar la actividad fotosintética PhAc del
aparato fotosintético en una hoja de la planta, igualmente
al determinar la reducción de la concentración de
clorofila en las plantas de control y en las dosificadas,
las plantas tenían la misma edad para evitar el efecto de
la edad de la planta. Para evitar la determinación de la
actividad fotosintética absoluta, se determinó la
reducción relativa de PhAc. La PhAc en la planta tratada
con detergente se marcó PhAc Normpara distinguirlas de
las muestras de control de la misma edad que no fueron
tratadas con detergente. Los cambios obtenidos en los
valores marcados PhAc Norma lo largo del tiempo de
tratamiento con detergente se muestran en la Figura 2.
A diferencia de la concentración de clorofila, la
actividad fotosintética PhAc disminuye de forma
constante y exponencial hasta alcanzar sólo el 45% de la
actividad inicial a los 21 stdías. Este patrón indica que
esta agua tiene efectos adversos en las plantas.

4. DISCUSIÓN
Los artículos científicos ofrecen datos que indican los
diferentes efectos de los distintos detergentes en las
plantas. En la mayoría de los casos, los detergentes tienen
efectos adversos sobre los pigmentos y la morfología de
las plantas e inhiben los procesos metabólicos. Se ha
comprobado el efecto tóxico del dodecil sulfato sódico
(SDS) y de los detergentes sintéticos de uso doméstico
(HSD) Kristall y Tix (0,1, 1 y 10 mg/l) sobre la diatomea
Alga Thalassiosira pseu- donana [9]. Por la presencia en
el agua de detergentes para lavados domésticos de lana la
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ejemplo, la exposición durante 10 minutos en agua que
deformación [11]. Asimismo, en las semillas de frijol contiene unas gotas de detergente líquido induce el
mungo (Vigna radiata) el detergente sintético indujo aumento de la fotosíntesis [28]. Se llegó a la conclusión
una reducción de la actividad deshidrogenasa [12]. Las de que el detergente (Triton X-100) provoca daños en la
hojas perdieron completamente su presión de turgencia parte donante del fotosistema 2 en
y mostraron clorosis cuando fueron tratadas con
detergentes [13]. Las características biofísicas de la
membrana se modificaron tras el tratamiento con
detergente (Brij 58) [14]. El detergente inhibió el
crecimiento, la actividad metabólica tuvo lugar sólo
durante 1 a 5 días, después de los cuales la actividad
metabólica también cesó [15]. Además, una alta
concentración de detergente podría causar la pérdida de
la configuración nativa del β-caroteno [16]. El
crecimiento celular y la inhibición de la fisión, así como
los cambios morfológicos y el bloqueo de la síntesis de
clorofila a, se registraron a una concentración de 10
mg/L de detergente de abono sintético doméstico
(HSA) [17]. Cuando el β-caroteno se trata con una alta
concentración de detergente [18], esto podría causar la
pérdida de la configuración nativa [18]. Las membranas
de las plantas superiores pueden fraccionarse con varios
detergentes [19].
Como se desprende de nuestros datos, la clorofila es
sensible al detergente, lo que coincide con los
resultados de otras investigaciones. La planta tratada
con detergentes con contenido de agua mostró un alto
efecto inhibidor sobre el contenido de clorofila en las
hojas de girasol [20]. La agregación de la clorofila es
parcialmente inhibida por el detergente Triton X-100
[21]. Además de reducir su concentración, los
detergentes tienen otros efectos sobre la clorofila. Los
estudios sobre los complejos cosechadores de luz LHCs
muestran que la disociación inducida por los
detergentes de los LHCs y causó la disminución de la
unión de Chl b y Chl a [22]. Los resultados sobre los
complejos pigmento-proteína de los tilacoides de Pisum
sativum tratados con el detergente Triton X-100 y n-
octyl β-D-glucopyranoside muestran que se produce
una disociación reversible de los complejos pigmento-
proteína [23]. El crecimiento celular y la inhibición de
la fisión en el alga criptofítica Chroomonas salina
(Wils.) Butch. (Cryptophyta), así como cambios
morfológicos y bloqueo de la síntesis de clorofila a, se
registraron a una concentración de 10 mg/L de
abstergente sintético doméstico (HSA) "Tix" [17] .
Además del efecto del detergente sobre la clorofila ya
comentado, era de esperar que se observara un efecto
similar, posiblemente incluso idéntico, sobre la
fotosíntesis. La desnaturalización reversible de la
reacción del fotosistema inducida por el detergente [24].
Los detergentes tienen un fuerte efecto sobre las
propiedades de fluorescencia de los complejos
recolectores de luz del fotosistema II [25]. El detergente
(Triton X-100) tiene efecto en la dinámica de relajación
del fotosistema II [26]. Algunos resultados han
demostrado que una baja concentración del detergente
no iónico Triton X es suficiente para la saturación de la
fotosíntesis en plantas superiores terrestres [27]. Incluso
una breve exposición a los efectos de los detergentes
provoca amplios cambios en la fotosíntesis. Por
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cloroplastos aislados [29]. El tratamiento con detergentes detergentes en el crecimiento in vitro del alga diatomea
de las membranas provocó la pérdida de las actividades thalassiosira pseudonana. Russian Journal of Marine
del PS I [30]. El detergente no iónico n-dodecyl-α, D- Biology, 28(5), 324-328.
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detergente puede provocar cambios morfológicos de responding to rhizobium etli nodulation signals. Plant
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Phosphatidic acid induces leaf cell death in arabidopsis
Los detergentes en el agua de riego de las plantas tienen by activating the rho-related small G protein GTPase-
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K. y Oyrensen, J.S. (2001) Toxic effects of linear alkyl-
6. AGRADECIMIENTOS benzene sulfonate on metabolic activity, growth rate, and
microcolony formation of nitrosomonas and nitrosospira
Este trabajo fue apoyado por la subvención No. 141007 de MNRS. Los strains. Applied and Environmental Microbiology, 67(6),
autores quieren agradecer al Sr. P. Hiddinga su amabilidad en el apoyo 2489-2498.
a los equipos. [16] Nanba, O. y Satoh, K. (1987), Proceedings of the Na-
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