INSTITUTO POLITECNICO

NACIONAL

CECYT 6 “MIGUEL OTHON

DE MENDIZABAL”

INTEGRANTES:

CASTILLO AVILA BERENICE

CHARGOY CRUZ ARIE GABRIEL
ESPINOSA CANO RENÈ MISAEL
GARCIA ARROYO ALEJA GUADALUPE
PINEDA MURILLO JONATHAN YAHIR
ROMERO ESTRADA MARCO ANTONIO
TORRES MUNGUIA RICARDO

Q.B.P. MIGUEL ANGEL MORALES GIL

BACTERIOLOGIA
CLINICA

GRUPO: 4102C
 PRUEBAS BIOQUIMICAS

¿Qué son las pruebas bioquímicas?

Consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su
reacción, nos permite identificar distintos microorganismos presentes.

Su sistema de funcionamiento consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a

partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo.

Pruebas más utilizadas en el área de bacteriología:

En las gram (+) tenemos la prueba catalasa, oxidasa y coagulasa.

Las gram (-) son las pruebas de indol, urea, citrato, RM (rojo de metilo), VP (vogas proskaver),
fermentación de carbohidratos, producción de acido sulfhídrico y fermentación con producción
de gas.

PRUEBA CATALASA: La enzima catalasa se encuentra en la mayor parte de las bacterias

aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo (excepto el streptococcus)
generalmente las bacterias que carecen de citocromo también carecen de catalasa, lo que les
impide descomponer el peróxido de hidrogeno.
La catalasa descompone el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno bajo la fórmula 2
H2O2-->2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H 2O2, que
es un producto final del metabolismo aerobio de los azúcares.

PRUEBA OXIDASA: Sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la

oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromo-oxidasa que activa la oxidación del
citocromo que es reducido por el oxígeno molecular que produce agua o peróxido de hidrógeno
según la especie bacteriana.

La prueba de la oxidasa se usa sobre todo para:

• Identificar todas las especies de Neisseria (+)

• Diferenciar Pseudomonas de los miembros oxidasa negativos de las enterobacterias.

PRUEBA COAGULASA: Permite separar Staphilococcus aureus, que produce la enzima

coagulasa, de las otras especies de estafilococos que se denominan coagulasa negativos

PRUEBA DE INDOL: El indol es uno de los productos de degradación metabólica del

aminoácido triptófano. Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y
desaminar el triptófano con producción de indol, ácido pirúvico y amoníaco. La producción de
indol es una característica importante para la identificación de muchas especies de
microorganismos. La prueba de indol está basada en la formación de un complejo rojo cuando
el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído

PRUEBA RM: La prueba para detectar a los altos productores de ácido es conocida como Rojo
de Metilo (MR). La prueba para detectar a los menos productores de ácido está basada en el
procedimiento que describieron Voges y Proskauer en 1898 donde se presenta una reacción
colorida cuando los cultivos se incuban en un medio conteniendo dextrosa y peptona y se les
adiciona hidróxido de potasio exponiéndolos al aire.
FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS: son útiles para complementar los resultados de las
pruebas de utilización de los hidratos de carbono cuando existe alguna dificultad para la
identificación definitiva de un organismo.

Los medios de fermentación contienen peptona, extracto de ternera o de levadura, un indicador

y fuentes de carbohidratos individuales. La fermentación se detecta únicamente por la
producción de gas.

CITRATO: Sirve para determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única fuente
de carbono y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno en su metabolismo,
provocando una alcalinización del medio. Entre las enterobacterias estas características se dan
en los siguientes géneros: Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Citrobacter y algunas especies de
Salmonella. Sin embargo, Escherichia, Shigella, Salmonella typhi y Salmonella paratyphi son
incapaces de crecer con esos nutrientes.

UREA: Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp., otras
enterobacterias y estafilococos.

En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de

microorganismos.

PRUEBA DE ORNITINA: Esta prueba bioquímica permite identificar bacterias de acuerdo a su

motilidad a la reacción de Indol a la descarboxilación de la ornitina.

PRODUCCION DE ACIDO SULFHIDRICO EN LOS MEDIOS:

TSI: El tiosulfato de Sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el

sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido
sulfhídrico y producen sulfuro de hierro de color negro.

SIM: La sepas móviles pueden apreciarse en este medio, por la turbidez que producen
alrededor de la punción de siembra, mientras que aquellas sepas productoras de ácido
sulfhídrico se distinguen por la formación de un precipitado negro de sulfuro de hierro a partir
del tiosulfato siempre que el medio se mantenga a un pH mayor a 7.2.

Kligler: En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan los nutrientes

adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono
fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido
sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se combinan
con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el
indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente
solidificante.

CITAS BIBLIOGRAFICAS:

 http://www.portalesmedicos.com/diccionario_medico/index.../Coagulasa
 http://www.slideshare.net/breid/pruebas-bioqumicas-y-medios-de-cultivo-en-
bacterias
 http://es.scribd.com/doc/3288800/pruebas-bioquimicas-fundamentos-microbiologia
 http://perso.wanadoo.es/microdominguez/a.htm
 http://ezoraya.files.wordpress.com/2010/06/pruebas-bioquimicas.pdf
 http://www.uprm.edu/biology/cursos/micro/pruebas.htm