TALLER SEGUNDO CORTE

SPLICING

LEONOR DE JESUS BRITO TAPIA

ENGELBERT SIDRAC PEÑA MERLANO

UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR

CIENCIAS BASICAS Y BIOMEDICAS
QUIMICA Y FARMACIA
BIOLOGIA MOLECULAR
2021
 Taller de biología molecular
1. Mecanismo molecular de splicing.

Splicing es un proceso postranscripcional de maduración del ARNm del cual eliminan

ciertos fragmentos secuenciales. Se trata de un mecanismo muy exacto, pues de no
serlo produciría un corrimiento del marco de lectura en el mensaje transcripto.

Para entender el mecanismo splicing se debe tener en cuenta que el exón es la región
de un gen que no es separada durante el proceso de corte y, por tanto, se mantienen
en el ARN mensajero maduro. En los genes que codifican una proteína, son los
exones los que contienen la información para producir la proteína codificada en el
gen. En estos casos, cada exón codifica una porción específica de la proteína
completa, por lo tanto, el conjunto de exones forma la región codificante del gen.
Estos exones de un gen están separados por regiones largas de ADN que no
codifican, son las que llamamos intrones. Este proceso se da en la espliceosoma, que
es el complejo de ribonucleoproteínas donde se eliminarán los intrones que no serán
traducidos a proteínas, dando lugar a la unión de los exones.

Los intrones son cortados del ARNm inmaduro por un sistema específico que
reconocen secuencias cortas dentro de él y que se encuentra cerca de los límites con
exones. Estas secuencias son llamadas "sitio dador" (común en casi en todos los
intrones), en el extremo 5’y "sitio aceptor", en el extremo 3’ (Fig. 2).

El trabajo del corte y empalme esta catalizado por una estructura pequeña,
compuesta por ribonucleoproteinas nucleares llamadas snRNPs, constituidas por
pequeños ARN nucleares (snARNs) asociado a proteínas. Su nombre es spliceosoma.
Esta estructura tiene a su cargo el reconocimiento de las secuencias mencionadas
anteriormente en los intrones y su posterior fijación. Luego se desarrollan una
secuencia de pasos que determinan el clivaje y ligado de los intrones y exones (Fig.
3):
 • el extremo 5’del intrón es clivado y unido a otros sitio interno del intrón,
cercano a su extremo 3’ llamado "sitio de ramificación" .
• Se produce el corte en el extremo 3’ del intrón y son empalmados los dos
exones de cada lado, liberándose el ARNm maduro del spliceosoma.
• El intrón eliminado queda formando una estructura con forma de lazo,
llamada "lariat", que posteriormente es degradado en el núcleo.

Se ha observado que ARNm inmaduros idénticos del mismo gen se procesan en más
de una forma. Esto significa que existen diversos empalmes alternativos, los cuales
desarrollaran diversos ARNm maduros y por lo tanto distintos polipéctidos
funcionales.

El código de splicing, en la transcripción del ADN a ARN, el procesamiento de los pre-

mensajeros está regulado por la presencia de una serie de elementos, los elementos
cis y los elementos trans, que juntos constituyen el “código de splicing” (Faustino
and Cooper, 2003; Villate et al., 2008). Los elementos cis se pueden definir como
pequeñas secuencias necesarias presentes a nivel de ARNm que son identificadas
por la maquinaria de splicing (spliceosoma) para producir un correcto proceso de
splicing. Los elementos trans incluyen las proteínas (spliceosoma) que están
implicadas en los procesos requeridos para identificar las uniones intrón/exón y
catalizar las reacciones de corte y empalme que escinden los intrones y unen los
exones en el orden correcto.

El splicing es un sistema que facilita la lectura de los genes. Los genes, las
instrucciones para crear un organismo, tienen partes con sentido (frases o exones) y
partes sin sentido (palabras al azar, o intrones). Precisamente el splicing elimina los
intrones y facilita la lectura de las instrucciones. Entender el splicing es fundamental,
de lo contrario tener la secuencia de todos los genes (el genoma humano) sería como
tener un libro y no saberlo leer.

Además, existe el splicing alternativo, un mecanismo que aumenta la diversidad de

proteínas posibles. Es decir, diferentes células, o la misma célula en diferentes
condiciones, pueden decidir incluir o no un determinado exón (frase) en las
instrucciones finales de un gen, lo que modifica las proteínas resultantes haciendo
que tengan acciones diferentes, incluso contrarias. El hecho es que ya sabemos que
cerca de un 30% de enfermedades genéticas como la neurofibromatosis son debidas
a problemas con el splicing.

2. Representación gráfica del proceso de splicing.

La información genética codificada en el AND se transcribe a una copia de ARN

(transcripto primario). Esta copia luego se modifica con la adición del casquete 5’
(CAP) y la cola de poli-A, la escisión de los intrones y la unión de los exones (splicing).
El mRNA maduro luego va al citoplasma, donde se traduce a proteínas.

3. Mapa conceptual sobre el uso del splicing en salud y farmacia.

 Referencias bibliográficas

. Por el Ing. Agr. Carlos A. González, “Procesamiento de ARNm en la Transcripción ("splicing")”

https://botanica.cnba.uba.ar/Pakete/Dibulgeneral/Splicing/Splicing.htm

. Maruxa Martínez Campos, “Splicing o empalme” https://ellipse.prbb.org/es/splicing-o-

empalme/

. OLATZ VILLATE BEJARANO, “SPLICING EN EL MHC DE CLASE III: CARACTERIZACIÓN Y EXPRESIÓN

DE LAS ISOFORMAS DEL GEN FIL1. ESTUDIO DE SU RELACIÓN CON ARTRITIS REUMATOIDE”
https://repositorio.uam.es/bitstream/handle/10486/4842/31639_villate_bejarano_Olatz.pdf;sequ
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