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Bitacora 2."determinación de Aminoácidos Terminales Con Grupo Alfa Amino
Bitacora 2."determinación de Aminoácidos Terminales Con Grupo Alfa Amino
INTRODUCCIÓN
Un aminoácido es una pequeña molécula orgánica que contiene, al menos, un grupo
amino (-NH2), de naturaleza básica, y un grupo carboxilo (-COOH), de carácter
ácido. Aunque los seres vivos sintetizan para distintos propósitos diversos tipos de
aminoácidos, sin duda los más importantes son los que forman parte de las
proteínas, todos los cuales pertenecen al grupo de los - aminoácidos. Los -
aminoácidos se caracterizan por presentar el grupo carboxilo y el grupo amino
unidos al mismo átomo de carbono. Un aminoácido terminal se refiere al extremo
de una proteína o polipéptido que finaliza con un aminoácido que posee un grupo
amino libre.
En 1943 Frederick Sanger comenzó a trabajar con proteínas, estudió los grupos
terminales de la molécula porque había descubierto que esta abundaba en grupos
terminales α-amino libres, lo que indicaba la presencia de grupos αamino libres en
el extremo de cadenas cortas. (La insulina era una proteína de gran interés médico
debido al descubrimiento de Banting y Best,) Sanger utilizó un reactivo llamado
dinitrofluorobenceno o 1-fluoro-2,4-dinitrobenceno de coloración amarilla que
reaccionar con los grupos alfa-amino libres y con los grupos imidazol, fenólicos y
épsilon-amino.
OBJETIVOS
1. Identificar el aminoácido alfa-amino terminal de las cadenas de la molécula de
hemoglobina mediante el método de Sanger.
2. Utilizar la técnica de cromatografía para separar e identificar los aminoácidos
dinitrofenilados
3. Determinar los valores de Rf, como parámetros de identificación.
METODOLOGÍA
Extraer 4 veces la
Agitar hasta Centrifugar a
suspensión en el tubo, con Colocar el tubo con la
evaporar los 3000 rpm por 15
5 mL de éter saturado y 5 proteína en baño María
residuos de éter minutos
mL de sulfato de fierro.
Desarrollar en forma
Circunscribir el lugar donde se Marcar con Sacar los descendente con el
encuentran las manchas de lápiz el frente cromatogramas mismo solvente (ácido
los derivados dinitrofenilados del solvente y de la cámara e cítrico-citrato de sodio)
tipo, del DNFB y de la dejarlos secar; inmediatamente. por un tiempo de 4.5 a 5
muestra problema. horas, aproximadamente.
Bibliografía
-Moreno Salazar S. F., (s/f), Aminoácidos y Proteínas, Temas Selectos de Bioquímica General,
recuperado el 07 de marzo de 2021 de:
https://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-y-ciencia/electricidad-que-cura-
633/sanger-13213
-Bender A. D., Botham K. M., Kennelly P.J., Murray R.K., Roudwell V.W., Weil P.A. (2009). “Harper
bioquímica ilustrada”. Editorial McGraw Hill. 28ª edición. Ciudad de México. Pp 21-23