UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCO

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE MEDICINA
SECCION BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR
ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICION
CURSO DE BIOQUÍMICA

PRACTICA DE LABORATORIO N º 02

“FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA”

I. COMPETENCIAS.-

Al finalizar la Práctica de Laboratorio el alumno será capaz de:

1.- Determinar el pH óptimo de la enzima en estudio
2.- Determinar la temperatura óptima de la enzima en estudio.
3.- Determinar el tiempo de incubación de la enzima en estudio.
4.- Determinar Km y Vmax de la gráfica del efecto del sustrato vs la actividad enzimática.

II. PRE-REQUISITOS PARA LA PRÁCTICA DE LABORATORIO.-

Conceptos Básicos:
- Enzima – Sustrato - Producto.
- Complejo Enzima-Sustrato.
- Cinética Enzimática.
- Constante de Michaelis-Menten (Km).
- Velocidad Máxima (Vmáx).
- Cinética de Michaelis-Menten.
- Diagrama de Lineweaver-Burk.

III. GENERALIDADES.-

Los biocatalizadores específicos sintetizados por el organismo, llamados enzimas, son

proteínas que intervienen en las reacciones biológicas, acelerando la velocidad de reacción
hasta alcanzar su punto de equilibrio. Las enzimas son sumamente específicas en las
reacciones que catalizan y en los compuestos (llamados substratos) sobre los que actúan.

Guía de Practicas del Curso de Bioquímica – EP Tecnología Médica

UNMSM – Facultad de Medicina - Semestre 2021-I
Blgo. Marco Antonio Núñez Fonseca
La cinética enzimática es el estudio del comportamiento de la velocidad en reacciones
catalizadas por enzimas. Las mediciones de la cinética proporcionan una herramienta
bioquímica muy útil para calcular la concentración de una enzima en una muestra biológica
y comparar su actividad catalítica con la de otras enzimas. Además, las mediciones cinéticas
permiten describir de manera cuantitativa el efecto de un veneno o medicamento sobre la
actividad de una enzima.

La velocidad a la que procede una reacción enzimática está controlada en parte por las
concentraciones de la enzima y el substrato. A medida que progresa la reacción, aumenta
la concentración de los productos a expensas de la desaparición de los correspondientes
substratos, en tanto que la concentración de la enzima no se altera.

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Blgo. Marco Antonio Núñez Fonseca
La actividad enzimática puede expresarse:

a) Por la desaparición del Substrato (S)

b) Por la aparición de Productos (P)
c) Por modificación de Cofactores (C)
El mecanismo de reacción enzima-sustrato puede simbolizarse así:

[E] + [S] [E] + [P]

C C’

Diversos factores modifican la actividad enzimática, tales como:

1) Concentración de Substrato [S]

2) Concentración de la Enzima [E]
3) pH del medio
4) Influencia de la temperatura
5) Efecto de inhibidores y activadores

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Blgo. Marco Antonio Núñez Fonseca
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